本发明专利技术公开了一株耐盐侧耳木霉及其应用，属于解磷微生物肥料技术领域。该菌株为侧耳木霉（Trichoderma?pleuroticola）HF01，保藏编号为CGMCC?No.8127。本发明专利技术还公开了含有上述菌株的微生物菌剂及其制备方法。实验表明，本发明专利技术的侧耳木霉菌株具有生长速度快、产孢量大、耐盐能力强、抗逆性强，在植物根际能够快速大量定殖等特点，在提高磷肥的利用率，改善土壤结构，提高作物的产量及品质方面具有广阔的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一株耐盐侧耳木霉及其应用，属于解磷微生物肥料
。该菌株为侧耳木霉（Trichoderma?pleuroticola）HF01，保藏编号为CGMCC?No.8127。本专利技术还公开了含有上述菌株的微生物菌剂及其制备方法。实验表明，本专利技术的侧耳木霉菌株具有生长速度快、产孢量大、耐盐能力强、抗逆性强，在植物根际能够快速大量定殖等特点，在提高磷肥的利用率，改善土壤结构，提高作物的产量及品质方面具有广阔的应用前景。【专利说明】一株耐盐侧耳木霉及其应用
本专利技术属于解磷微生物肥料
。具体而言，本专利技术涉及一种能够高效解磷的耐盐侧耳木霉菌及其用途，以及采用该侧耳木霉菌制备的微生物菌剂。
技术介绍
磷是植物生长发育所必需的三大营养元素之一，磷既是植物细胞中遗传物质DNA和能量物质ATP等众多有机化合物的基本构成元素，同时植物的光合作用和体内的生化代谢过程都必须有磷参加，磷在植物的整个生命过程中起着不可替代的作用。磷既是农业生产的重要物质保证，又是不可再生的矿质资源。我国有74%的耕地土壤缺磷，作物对施入的磷肥的当季利用率只有5%~10%，土壤中95%以上的磷与Ca2+、Fe2+、Fe3+、Al3+结合形成难溶性磷酸盐而难以被作物吸收利用。磷是限制植物生长的主要因素之一，因此利用解磷微生物分解土壤中被固定的磷和提高磷肥利用率是达到作物高产、品质优良的重要途径之一。极端环境通常包括具有闻温、低温、闻酸、闻喊、闻盐、闻压、和闻福射等条件下的环境。人们将能在这些极端条件下生活的微生物统称为极端微生物。极端微生物是依赖于一种或多种极端物化因子的极端生命形式，极端微生物适应环境的结果使其具有独特的基因类型，从而也赋予其特殊的结构、生理机制及特殊的代谢产物。其存在的机理为更好地认知生命现象、发展生物技术提供了宝贵的知识源泉。适应环境的结果使得极端微生物具有独特的生理机制，可以产生形式多样的代谢产物，并可以突破当前生物
中的一些局限，建立新的生物技术手段，将使我们在环境、能源、农业、健康、轻化工等领域的生物技术能力发生革命极端微生物是研究生物进化、生命起源的良好材料，极端环境下微生物资源的研究不仅具有重要的理论和实际意义，而且具有良好的发展前景。木霉(Trichoderma spp.)属于半知菌类的丝孢纲、丛梗孢目、丛梗孢科,是一类广泛分布于土壤、空气、枯枝落叶及各种发酵物上的真菌，从植物根圈、叶片及种子、球茎表面均可以分离到。其本身对植物纤维中的木质素、纤维素和半纤维素具有天然分解能力，多种病害具有防除作用，具有多功能特性。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种用于高效解磷的新的木霉菌株——侧耳木霉HF01。本专利技术的侧耳木霉菌株具有生长速度快、产孢量大、耐盐能力强、抗逆性强，在植物根际能够快速大量定殖等特点，因此具有良好的应用前景。本专利技术的另一个目的是提供一种采用该新的侧耳木霉菌株HFOl制备的能够高效解磷的微生物菌剂。本专利技术所提供的菌株为侧耳木霉(Trichoderma pleuroticola)HF01,是从滨海湿地盐溃土壤中分离获得的，已于2013年9月3日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCCJia:北京市朝阳区北辰西路I号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏编号为CGMCC N0.8127。其具有以下生物学特性:在PDA琼脂培养基上产生簇。状白色气生菌丝，分生孢子梗形成小疱，汇合为宽的同心轮纹，开始为绿灰色，很快转变为灰绿色，老龄时在PDA上颜色为黑绿色，或者有时在扁平产孢簇边缘具有白色流苏状菌丝，上有亮绿色新生孢子。