一种藏药材塞北紫堇的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种塞北紫堇药材的检测方法，其采用紫外分光光度法测定其总生物碱的含量，包括配置原阿片碱对照品溶液、制备标准溶液制作标准曲线和样品溶液的制备，样品溶液配制方法为将塞北紫堇药材细粉处用甲醇回流提取，过滤后的残渣用硫酸溶液溶解，获得样品溶液，在410nm波长处测其吸收度，根据标准曲线计算药材中的总生物碱含量。本发明专利技术使用原阿片碱作为对照，在供试品的制备中采用加热回流利用和硫酸溶液溶解的方式除去干扰因素，并利用生物碱与溴甲酚绿和磷酸盐缓冲液发生特征反应，采用二氯甲烷萃取特征反应的产物进行测定，由于二氯甲烷只对特征反应中生成的产物进行萃取，避免了非生物碱类成分的干扰，增加了结果的准确性及科学性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种药材的检测方法，具体地说，涉及。
技术介绍
紫堇属全球约320种，主要产于亚洲，我国约200余种，全国均有分布，以西南部种类分布最多，其中青藏高原约120余种，仅西藏就多达94种。塞北紫堇为罂科紫堇属植物塞北紫堇(别名赛北紫堇)的干燥全草，分布在青海、西藏、甘肃、四川等地，为藏成药中的常用药，数据显示有25%的藏成药中含有该药材，用于治疗各种出血、肝炎、胆囊炎、流感等疾病，也有将其用于治疗跌打损伤或其它外伤、发烧、肠胃炎等。从目前对该属植物的化学成分研究结果来看，本属植物主要含原托品碱类、原小檗碱类、苯酚异喹啉类、苯骈菲啶类、卞基异喹啉类、阿朴碱类、螺苄异喹啉类、枯拉灵类等结构类型的生物碱。该属植物及其提取物大多具有广泛的药理活性，如调节心血管系统、抗菌等。李吉昌等人发表的《赛北紫堇的生物碱成分研究》对采自云南省迪庆藏族自治州香格里拉县的赛北紫堇的根进行了提取分离和结构鉴定，首次报道了从其中分离并鉴定出7种生物碱。该文献的主要目的是对塞北紫堇植株中的有效成分进行鉴定，确定其中所含生物碱的具体种类，其对采摘植株是否是塞北紫堇的质量控制是由迪庆自治洲藏医院扎西泽仁医师凭经验确定的，并没有具体的检测方法，而塞北紫堇标准收载于《青海省藏药炮制规范》2010年版第60页，现行质量标准相对落后，仅有性状、薄层鉴别项，没有任何含量测定指标，并且由于紫堇属植物种类繁多，性状结构基本类似，面对大量的备选紫堇属药材植物，不能准确的鉴别出塞北紫堇，有效的控制成药的质量。此外藏成药中多将生长于西藏的塞北紫堇作为原料药入味，但是根据植物生长机理可知，即使是同一种植物，由于其使用的部位不同，生成的环境不同，则植株中有效成分及其含量也会存在一定的差异，造成塞北紫堇质量参差不齐，因此需要对该种植物进行严格筛选，保证以其为原料的成药的安全性、有效性。李吉昌、林跃华等人发表的《紫外分光光度法测定赛北紫堇中总生物碱含量》中采用对照品盐酸小檗碱作为对照品制备标准曲线，但本实验采用超声后过氧化铝柱的办法制备样品，使用盐酸小檗碱为对照品，使用直接测定的办法对赛北紫堇全草中的总生物碱含量进行测定，由于全草中含有大量的叶绿素，直接测定的方法无法避免叶绿素等有色杂质的干扰，即直接测定法无法保证其他非生物碱的的吸收干扰，尤为重要的是，塞北紫堇中并不存在盐酸小檗碱，使用盐酸小檗碱来作为对照品进行总生物碱的测定，明显是不科学的。
技术实现思路
本专利技术的所要解决的技术问题是现行的塞北紫堇质量标准相对落后，仅有性状、薄层鉴别项，没有任何含量测定指标，不能准确有效的控制药材的质量，进而提供一种藏药材塞北紫堇的质量检测方法。为此，本专利技术采取的技术方案为:—种塞北紫堇药材的检测方法，包括采用紫外分光光度法测定其总生物碱的含量，其步骤如下，(I)第一对照品溶液的配置，称取干燥至恒重的原阿片碱5_8mg，加体积份数比1%的硫酸溶液l_3ml使溶解，用水定容至100ml，摇匀，即得；(2)标准溶液的制备，吸取对照品溶液0、1、2、3、4、5ml，分别置分液漏斗中，各加0.1%溴甲酚绿试液2-4ml、磷酸盐缓冲液2-3ml，用水补足溶液至10ml。加二氯甲烷10ml，振摇2min,静置,分出有机层于400nm-450nm波长处测定吸收度,绘制标准曲线；(3)样品溶液的制备，取塞北紫堇药材细粉l_5g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇50ml，称定所述塞北紫堇药材细粉与甲醇的总重量，加热回流I小时，过滤得到第一滤液，取所述第一滤液25ml，蒸干，得到残渣，所述残渣用体积份数比10%的硫酸溶液Iml溶解，再用水稀释并定容至5ml后，过滤得到第二滤液即所需的样品溶液；(4)测定，精密吸取所述样品溶液Iml置分液漏斗中按所述步骤(2)的方法测定吸收度，并由标准曲线求算含量；以干燥的塞北紫堇药材计算，生物碱总含量以原阿片碱(C20H19N05)计，不得少于 0.5%。