检测生物活性的方法和组合物技术

本发明专利技术提供包含水、可以由第一生物活性转化成第一生物衍生物的第一指示试剂和多个粒子的组合物。所述第一指示试剂可以包含具有荧光团的生荧光酶底物，所述荧光团选自伞形酮、7-氨基香豆素、β-萘胺、β-萘酚、荧光素、试卤灵、9H-(1，3-二氯-9，9-二甲基吖啶-2-酮)、罗丹明110、任何前述荧光团的衍生物和任何前述荧光团的组合。所述粒子能够接受并保持来自含水液体的第一生物衍生物。第一生物衍生物可以指示微生物。所述组合物还可以包含胶凝剂。本发明专利技术还提供使用所述组合物来检测微生物在样品中的存在或不存在的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】检测生物活性的方法和组合物相关申请的交叉引用本专利申请要求2010年11月24日提交的美国临时专利申请N0.61/416，858的权益，该申请以引用的方式全文并入本文中。
技术介绍
用于检测样品中靶微生物的方法经常包括使用受靶微生物作用而形成可检测产物的指示试剂。例如，可以通过与细胞(如致病微生物，生物学指示生物或癌细胞)相关的催化活性来检测生物活性。检测到样品中的特定生物活性可以指示样品中的特定微生物。例如，细菌孢子包含可以在检测样品内活孢子的存在的方法(例如，包括快速方法)中使用的生物活性(例如，酶活性如α-吡喃葡萄糖苷酶或β-吡喃葡萄糖苷酶)对这些生物活性或其他生物活性之一的破坏可以用来验证和/或证实消毒过程的的成效
技术实现思路
本专利技术主要涉及检测生物活性在样品中的存在或不存在的组合物、制品和方法。在一些实施例中，生物活性的存在或不存在可以指示微生物的存在或不存在。本专利技术方法包括在样品、可以由第一生物活性转化成第一生物衍生物的第一指示试剂和多个能够接收并保持来自含水液体的第一生物衍生物的粒子之间提供流体连通。有利地，第一生物衍生物可以从含水液体分配到粒子上和/或分配到粒子中，从而将第一生物衍生物浓缩至相对小的区域或体积中。将第一生物衍生物分配到粒子上和/或分配到粒子中，可以使得第一生物衍生物与它原本在含水液体中的检测相比更容易地检测。另外，粒子可以极大地限制第一生物衍生物在水凝胶中的扩散，从而使得可以检测水凝胶中存在的多种单独的生物活性、微生物或微菌落。在一个方面，本专利技术提供一种检测生物活性的方法。该方法可以包括提供可能包含第一生物活性的样品、可由第一生物活性转化成第一生物衍生物的第一指示试剂和多个粒子，每个粒子包含接受并保持所述第一生物衍生物的有机聚合物。第一指示试剂可以包含具有突光团的生突光(fluorogenic)酶底物,所述突光团选自伞形酮、7-氨基香豆素、β _萘胺、β _萘酌 、突光素、试齒灵、9Η_(1, 3-二氯-9,9-二甲基B丫卩定-2-酮)、罗丹明110、任何前述荧光团的衍生物和任何前述荧光团的组合。该方法还可以包括形成含水分散体，所述含水分散体包含所述第一指示试剂和所述多个粒子；使所述样品与所述含水分散体处于流体连通；并且检测所述第一生物衍生物的存在或不存在，其中所述第一生物衍生物被粒子保持。在该方法的以上实施例的任一项中，检测生物衍生物的存在或不存在可以包括检测发荧光(fluorescent)第一生物衍生物或有色生物衍生物。在以上实施例的任一项中，该方法还可以包括提供胶凝剂，其中形成含水分散体包括形成水凝胶，其中所述多个粒子中的至少一部分分散在所述水凝胶中。在该方法的以上实施例的任一项中，提供胶凝剂可以包括提供冷水可溶性胶凝剂。在一些实施例中，冷水可溶性胶凝剂可以选自羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、聚丙烯酰胺、刺槐豆胶、瓜耳胶、黄原胶和褐藻胶、二醇改性的多糖和淀粉接枝的聚(丙烯酸钠-共-丙烯酰胺)。在一些实施例中，该方法还可以包括提供可以由第二生物活性转化成第二生物衍生物的第二指示试剂，使第二指示试剂与水凝胶处于流体连通并检测第二生物衍生物的存在或不存在。当第二指示试剂包含生荧光酶底物时，第二指示试剂可以具有荧光团，所述荧光团选自伞形酮、7-氨基香豆素、β-萘胺、萘酚、荧光素、试卤灵、9Η-(1，3-二氯-9，9- 二甲基吖啶-2-酮)、罗丹明110、任何前述荧光团的衍生物和任何前述荧光团的组合。在以上实施例的任一项中，该方法还可以包括提供可以由第二生物活性转化成第二生物衍生物的第二指示试剂并检测第二生物衍生物的存在或不存在。当第二指示试剂包含生荧光酶底物时，第二指示试剂可以具有荧光团，所述荧光团选自伞形酮、7-氨基香豆素、萘胺、β _萘酌■、突光素、试齒灵、9Η-(1,3_ 二氯-9,9-二甲基B丫唳-2-酮)、罗丹明110、任何前述荧光团的衍生物和任何前述荧光团的组合。形成含水分散体可以包括形成包含第二指示试剂的含水分散体。在该方法的以上实施例的任一项中，使样品与含水分散体处于流体接触可以包括形成包含所述样品、第一指示试剂和所述多个粒子的含水分散体。在该方法的以上实施例的任一项中，使样品与含水分散体处于流体连通后，该方法还可以包括分离来自含水分散体或在其内部的所述多个粒子的一部分。在一些实施例中，分离所述部分包括通过沉降、离心、絮凝或过滤分离所述部分。在另一个方面，本专利技术提供一种检测生物活性的方法。该方法可以包括提供可能包含第一生物活性的样品；可以由第一生物活性转化成第一生物衍生物的第一指示试剂；多个粒子，每个粒子包含接受并保持所述第一生物衍生物的有机聚合物；和胶凝剂。第一指示试剂可以包含具有荧光团的生荧光酶底物，所述荧光团选自伞形酮、7-氨基香豆素、β -萘胺、β -萘酌■、突光素、 试齒灵、9Η-(I, 3- 二氯-9,9- 二甲基B丫唳-2-酮)、罗丹明110、任何前述荧光团的衍生物和任何前述荧光团的组合。该方法还可以包括形成水凝胶，所述水凝胶包含第一指示试剂和胶凝剂；使粒子分布在水凝胶的主表面的至少一部分上；使样品与水凝胶的一部分处于流体连通；并且检测第一生物衍生物的存在或不存在，其中所述第一生物衍生物由粒子保持。在一些实施例中，检测第一生物衍生物的存在或不存在可以包括检测发荧光第一生物衍生物或有色第一生物衍生物。在一些实施例中，提供胶凝剂可以包括提供冷水可溶性胶凝剂。在一些实施例中，冷水可溶性胶凝剂可以选自羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、聚丙烯酰胺、刺槐豆胶、瓜耳胶、黄原胶和褐藻胶、二醇改性的多糖和淀粉接枝的聚(丙烯酸钠-共-丙烯酰胺)。在一些实施例中，该方法还可以包括提供可以由第二生物活性转化成第二生物衍生物的第二指示试剂、使第二指示剂与水凝胶处于流体连通；并且检测第二生物衍生物的存在或不存在。当第二指示试剂包含生荧光酶底物时，第二指示试剂可以具有荧光团，所述荧光团选自伞形酮、7-氨基香豆素、β-萘胺、β-萘酚、荧光素、试卤灵、9Η-(1，3- 二氯-9，9- 二甲基吖啶-2-酮)、罗丹明110、任何前述荧光团的衍生物和任何前述荧光团的组合。在一些实施例中，使粒子在水凝胶的主表面的至少一部分上分布还可以包括使第二指示试剂与水凝胶处于流体连通。在一些实施例中，使样品与水凝胶的主表面的至少一部分处于流体连通还可以包括使第二指示试剂与水凝胶处于流体连通。在一些实施例中，形成水凝胶还可以包括形成包含第二指示试剂的水凝胶。在一些实施例中，检测第一生物衍生物的存在或不存在可以包括检测分立的发荧光区域。在一些实施例中，检测分立的发荧光区域还包括计数分立的发荧光区域的数量。在一些实施例中，检测第一生物衍生物的存在或不存在可以包括检测分立的有色区域。在一些实施例中，检测分立的发荧光区域还包括计数分立的有色区域的数量。在又一个方面，本专利技术提供一种组合物。该组合物可以包含水；可以由第一生物活性转化成第一生物衍生物的第一指示试剂；和多个粒子，其中所述粒子能够接收并保持来自含水液体的第一生物衍生物。第一指示试剂可以包含具有荧光团的生荧光酶底物，所述荧光团选自伞形酮、7-氨基香豆素、β -萘胺、β -萘酚、荧光素、试卤灵、9Η-(1，3- 二氯-9，9- 二甲基吖啶-2-酮)、罗丹本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·B·罗斯科，K·J·霍尔沃森，J·D·米勒，S·J·莫勒，J·W·比约克，
申请(专利权)人：三M创新有限公司，
类型：
国别省市：