一种纯化、筛选优化蛋白的方法技术

本发明专利技术公开了一种纯化、筛选优化蛋白的方法。首先诱导表达菌体破碎；然后将包涵体分离、洗涤、制备；第三步是将包涵体进行溶解；尿素梯度透析复性法对包涵体复性；重组蛋白偷袭；最后将重组蛋白冷冻干燥保存。所述诱导表达的过程，在水浴中超声破菌，间隔10秒，反复不少于200次；包涵体进行溶解的时候，需要加入35mg/ml的终浓度缓冲液进行溶解沉淀，在15000rpm下进行离心30分钟。本发明专利技术的有益效果是，实验简单，费用较低，抗体的制备为将来检测临床器官和人工肝中的PERV的表达及传播具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种实验方法，具体来说，。
技术介绍
质粒是真核细胞细胞核外或原核生物拟核区外能够进行自主复制的遗传单位，包括真核生物的细胞器(主要指线粒体和叶绿体)中和细菌细胞拟核区以外的环状脱氧核糖核酸(DNA)分子。现在习惯上用来专指细菌(大肠杆菌)、酵母菌和放线菌等生物中细胞核或拟核中的DNA以外的DNA分子。在基因工程中质粒常被用做基因的载体(Vector)。许多细菌除了拟核中的DNA外，还有大量很小的环状DNA分子，这就是质粒(plasmid)(补充:部分质粒为RNA)。质粒上常有抗生素的抗性基因，例如，四环素抗性基因或卡那霉素抗性基因等。有些质粒称为附加体(episome)，这类质粒能够整合进真菌的染色体，也能从整合位置上切离下来成为游离于染色体外的DNA分子。质粒在宿主细胞体内外都可复制，通过个些特性，人们可以把一些目的DNA片断构建在质粒中，通过转化入大肠杆菌中，不断的复制，来得到目的产物。这就是转化的目的。
技术实现思路
为克服上述技术问题，我们提出了以下技术方案: ，首先诱导表达菌体破碎；然后将包涵体分离、洗涤、制备；第三步是将包涵体进行溶解；尿素梯本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种纯化、筛选优化蛋白的方法，其特征在于，首先诱导表达菌体破碎；然后将包涵体分离、洗涤、制备；第三步是将包涵体进行溶解；尿素梯度透析复性法对包涵体复性；重组蛋白偷袭；最后将重组蛋白冷冻干燥保存。

【技术特征摘要】
1.一种纯化、筛选优化蛋白的方法，其特征在于，首先诱导表达菌体破碎；然后将包涵体分离、洗涤、制备；第三步是将包涵体进行溶解；尿素梯度 透析复性法对包涵体复性；重组蛋白偷袭；最后将重组蛋白冷冻干燥保存。2.如权利要求1所述的一种纯化、筛选优化蛋白的方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐丽，
申请(专利权)人：徐丽，
类型：发明
国别省市：