菌落背面开始基本无色，随着菌龄增长，在PDA上为黑褐色，培养7天后产生大量小型黄色结晶物。分生孢子梗分枝近似金字塔形，越接近基部分枝越长，分枝单生或者向梗的主轴基部对生，接近主轴顶端时一般3~4个分枝排列为轮枝状，初级分枝的再分枝形式类似主轴分枝方式，分生孢子梗及其分枝相对较狭窄并且呈波曲状，主轴基部宽度为5.5μηι,向上逐渐变细,顶端为2.5~3.0 μ m,最顶端的分枝圆柱形,大小为6~14X 2.5~3.3 μ m。瓶梗对生，或者在顶生分枝上3~4个排列为轮枝状，或者分散着生并沿分生孢子梗或者分枝侧面散生，安瓿形或者烧瓶形，顶部突然变细为梗颈，着生分生孢子，其宽度小于lym，大小通常为4.2~9.5X3.0~4.2 μ m，顶生瓶梗细长，长度可达20 μ m。在顶生分枝或者瓶梗侧面，有时于隔膜下方产生短圆柱形间生瓶梗。在老龄培养物中，瓶梗为离散着生。分生孢子亚球形至宽椭圆形，有时为倒卵圆形并且基部尖细，但是不常见，大小为2.6~5.0X 2.4~3.7 μ m(平均为3.7X 2.8 μ m)，显微镜下观察为亮绿色，聚集成团时为黑灰绿色，壁光滑。厚垣孢子通常成串或者成簇，亚球形，直径为4~10 μ m，苍绿色。分生孢子梗的分枝间隔规则，越靠近基部分枝越长，分枝和瓶梗一般排列为部致密的轮枝状。本专利技术侧耳木霉(Trichoderma pleuroticola)菌株HFOl的培养方法或繁殖方法包括:(I)普通培养保存采用PDA培养基，配方为:马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂12g，蒸馏水 IOOOmL ；(2)实验室液体培养采用PDB培养基，配方为:马铃薯200g，葡萄糖20g，蒸馏水IOOOmLo(3)固体培养基配方:固料和无机盐溶液，按质量比1:1.8的比例配制。其中所述固料由质量比为75:10:15的稻糠、玉米粉和麸皮组成；按质量百分比计，所述无机盐溶液包括3.5%磷酸二氢钾，0.04%硫酸镁，4%硫酸铵，剩余为水。(4)大量发酵培养配方:同(3)中固体培养基配方。本专利技术还提供一种能够高效解磷的微生物菌剂，所述微生物菌剂含有侧耳木霉菌株 Hi7Ol。本专利技术还提供了上述侧耳木霉菌株HFOl或者微生物菌剂在提高磷肥的利用率，改善土壤结构，提高作物的产量及品质方面的应用。本专利技术所述的微生物菌剂的制备方法包括以下步骤:( I)制备所述侧耳木霉菌株HFOl的种子液；(2)将步骤(I)制备的种子液接种到固体培养基中，28_30°C下恒温培养；(3)将步骤(2)培养的培养物加入无菌水混合，过滤，将滤液接种至大量发酵培养基，在室温28-30°C、相对湿度85%以上的发酵室中进行发酵培养。具体包括以下步骤:(I)将所述侧耳木霉菌株HFOl的孢子移植到PDB液体培养基中，28°C摇床振荡培养3~5d得到种子液；(2)将步骤(I)制备的种子液按质量比10%的比例接种到固体培养基中，28°C下振荡培养3~5d ;(3)将步骤(2)培养的培养物用无菌水按质量比1:15的比例混合，过滤，将滤液按体积比1:6的比例(滤液:大量发酵培养基=1:6)接种至大量发酵培养基，室温28°C、相对湿度85%以上的发酵室中发酵培养8~9d。其中，步骤(I)中的所述PDB液体培养基为:马铃薯200g，葡萄糖20g，蒸馏水10OOmT,；步骤(2)中的固体培养基由固料和无机盐溶液组成，所述固料和无机盐溶液的质量比为1:1.8 ;所述固料由质量比为75:10:15的稻糠、玉米粉和麸皮组成；按质量百分比计，所述无机盐溶液包含3.5%磷酸二氢钾，0.04本文档来自技高网...
【技术保护点】
侧耳木霉（Trichoderma?pleuroticola）菌株HF01，所述菌株的保藏编号为CGMCC?No.8127。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：牛赡光，刘幸红，王清海，段春华，郑香军，周峰，田龙军，
申请(专利权)人：山东省林业科学研究院，
类型：发明
国别省市：
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