一种已烯雌酚胶体金免疫层析试纸卡制造技术

本实用新型专利技术公开了一种已烯雌酚胶体金免疫层析试纸卡。本实用新型专利技术的技术方案要点为：一种已烯雌酚胶体金免疫层析试纸卡，包括塑料盒体和封装于塑料盒体内的试纸条，所述的试纸条的底层为支撑层，该支撑层上由左到右依次附着有紧密相连的样品垫、金标抗体结合垫、硝酸纤维素膜和吸收垫，所述的塑料盒体上开有加样孔和观察窗，该加样孔的位置与试纸条上的样品垫位置相对应，观察窗与试纸条上的硝酸纤维素膜位置相对应。本实用新型专利技术操作简单、快速准确、灵敏度高、成本低、稳定性好，可进行批量检测。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本技术公开了一种已烯雌酚胶体金免疫层析试纸卡。本技术的技术方案要点为：一种已烯雌酚胶体金免疫层析试纸卡，包括塑料盒体和封装于塑料盒体内的试纸条，所述的试纸条的底层为支撑层，该支撑层上由左到右依次附着有紧密相连的样品垫、金标抗体结合垫、硝酸纤维素膜和吸收垫，所述的塑料盒体上开有加样孔和观察窗，该加样孔的位置与试纸条上的样品垫位置相对应，观察窗与试纸条上的硝酸纤维素膜位置相对应。本技术操作简单、快速准确、灵敏度高、成本低、稳定性好，可进行批量检测。【专利说明】一种已烯雌酚胶体金免疫层析试纸卡
本技术属于食品安全一兽药残留免疫化学检测
，具体涉及一种已烯雌酚胶体金免疫层析试纸卡。
技术介绍
已烯雌酹(diethylstilbestrol, DES)又名乙底酹、人造求偶素，是人工合成的二苯乙烯类雌性激素，可产生与天然雌二醇相同的药理与治疗效果，临床用于治疗绝经期综合症、闭经或月经过少、功能性子宫出血，老年性阴道炎，骨质疏松症及前列腺炎等。DES在兽医临床上主要用于动物催情，治疗胎衣不下、排出死胎、子宫炎等。由于DES具有促进动物增重，增加蛋白质沉积和减少脂肪沉积的作用，曾被广泛用于促进动物生长、增加瘦肉率、提高饲料转化率。20世纪70年代末，大量的调查和研究报告显示DES具有生殖和遗传毒性(包括致癌和致畸作用)，可诱发生殖系统恶性肿瘤，孕期用药有致胎儿先天缺陷危险，女婴成年后发生阴道腺病或宫颈癌(DES综合症)的机率大大增加，因此食用残留DES的畜产品会给人类健康造成严重危害。目前世界各国均规定食品动物养殖中不得以任何途径和方式使用DES，美国从1979年开始禁止使用食品动物的促生长剂，欧盟从1986年开始禁止使用DES用于食品动物并限制进口其他国家使用过该药的动物性食品，2002年我国农业部第176号公告和第193号公告均规定禁止使用DES。2004年4月4日，中华人民共和国农业部发布《2003年度动物性产品中兽药残留监控计划》(农牧发6号)，对已烯雌酚在动物性食品中要求零检出。但在畜牧养殖业中非法添加DES的情况不时出现，因而对动物及动物性食品进行DES残留监控是保障动物性食品安全的关键手段。目前国内外文献报道用于DES残留检测的理化方法包括高效液相色谱法(HPLC)、高效液相色谱一串联质谱法(HPLC-MS)、气相色谱法(GC)、气相色谱一质谱联用法(GC-MS)、薄层色谱法(TLC)等。这些方法灵敏、准确、杂质干扰少，具有较高的可重复性和权威性。但实验仪器昂贵、保养程序复杂、设备对环境条件要求高、技术含量高、试剂毒性大、单个样品检测成本高、样品前处理复杂、操作过程繁琐，不能实现现场检测。而免疫学方法建立在抗体对抗原的分子识别上，其主要优点是抗原抗体的亲合力高、检测快速、经济实用，能够实现对生物液体的小体积、大通量检测，是最灵敏的方法之一。胶体金标记免疫分析法是近年来迅速发展的一种新型分析技术，其特点是简便快速、成本低、无污染、无需培训，非常适合于现场检测。与ELISA相比，具有样品前处理简单，显色时间短(3-5 min)，且所有试剂包含在一根试纸条上，无需使用仪器等优点，具有广阔的市场前景和应用价值。因此，研制快速、灵敏、高效的已烯雌酚胶体金免疫层析试纸卡对于保障动物性食品安全具有十分重要的意义。本项目也得到2012年度国家自然科学基金项目(U1204310)资金支持。
技术实现思路