上述塞北紫堇药材的检测方法中，所述紫外分光光度法测定其总生物碱的含量，包括如下步骤，(I)第一对照品溶液的配置称取干燥至恒重的原阿片碱5mg，加体积份数比1%的硫酸溶液Iml使溶解,用水定容至100ml，摇匀，即得。(2)标准溶液的制备吸取对照品溶液0、l、2、3、4、5ml，分别置分液漏斗中，各加0.1%溴甲酚绿试液2ml、磷酸盐缓冲液2ml，用水补足溶液至10ml。加二氯甲烷10ml，振摇2min,静置,分出有机层于400nm-450nm波长处测定吸收度,绘制标准曲线。(3)样品溶液的制备取塞北紫堇药材细粉l_5g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇50ml，称定所述塞北紫堇药材细粉与甲醇的总重量，加热回流I小时，过滤得到第一滤液，取所述第一滤液25ml，蒸干，得到残渣，所述残渣用体积份数比10%的硫酸Iml溶解，再用水稀释并定容至5ml后，过滤得到第二滤液即所需的样品溶液。(4)测定精密吸取所述样品溶液Iml置分液漏斗中，按所述步骤(2)的方法测定吸收度，并由标准曲线求算含量。上述塞北紫堇药材的检测方法中，所述紫外分光光度法测定其总生物碱的含量，包括如下步骤，(I)第一对照品溶液的配置称取干燥至恒重的原阿片碱5mg，加体积份数比1%的硫酸溶液Iml使溶解,用水定容至100ml，摇匀，即得；(2)标准溶液的制备吸取对照品溶液0、l、2、3、4、5ml，分别置分液漏斗中，各加0.1%溴甲酚绿试液2ml、磷酸盐缓冲液2ml，用水补足溶液至10ml。加二氯甲烷10ml，振摇2min,静置，分出有机层于，410nm波长处测定吸收度，绘制标准曲线；(3)样品溶液的制备取塞北紫堇药材细粉1.5g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇50ml，称定所述塞北紫堇药材细粉与甲醇的总重量，加热回流I小时，过滤得到第一滤液，取所述第一滤液25ml，蒸干得到残渣，所述残渣用体积份数比10%的硫酸Iml溶解，再用水稀释并定容至5ml后，过滤得到第二滤液即所需的样品溶液；(4)测定精密吸取所述样品溶液Iml置分液漏斗中按所述步骤(2)的方法测定吸收度，并由标准曲线求算含量。上述塞北紫堇药材的检测方法中，所述磷酸盐缓冲液由38g磷酸二氢钠与5.04g磷酸氢二钠，加水定容至IOOOml，摇匀配制得到。上述塞北紫堇药材的检测方法中，所述方法还包括采用高效液相色谱法测定原阿片碱的含量的步骤，其包括，色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以由体积份数比0.2%冰醋酸与体积份数比0.5%三乙胺的缓冲溶液形成的pH为6.0的第一混合溶液与乙腈形成的第二混合液为流动相，其中所述第一混合溶液与乙腈的体积比为(70-80): (20-30)，检测波长为280-290nm ;理论板数按原阿片碱峰计算应不低于3000 ；第二对照品溶液的制备取原阿片碱对照品5mg，加体积份数比1%硫酸使溶解，用水定容至100ml，即得；供试品溶液的制备取所述塞北紫堇药材细粉l_5g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇50ml，称定所述塞北紫堇药材与甲醇的总重量得到第一总重量，加热回流I小时，放冷，再次称定所述塞北紫堇药材与甲醇的总重量得到第二总重量，并用甲醇补足第二总重量中减失的重量使其与第一总重量相等，摇匀，过滤得到第三滤液，取所述第三滤液25ml，蒸干得到第一残渣。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种塞北紫堇药材的检测方法，其特征在于，采用紫外分光光度法测定其总生物碱的含量，其步骤如下，（1）第一对照品溶液的配置，称取干燥至恒重的原阿片碱5?8mg，加体积份数比1%的硫酸溶液1?3ml使溶解，用水定容至100ml，摇匀，即得；（2）标准溶液的制备，吸取对照品溶液0、1、2、3、4、5ml，分别置分液漏斗中，各加0.1%溴甲酚绿试液2?4ml、磷酸盐缓冲液2?3ml，用水补足溶液至10ml。加二氯甲烷10ml，振摇2min，静置，分出有机层于400nm?450nm波长处测定吸收度，绘制标准曲线；（3）样品溶液的制备，取塞北紫堇药材细粉1?5g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇50ml，称定所述塞北紫堇药材细粉与甲醇的总重量，加热回流1小时，过滤得到第一滤液，取所述第一滤液25ml，蒸干，得到残渣，所述残渣用体积份数比10%的硫酸溶液1ml溶解，再用水稀释并定容至5ml后，过滤得到第二滤液即所需的样品溶液；（4）测定，精密吸取所述样品溶液1ml置分液漏斗中按所述步骤（2）的方法测定吸收度，并由标准曲线求算含量；以干燥的塞北紫堇药材计算，生物碱总含量以原阿片碱（C20H19NO5）计，不得少于0.5%。...

