肽支架设计制造技术

本发明专利技术涉及用于病毒感染的治疗、诊断和预后的新的肽和方法，所述病毒感染包括HCV、HIV、CMV感染和流感。本发明专利技术还涉及鉴定并提供用于治疗和诊断的肽的方法。X1-X2-X3-X4-X5????(I)

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】肽支架设计专利
本专利技术涉及用于病毒感染的治疗、诊断和预后的新的肽和方法，所述病毒感染包括HCV、HIV、CMV感染和流感。本专利技术还涉及鉴定并提供用于治疗和诊断的肽的方法。专利技术背景常规的疫苗开发途径已经使用了已经减毒的完整的有复制能力的病毒(例如萨宾脊髓灰质炎疫苗(Sabinpoliovaccine)，麻疹，流行性腮腺炎，风疹(MMR))或没有复制能力的灭活的病毒体。偶尔地，灭活的病毒疫苗可以包括裂解疫苗，其中病毒粒子已被破坏。分子技术也已经用来开发亚单位疫苗(例如乙型肝炎疫苗)，其仅由乙型肝炎病毒的表面糖蛋白组成。灭活病毒疫苗趋向于诱发针对讨论的病毒的原发性抗体应答，而活的减毒疫苗由于所述疫苗诱发瞬时感染而诱发细胞介导的免疫和抗体应答。利用成功的接种计划已经消除的唯一的疾病是天花。目前的计划是继续消除脊髓灰质炎。可以通过接种消除的病毒感染的特征为由具有稳定的病毒抗原的病毒(例如，非常低的突变频率、较少的亚型)引起的感染，所述病毒在其他动物物种中缺少储备池(reservoir)，由感染结束后不在体内持续的病毒引起的感染(其中接种引起长久持续的免疫)。诸如脊髓灰质炎和麻疹的病毒满足这些标准，而诸如流感病毒(Flu)、HCV和HIV的其蛋白序列变化的病毒不满足这些标准。出于这种原因，需要开发用于这些疾病的疫苗的新的替代的途径。接种的目的是在感染之前刺激针对特定病原体的免疫应答。当个体暴露于所述病原体时，引发记忆应答，其防止感染的建立。因此，疫苗刺激适应性免疫应答，其与先天免疫不同，是活得长久并且具有记忆。对于适应性免疫系统具有两种主要的方式。体液免疫，其包括发展能够结合病毒粒子的抗体和能够中和感染的某些抗体。细胞介导的免疫，其导致发展细胞毒性T细胞，在I类人白细胞抗原(HLA)的情形中，其杀死暴露病毒表位的感染细胞，以这种方式清除感染的细胞。提供适于刺激适应性免疫系统的疫苗的挑战在于肽表位需要被抗原呈递细胞摄取。已经证明一些肽通过似乎是能量不依赖性途径穿过真核细胞的质膜易位。这些肽被定义为细胞穿透肽(CPPs)。与常规技术相比，使用这些细胞穿透肽进行细胞递送提供一些优势。其是非侵入性的、能量不依赖性的，有效用于宽泛范围的细胞类型，并且可以一齐(enmasse)用于细胞。肝炎意指肝脏炎症，可由多种因素引起，包括由毒素、某些药物、一些疾病、酗酒和细菌感染与病毒感染引起。肝炎还是影响肝脏的病毒感染家族的名称；发达国家中最常见的类型是甲型肝炎、乙型肝炎和丙型肝炎。丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(HCV)感染导致的肝病。其严重性范围可以从持续几周的轻微疾病到严重的、终生的疾病。丙型肝炎通过血液传播；最常见的传播形式是通过共用针具或其他用于注射药物的器具。感染可以是“急性的”或“慢性的”。急性HCV感染是在某人暴露于丙型肝炎病毒后前6个月内发生的无临床症状的、短期的疾病。对于大部分人，急性感染引起慢性感染，其可导致长期的并发症，甚至死亡。HCV是包膜正链核糖核酸(RNA)病毒，直径约50nm，属于黄病毒科(Flaviviridae)肝炎病毒属(Hepacivirus)，其在感染的细胞的胞质中复制。唯一已知的HCV储蓄池是人，尽管该病毒在实验中已经传播给黑猩猩。HCV的天然靶标是肝细胞，并且可能是B淋巴细胞。到2008年，已知该病毒六种不同的基因型和超过100种的亚型。复制通过缺乏校正功能的RNA-依赖型RNA聚合酶发生，这导致非常高的突变率。在HCV基因组编码包膜蛋白的高变区中的快速突变允许该病毒逃避宿主的免疫监督。结果，大部分感染HCV的人发展成了慢性感染。估计全世界有一亿七千万人感染了HCV，等于全球人口的大约3％。每年还大约有3-4百万人感染；估计这些新感染的患者中有80％发展成慢性感染。HCV的6种基因型具有不同的地理分布。该疾病在早期阶段一般是无临床症状的；大部分患有慢性感染的患者最终发展成并发症，诸如肝纤维化和肝硬化，并且在1-5％的病例中，发展成肝细胞癌。HCV是世界上非甲型、非乙型肝炎的主要病因。急性HCV感染通常引起慢性肝炎和末期肝硬化。估计多至20％的HCV慢性携带者可在大约20年的时间期间内发展成肝硬化，并且患有肝硬化的那些中有1-4％有发展肝癌的危险。