本技术解决的技术问题是提供了一种操作简单、快速准确、灵敏度高、成本低、稳定性好，可进行批量检测的已烯雌酚胶体金免疫层析试纸卡。本技术的技术方案是:一种已烯雌酚胶体金免疫层析试纸卡，其特征在于:所述的已烯雌酚胶体金免疫层析试纸卡包括塑料盒体和封装于塑料盒体内的试纸条，所述的试纸条的底层为支撑层，该支撑层上由左到右依次附着有紧密相连的样品垫、金标抗体结合垫、硝酸纤维素膜和吸收垫，所述的塑料盒体上开有加样孔和观察窗，该加样孔的位置与试纸条上的样品垫位置相对应，观察窗与试纸条上的硝酸纤维素膜位置相对应，所述的硝酸纤维素膜上有已烯雌酚一载体蛋白偶联物溶液印制的检测线(T线)和羊抗鼠IgG溶液印制的质控线(C线)，两者间距5 mm，其中已烯雌酚一载体蛋白偶联物溶液印制的检测线(T线)位于靠近样品垫的一侧，所述的结合垫上灌注有胶体金标记的抗已烯雌酚单克隆抗体。本技术所述的支撑层是由聚氯乙烯树脂与稳定剂及辅料配合制成的PVC板。本技术所述的吸收垫是由吸水能力极强的植物长纤维为原材料制成的纯白滤纸。本技术所述的样品垫和金标抗体结合垫是由玻璃纤维棉制作而成的。本技术所述的样品垫和金标抗体结合垫的叠压宽度为2 mm,吸收垫与硝酸纤维素膜的叠压宽度为2 _。本技术所述的样品垫、金标抗体结合垫和吸收垫上方覆盖有胶膜保护层。本技术所述的硝酸纤维素膜两端分界处有标记线。本技术具有以下优点:(1)灵敏度高、特异性强。已烯雌酚胶体金免疫层析试纸卡以胶体金标记高亲和力的单克隆抗体制备而成，金标抗体中金颗粒与抗体分子通过异性电荷间范德华力相结合，胶体金对单克隆抗体的特异性和亲和力影响很小。因此，快速检测试纸卡具有较高的灵敏度和特异性，其检测灵敏度可达0.5 ng/ml ；(2)操作简单、方便快捷。使用快速检测试纸卡时无需其它任何试剂，只要将处理后的样品溶液用滴管滴入试纸卡加样孔内3?4滴，3飞min即可观察结果；(3)检测结果形象、直观。试纸卡以红色印迹线“ I ”或“ Il ”作为检测线的阳性和阴性标记，即在硝酸纤维素膜上质控线(C线)显示一条红色“ I ”印迹时，表示被检测样品溶液中已烯雌酚残留含量>0.5 ng/ml ;若硝酸纤维素膜上质控线(C线)和检测线(T线)同时出现两条红色“ Il ”印迹时，表示样品溶液中已烯雌酚残留含量<0.5 ng/ml。结果形象直观，简单准确，不容易出现误判；(4)胶膜的使用可以延长检测结果观察时间，试纸卡稳定性好。本试纸卡样品吸收垫将检测溶液完全吸收，使之与偶联垫上金标抗体充分反应，可以有效减少误差率；还可以防止外界杂质干扰，影响金标抗体与检测抗原的结合；(5)成本低、投资少。使用本技术试纸卡，不需要另配复杂的仪器设备和昂贵的试剂，现场检测一步到位，成本低廉，见效快；(6)易于大范围推广应用。本试纸卡操作简单，适合不同类别的人员使用，如实验室检测、海关检疫、卫生监督、规模养殖及个体生产等，具有广阔的市场前景和较大的经济效益和社会效益。【专利附图】【附图说明】图1是本技术的结构示意图；图2是本技术中试纸条的侧视图；图3是本 技术中试纸条的俯视图。【具体实施方式】结合附图详细描述实施例。一种已烯雌酚胶体金免疫层析试纸卡，包括塑料盒体I和封装于塑料盒体I内的试纸条2，所述的试纸条2的底层为支撑层3，该支撑层3上由左到右依次附着有紧密相连的样品垫4、金标抗体结合垫5、硝酸纤维素膜6和吸收垫7，所述的塑料盒体I上开有加样孔8和观察窗9，该加样孔8的位置与试纸条2上的样品垫4位置相对应，观察窗9与试纸条2上的硝酸纤维素膜6位置相对应，所述的硝酸纤维素膜6上有已烯雌酚一载体蛋白偶联物溶液印制的检测线(T线)1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种已烯雌酚胶体金免疫层析试纸卡，其特征在于：所述的已烯雌酚胶体金免疫层析试纸卡包括塑料盒体和封装于塑料盒体内的试纸条，所述的试纸条的底层为支撑层，该支撑层上由左到右依次附着有紧密相连的样品垫、金标抗体结合垫、硝酸纤维素膜和吸收垫，所述的塑料盒体上开有加样孔和观察窗，该加样孔的位置与试纸条上的样品垫位置相对应，观察窗与试纸条上的硝酸纤维素膜位置相对应，所述的硝酸纤维素膜上有已烯雌酚－载体蛋白偶联物溶液印制的检测线和羊抗鼠IgG溶液印制的质控线，两者间距5?mm，其中已烯雌酚－载体蛋白偶联物溶液印制的检测线位于靠近样品垫的一侧，所述的结合垫上灌注有胶体金标记的抗已烯雌酚单克隆抗体。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：姜金庆，王文典，李新朋，王政刚，杨英军，张成成，刘晓旺，
申请(专利权)人：河南知微生物工程有限公司，河南科技学院，
类型：实用新型
国别省市：