【技术特征摘要】
1.一种塞北紫堇药材的检测方法，其特征在于，采用紫外分光光度法测定其总生物碱的含量，其步骤如下， (1)第一对照品溶液的配置，称取干燥至恒重的原阿片碱5-8mg，加体积份数比1%的硫酸溶液l_3ml使溶解，用水定容至100ml，摇匀，即得； (2)标准溶液的制备，吸取对照品溶液0、l、2、3、4、5ml，分别置分液漏斗中，各加0.1%溴甲酚绿试液2-4ml、磷酸盐缓冲液2-3ml，用水补足溶液至10ml。加二氯甲烷10ml，振摇2min,静置,分出有机层于400nm-450nm波长处测定吸收度,绘制标准曲线； (3)样品溶液的制备，取塞北紫堇药材细粉l_5g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇50ml，称定所述塞北紫堇药材细粉与甲醇的总重量，加热回流I小时，过滤得到第一滤液，取所述第一滤液25ml，蒸干，得到残渣，所述残渣用体积份数比10%的硫酸溶液Iml溶解，再用水稀释并定容至5ml后，过滤得到第二滤液即所需的样品溶液； (4)测定，精密吸取所述样品溶液Iml置分液漏斗中按所述步骤(2)的方法测定吸收度，并由标准曲线求算含量；以干燥的塞北紫堇药材计算，生物碱总含量以原阿片碱(C20H19N05)计，不得少于 0.5%。2.根据权利要求1所述的塞北紫堇药材的检测方法，其特征在于，所述紫外分光光度法测定其总生物碱的含量，包括如下步骤， (1)第一对照品溶液的配置称取干燥至恒重的原阿片碱5mg，加体积份数比1%的硫酸溶液Iml使溶解，用水定容至100ml，摇匀，即得； (2)标准溶液的制备吸取对照品溶液0、1、2、3、4、5ml，分别置分液漏斗中，各加0.1%溴甲酹绿试液2ml、磷酸盐缓冲液2ml,用水补足溶液至10ml。加二氯甲烧IOml,振摇2min,静置，分出有机层于400nm-450nm波长处测定吸收度，绘制标准曲线；` (3)样品溶液的制备取塞北紫堇药材细粉l_5g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇50ml，称定所述塞北紫堇药材细粉与甲醇的总重量，加热回流I小时，过滤得到第一滤液，取所述第一滤液25ml，蒸干，得到残渣，所述残渣用体积份数比10%的硫酸Iml溶解，再用水稀释并定容至5ml后，过滤得到第二滤液即所需的样品溶液； (4)测定精密吸取所述样品溶液Iml置分液漏斗中，按所述步骤(2)的方法测定吸收度，并由标准曲线求算含量。3.根据权利要求2所述的塞北紫堇药材的检测方法，其特征在于，所述紫外分光光度法测定其总生物碱的含量，包括如下步骤， (1)第一对照品溶液的配置称取干燥至恒重的原阿片碱5mg，加体积份数比1%的硫酸溶液Iml使溶解，用水定容至100ml，摇匀，即得； (2)标准溶液的制备吸取对照品溶液0、1、2、3、4、5ml，分别置分液漏斗中，各加0.1%溴甲酹绿试液2ml、磷酸盐缓冲液2ml,用水补足溶液至10ml。加二氯甲烧IOml,振摇2min,静置，分出有机层于，410nm波长处测定吸收度，绘制标准曲线； (3)样品溶液的制备取塞北紫堇药材细粉1.5g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇50ml，称定所述塞北紫堇药材细粉与甲醇的总重量，加热回流I小时，过滤得到第一滤液，取所述第一滤液25ml，蒸干得到残渣，所述残渣用体积份数比10%的硫酸Iml溶解，再用水稀释并定容至5ml后，过滤得到第二滤液即所需的样品溶液； (4)测定精密吸取所述样品溶液Iml置分液漏斗中按所述步骤(2)的方法测定吸收度，并由标准曲线求算含量。4.根据权利要求1-3任一所述的塞北紫堇药材的检测方法，其特征在于， 所述磷酸盐缓冲液由38g磷酸二氢钠与5.04g磷酸氢二钠，加水定容至1000ml，摇匀配制得到。5.根据权利要求1-4任一所述的塞北紫堇药材的检测方法，其特征在于，所述方法还包括采用高效液相色谱法测定原阿片碱的含量的...

【专利技术属性】
技术研发人员：李怀平，任松鹏，单玉刚，魏永义，
申请(专利权)人：山东阿如拉药物研究开发有限公司，
类型：发明
国别省市：