本发明专利技术公开了一种能源柳组织培养快速繁殖方法。它包括以下步骤：A：外植体的选取；B：外植体消毒：外植体茎段去叶，然后将冲洗干净的枝条置于超净工作台内，先用乙醇溶液中清洗，用无菌水冲洗，然后用氯化汞消毒，无菌水冲洗；C：初代培养；D：增殖培养：将生长良好的初代培养茎段接入增殖培养基；E：生根培养；F：炼苗和移栽：将生根培养基的瓶盖打开，在室温下培养，然后取出幼苗，移栽到蛭石草炭土基质上。采用上述的方法后，由于本发明专利技术中选用了合理科学的培养方法及步骤，同时控制了合理的参数，由此培养出的能源柳组织质量非常好，能源柳声场快速，由此为实现能源柳规模化、工厂化育苗，加快优良种质的推广应用提供了重要的保证。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种。它包括以下步骤：A：外植体的选取；B：外植体消毒：外植体茎段去叶，然后将冲洗干净的枝条置于超净工作台内，先用乙醇溶液中清洗，用无菌水冲洗，然后用氯化汞消毒，无菌水冲洗；C：初代培养；D：增殖培养：将生长良好的初代培养茎段接入增殖培养基；E：生根培养；F：炼苗和移栽：将生根培养基的瓶盖打开，在室温下培养，然后取出幼苗，移栽到蛭石草炭土基质上。采用上述的方法后，由于本专利技术中选用了合理科学的培养方法及步骤，同时控制了合理的参数，由此培养出的能源柳组织质量非常好，能源柳声场快速，由此为实现能源柳规模化、工厂化育苗，加快优良种质的推广应用提供了重要的保证。【专利说明】
本专利技术涉及一种植物组织培养方法，具体地说是一种。
技术介绍
从瑞典引进的能源柳是一个适应能力强，可栽培地域宽，非常有前途的能源植物，并且具有很大商业潜力。世界各国对引进能源林植物都极为关注，瑞典培育的能源柳新品种已经成为许多国家争相引种的能源林繁殖材料，在利用技术方面也取得了突破性进展，发展潜力巨大。在国内，瑞典柳的引种实验在少数几个地区进行了栽种试验并获得成功，广泛的推广应用需要进一步的实验研究。目前大面积推广能源柳造林工作还缺乏足量、适应不同地域气候条件的优良种质资源，所以对瑞典能源柳进行引种研究，建立经济、可操作性强的能源柳的组培快繁体系，使优良能源柳品种组培快繁实现规模化和产业化，是及时而必要的。同时，为优良种质资源的保存与资源交流提供技术保障。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种能够实现能源柳规模化、工厂化育苗，加快优良种质的推广应用的。为了解决上述技术问题，本专利技术的，包括以下步骤:`A:外植体的选取:外植体取自扦插培养的新生枝条；B、外植体消毒:外植体茎段去叶，然后将冲洗干净的枝条置于超净工作台内，先用75%的乙醇溶液中清洗，用无菌水冲洗I次,然后用0.1%氯化汞消毒,无菌水冲洗；C、初代培养:经过消毒的外植体切成2-3cm的小段，每一个小茎段上至少有一个芽，将其接种在制备好的启动培养基上，启动培养基为B5+0.8mg/L6-BA+0.2mg/L NAA，培养室温度 20-25°C，光照强度 2000-3000LX，光照 12_14h/d，培养 20_25d ；D、增殖培养:将生长良好的初代培养茎段接入增殖培养基，增殖培养基为B5+0.6mg/L6-BA+0.lmg/L NAA，培养条件如步骤 3，培养 30_40d ；E、生根培养:将增殖培养培养基中健壮的幼芽，切成2-3cm的小段，接入生根培养基中生根培养，前IOd弱光培养，然后光照条件如步骤C培养，共培养35-40d ；F、炼苗和移栽:当生根培养的小苗长有3条以上不定根时，将生根培养基的瓶盖打开，在室温下培养，然后取出幼苗，移栽到蛭石草炭土基质上，保持温度20-25°C，湿度80-90%，并用遮阳网遮阴。所述步骤B中，外植体茎段去叶并置于流水下冲洗2.5-3.5小时，用75%的乙醇溶液中清洗25-35s,用0.1%氯化萊消毒6-8min,无菌水冲洗4_5次。所述步骤F中，在室温下培养6-8d。所述步骤F中，蛭石草炭土的体积比1:1。采用上述的方法后，由于本专利技术中选用了合理科学的培养方法及步骤，同时控制了合理的参数，由此培养出的能源柳组织质量非常好，能源柳声场快速，由此为实现能源柳规模化、工厂化育苗，加快优良种质的推广应用提供了重要的保证。【具体实施方式】下面结合【具体实施方式】，对本专利技术的作进一步详细说明。