突变型β葡糖苷酶、生物质分解用酶组合物和糖液的制造方法技术

本发明专利技术提供在生物质存在下活性高、且比现有酶热稳定高的新β葡糖苷酶。一种β葡糖苷酶，其特征在于，选自相对于亲β葡糖苷酶的氨基酸Glu39、Asp169、Arg170、Arg220、Tyr227、Glu330中的至少3个以上的氨基酸缺失和/或向其他氨基酸置换，且显示纤维二糖分解活性。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及新的β葡糖苷酶、包含该β葡糖苷酶的生物质分解用酶组合物、和使用它们来水解来源于纤维素的生物质的糖液的制造方法。
技术介绍
纤维素的糖化有各种方法，但开发能量使用量少且糖收率高的酶糖化法已经成为主流。如果将作为纤维素分解酶的纤维素酶大致分类，则分为作用于纤维素的结晶区域的纤维二糖水解酶、从纤维素分子链内部开始作用而降低分子量的内切葡聚糖酶。已知这些纤维素酶受到作为生成物之一的纤维二糖阻抑。另外β_葡糖苷酶是作用于水溶性寡糖或纤维二糖，催化其β_糖苷键的水解反应的酶。特别是，β_葡糖苷酶是用于充分地获得作为发酵原料有用的葡萄糖所必需的酶。另外，已知纤维二糖水解酶或内切葡聚糖酶由于纤维素分解所生成的纤维二糖的积累而发生反应阻抑。即，β_葡糖苷酶能够大幅降低由纤维素分解而生成的纤维二糖的积累，因此具有大幅提高纤维素分解效率这样的效果。纤维素在草本系植物、木本系植物中大量含有，因此将这些植物总称为含纤维素的生物质。含纤维素的生物质中除了纤维素之外，还包含木聚糖、阿拉伯聚糖等半纤维素、和木质素。特别是已知由于含纤维素的生物质中所含的木质素是芳香族系的高分子化合物，因此在使本文档来自技高网...

【技术保护点】
突变型β葡糖苷酶，其特征在于，在各单体之间形成氢键或离子键的氨基酸的位置，具有使β葡糖苷酶的4聚体形成不稳定化的突变，并且，该突变型β葡糖苷酶具有与野生型相比同等或更高的纤维二糖分解活性。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.07.14 JP 2011-1557921.突变型β葡糖苷酶，其特征在于，在各单体之间形成氢键或离子键的氨基酸的位置，具有使β葡糖苷酶的4聚体形成不稳定化的突变，并且，该突变型β葡糖苷酶具有与野生型相比同等或更高的纤维二糖分解活性。2.根据权利要求1所述的突变型β葡糖苷酶，具有与序列号I的氨基酸序列有90%以上的序列同一性的氨基酸序列，在该有90%以上的序列同一性的氨基酸序列中，包含与选自序列号I的氨基酸序列的第39位的谷氨酸、第169位的天冬氨酸、第170位的精氨酸、第220位的精氨酸、第227位的酪氨酸和第330位的谷氨酸中的至少3个以上的氨基酸相当的氨基酸的突变。3.根据权利要求1或2所述的突变型β葡糖苷酶，具有与序列号I的氨基酸序列有90%以上的序列同一性的氨基酸序列，在该有90 %以上的序列同一性的氨基酸序列中，包含与选自序列号I的氨基酸序列的第39位的谷氨酸、第169位的天冬氨酸、第170位的精氨酸、第220位的精氨酸、第227位的酪氨酸和第330位的谷氨酸中的至少3个以上的氨基酸相当的氨基酸向具有中性侧链的氨基酸的置换。4.根据权利要求1~3的任一项所述的突变型β葡糖苷酶，具有与序列号I的氨基酸序列有90%以上的序列同一性的氨基酸序列，在该有90%以上的序列同一性的氨基酸序列中，包含与序列号I的氨基酸序列的第170位的精氨酸、第220位的精氨酸和第227位的酪氨酸相当的氨基酸向具有中性侧链的氨基酸的置换。5.根据权利要求3或4所述的突变型β葡糖苷酶，具有中性侧链的氨基酸从丙氨酸、苯丙氨酸和甘氨酸中选择。6.根据权利要求1~5的任一项所述的突变型β葡糖苷酶，具有与序列号I的氨基酸序列有90%以上的序列同一性的氨基酸序列，在...

【专利技术属性】
技术研发人员：栗原宏征，山田胜成，石川一彦，三岛由美子，和田康史，门祐示，
申请(专利权)人：东丽株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP