发光聚合物循环扩增制造技术

本发明专利技术涉及一个用于探测在液体试样中具有高敏感度的被分析物的发光免疫分析方法。本发明专利技术提供了一个独特的组合(i)利用具有小的传感表面积用以结合被分析物分子的探针，(ii)利用一个结合有多个结合分子和多个发光标记的高分子量的支化聚合物，并且(iii)具有免疫复合物结构的探针循环地返回至试剂容器和扩增容器1-10次并且重复与试剂和扩增聚合物的反应，以改善探测水平的敏感度。对每个循环，发光信号的比噪音提高显著。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】发光聚合物循环扩增
本专利技术涉及一种在液体试样中利用一个具有小表面积的探针和一个具有多个结合分子和多个荧光或化学发光法标记的支化聚合物以探测被分析物的方法。这个方法的敏感性是通过多次循环结合反应和扩增反应来提高的。
技术介绍
在许多免疫分析应用中需要发展高灵敏度的测定方法。发光染料，发射荧光或化学发光信号，提供了若干实用性的优点，例如:稳定性，低成本，适合于标记步骤和最小限度的受生物试样或固相底物干扰的光谱性质。与其他测定方法相比，荧光染料法有一个缺点，特别是ELISA，其酶活力扩增了与免疫复合物结构相关的可测信号的总量。芳基磺酸酯花青突光染料被描述于Mujumdar等(1993) BioconjugateChemistry,4:105-111 ;Southwick 等(1990)Cytometry, 11:418-430 ;和美国专利号5，268，486。每一篇参考文献都描述了 Cy5，并且其可以从宾夕法尼亚州匹兹堡的Biological Detection Systems公司买到，商品名为FLU0R0LINK?Cy5?。该芳基磺酸酯花青荧光染料具有高消光系数(通常为13本文档来自技高网...

【技术保护点】
一个探测在液体试样中的被分析物的方法，包括的步骤有：(a)获得一探针，其具有被固定在该探针梢端上的第一抗体，其中该梢端表面的直径≤5毫米；(b)将该探针梢端浸入包含具有被分析物的样品溶液的样品容器中，将被分析物与在探针梢端的第一抗体结合；(c)将该探针梢端浸入包含试剂溶液的试剂容器，该试剂溶液包括和一结合配对的第一成员结合的第二抗体分子以结合该试剂和被分析物；(d)将该探针梢端浸入含第一洗液的第一洗涤容器中来洗涤探针梢端；(e)将该探针梢端浸入含有扩增溶液的扩增容器中，该扩增溶液中含有一聚合物，该聚合物结合有至少5个分子的该结合配对的第二成员和至少25个荧光标记，以在该探针梢端上形成该被分析物...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.04.20 US 61/477,1711.一个探测在液体试样中的被分析物的方法，包括的步骤有: (a)获得一探针，其具有被固定在该探针梢端上的第一抗体，其中该梢端表面的直径< 5毫米； (b)将该探针梢端浸入包含具有被分析物的样品溶液的样品容器中，将被分析物与在探针梢端的第一抗体结合； (C)将该探针梢端浸入包含试剂溶液的试剂容器，该试剂溶液包括和一结合配对的第一成员结合的第二抗体分子以结合该试剂和被分析物； (d)将该探针梢端浸入含第一洗液的第一洗涤容器中来洗涤探针梢端； (e)将该探针梢端浸入含有扩增溶液的扩增容器中，该扩增溶液中含有一聚合物，该聚合物结合有至少5个分子的该结合配对的第二成员和至少25个荧光标记，以在该探针梢端上形成该被分析物，该第一抗体，该第二抗体，和该结合配对的第一和第二成员间的免疫复合体，其中该聚合物是支化的，并且其分子量至少为约一百万道尔顿，发光标记的分子量小于2，OOO道尔顿；(在扩增容器中横向地流动扩增溶液) (f)将该探针梢端浸入含第二洗液的第二洗涤容器以洗涤探针梢端； (g)重复步骤(c)至(f)1-10次，并且 (h)通过测定在探针梢端的发光信号来探测形成的免疫复合物，其中该第一抗体和该第二抗体是针对该被分析物的抗体。2.根据权利要求1的方法，其中该梢端表面是小于等于大约2毫米。`3.根据权利要求1的方法，其中该结合配对是一个半抗原和其抗体，配位体及其受体，核酸的互补链，或凝集素和碳水化合物。4.根据权利要求3的方法，其中该结合配对是生物素和链霉亲和素，生物素和抗生物素蛋白(avidin),生物素和链霉亲和素，生物素和亲和素(neutravidin),突光素和抗突光素，异羟基洋地黄毒苷/抗异羟基洋地黄毒苷(digioxigenin/ant1-digioxigenin),或DNP...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗伯特·F·祖克，谭洪，
申请(专利权)人：万迈医疗仪器有限公司，
类型：
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