本专利技术的，包括以下步骤:A:外植体的选取:能源柳品种是从瑞典引进的苏柳799，选取当年生带芽茎段；B、外植体消毒:外植体茎段去叶，并置于流水下冲洗3小时，然后将冲洗干净的枝条置于超净工作台内，先用75%的乙醇溶液中清洗30s，用无菌水冲洗I次，然后用0.1%氯化汞消毒7min，无菌水冲洗4_5次,最后用滤纸吸干水分备用；C、初代培养:用手术刀将外植体切成2_3cm的小段，每一个小茎段上至少有一个芽，将其接种在制备好的启动培养基上，启动培养基为B5+ 0.8mg/L6-BA+0.2mg/L NAA，培养室温度20-25°C，光照强度2000-3000LX，光照12_14h/d，培养20_25d ;接种2d后开始发芽，诱导率为90%以上；D、增殖培养:增殖培养:初代培养20天后将将生长良好的初代培养茎段接入增殖培养基，增殖培养基为B5+0.6mg/L6-BA+0.lmg/L NAA,培养条件如步骤C，如果培养瓶内拥挤，及时转瓶培养，培养30d后，不定芽增殖数量达到15.50，芽苗生长健壮；E、生根培养:将增殖培养培养基中健壮的幼芽，切成2-3cm的小段，接入生根培养基中生根培养。生根培养基为1/2M`S`+0.8mg/L IBA，前IOd弱光(室内自然光)培养，然后光照条件如步骤C培养，共培养30-40d。生根率达85%以上，根系发达；F、炼苗和移栽:当生根培养的小苗长有3条以上不定根时，将生根培养基的瓶盖打开，在室温下培养7d，然后取出幼苗，移栽到蛭石草炭土基质上，蛭石草炭土的体积比1:1，保持温度20-25°C，湿度80-90%，并用遮阳网遮阴，及时喷杀菌剂防病，成活率达到85%以上。【权利要求】1.一种，包括以下步骤: A:外植体的选取:外植体取自扦插培养的新生枝条； B、外植体消毒:外植体茎段去叶，然后将冲洗干净的枝条置于超净工作台内，先用75%的乙醇溶液中清洗，用无菌水冲洗I次,然后用0.1%氯化汞消毒,无菌水冲洗； C、初代培养:经过消毒的外植体切成2-3cm的小段，每一个小茎段上至少有一个芽，将其接种在制备好的启动培养基上，启动培养基为B5+ 0.8 mg/L 6-BA+ 0.2 mg/L NAA，培养室温度 20-25 V，光照强度 2000-3000LX,光照 12_14h/d，培养 20_25d ； D、增殖培养:将生长良好的初代培养茎段接入增殖培养基，增殖培养基为B5+0.6mg/L6-BA+0.lmg/L NAA,培养条件如步骤3，培养30_40d ； E、生根培养:将增殖培养培养基中健壮的幼芽，切成2-3cm的小段，接入生根培养基中生根培养，前IOd弱光培养，然后光照条件如步骤C培养，共培养35-40d ； F、炼苗和移栽:当生根培养的小苗长有3条以上不定根时，将生根培养基的瓶盖打开，在室温下培养，然后取出幼苗，移栽到蛭石草炭土基质上，保持温度20-25°C，湿度80-90%，并用遮阳网遮阴。2.按照权利要求1所述的，其特征在于:所述步骤B中，外植体茎段去叶并置于流水下冲洗2.5-3.5小时，用75%的乙醇溶液中清洗25-35s，用0.1%氯化萊消毒6-8min,无菌水冲洗4_5次。3.按照权利要求1所述的，其特征在于:所述步骤F中，在室温下培养6-8d。4.按照权利要求1所述的，其特征在于:所述步骤F中，蛭石草炭土的体积比1:1。【文档编号】A01H4/00GK103733997SQ201310718262【公开日】2014年4月23日 申请日期:2013年12月24日 优先权日:2013年12月24日 【专利技术者】裴乐乐, 张留恩, 吴珊珊, 金波昌, 张志永 申请人本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种能源柳组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：A：外植体的选取：外植体取自扦插培养的新生枝条；B、外植体消毒：外植体茎段去叶，然后将冲洗干净的枝条置于超净工作台内，先用75%的乙醇溶液中清洗,用无菌水冲洗1次，然后用0.1%氯化汞消毒，无菌水冲洗；C、初代培养：经过消毒的外植体切成2?3cm的小段,每一个小茎段上至少有一个芽，将其接种在制备好的启动培养基上，启动培养基为B5+?0.8?mg/L?6?BA+?0.2?mg/L?NAA，培养室温度20?25?℃,光照强度2000?3000Lx,光照12?14h/d，培养20?25d；D、增殖培养：将生长良好的初代培养茎段接入增殖培养基，增殖培养基为B5+0.6mg/L?6?BA+0.1mg/L?NAA，培养条件如步骤3，培养30?40d；E、生根培养:将增殖培养培养基中健壮的幼芽，切成2?3cm的小段，接入生根培养基中生根培养，前10d弱光培养，然后光照条件如步骤C培养，共培养35?40d；F、炼苗和移栽：当生根培养的小苗长有3条以上不定根时，将生根培养基的瓶盖打开，在室温下培养，然后取出幼苗，移栽到蛭石草炭土基质上，保持温度20?25℃，湿度80?90%，并用遮阳网遮阴。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：裴乐乐，张留恩，吴珊珊，金波昌，张志永，
申请(专利权)人：镇江山水湾生态农业开发有限公司，
类型：发明
国别省市：
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