约9.6kb的HCV病毒单链RNA基因组包含5′-和3′-非编码区(NCRs)，并且，在这些NCRs之间，是编码约3000个氨基酸的HCV聚蛋白的约9kb的单一长开放阅读框。HCV多肽由所述开放阅读框的翻译和共翻译蛋白酶解加工产生。结构蛋白来源于氨基端四分之一的编码区，并且包括衣壳或核心蛋白(约21kDa)，E1包膜糖蛋白(约35kDa)和E2包膜糖蛋白(约70kDa，之前称为NS1)和p7(约7kDa)。E2蛋白可能以在C端融合或不融合p7蛋白而存在(Shimotohno等，1995)。已经发现了在核心区中的可变开放阅读框(alternativereadingframe)，其编码并且表达称为F(Frameshift)蛋白的约17kDa的蛋白(Xu等，2001；Ou&Xu，美国专利申请公开号US2002/0076415)。在该区域，发现了关于其他14-17kDa的ARFPs(可变阅读框蛋白(AlternativeReadingFrameProteins))(即，A1至A4)的ORFs，并且在慢性感染的患者的血清中检测到针对至少A1、A2和A3的抗体(Walewski等，2001)。从HCV编码区的其余部分，产生非结构性HCV蛋白，其包括NS2(约23kDa)、NS3(约70kDa)、NS4A(约8kDa)、NS4B(约27kDa)、NS5A(约58kDa)和NS5B(约68kDa)(Grakoui等，1993)。流感持续为世界上死亡率和发病率的主要原因。世界卫生组织(WHO)估计季节性流行病每年影响3-5百万患有严重疾病的人，并且导致250,000-500,000例死亡。流感是由正粘病毒科(Orthomyxoviridae)的病毒引起的，其为负链RNA病毒。流感病毒以三种类型存在：甲、乙和丙型，其中只有甲型与流行性疾病相关。发现甲型病毒存在于人和动物中，特别是鸟类中，而且还存在其他哺乳动物如猪中。甲型病毒依据病毒表面蛋白的不同种类和组合进一步分型为多个亚型。在多个亚型中，在2009年，甲型流感(H1N1)亚型和甲型流感(H3N2)亚型在人中传播。甲和乙型流感包括在季节性疫苗中，而丙型流感很少发生，因此不包括在季节性疫苗中。乙型病毒是人特异性的，丙型病毒引起非常轻微的疾病。正粘病毒科的基因组是分区段的。甲和乙型流感病毒具有8个区段，而丙型具有七个区段。流行病可能是由于当两个不同的甲型病毒感染同一细胞时基因区段的重分类而引起。在人群中没有针对这种新型的重分类病毒的免疫。在二十世纪发生了三次流行病：1918年的“西班牙流感”，1957年的“亚洲流感”和1968年的“香港流感”。1918年的流行病在世界范围内致使估计四千万-五千万人死亡。后续的流行病要轻得多，1957年估计有两百万例死亡，1968年有一百万例死亡。2009年6月，WHO宣布由流感病毒H1N1(猪流感)引起的流行病，在2010年8月宣布其结束。人乳头状瘤病毒由乳头状瘤病毒本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.12.02 EP 10193479.2;2010.12.02 US 61/475,9651.一种分离的细胞穿透肽，其由下述结构组成：X1-X2-X3-X4-X5(式I)，其中X1和X3独立地定义任意1，2或3个精氨酸的线性序列；X2和X4独立地定义来自HCV，CMV，HPV或流感病毒的相同抗原或其相对于所述抗原包含1-10个置换，添加或缺失并与天然序列具有至少50％序列同一性的变体序列的8-15个氨基酸的线性序列，所述序列X4不同于X2；并且其中X5是任选的精氨酸。2.根据权利要求1所述的分离的肽，其中所述肽包含一个或多个半胱氨酸。3.根据权利要求1所述的分离的肽，其中X2中的N-和/或C-端氨基酸是亲水性或极性氨基酸。4.根据权利要求1所述的分离的肽，其中X4中的N-端氨基酸是亲水性或极性氨基酸。5.根据权利要求1所述的分离的肽，其中X1由RR组成，X3由RR组成，和X1和X3每个由RR组成。6.根据权利要求1所述的分离的肽，其中X2和/或X4是少于12个氨基酸的线性序列。7.包含两个肽单体的二聚体肽，其中每个肽单体如权利要求1-6中任一项所定义。8.包含两个以上根据权利要求1-6中任一项所述的肽的肽组合。9.编码根据权利要求1-6中任一项所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：艾纳·滕内斯·朗厄，马亚·索默费尔特·格伦沃尔，延斯·奥勒夫·霍姆伯格，比格尔·索伦森，
申请(专利权)人：比奥诺尔免疫有限公司，
类型：
国别省市：