一种新型二萜醇、其制备方法及应用技术

本发明专利技术涉及一种贝壳杉烷型二萜醇化合物、其制备方法及应用，本发明专利技术采用天然产物化学手段从银粉背蕨中提取分离了一种新结构的贝壳杉烷型二萜醇，丰富了二萜化合物的结构，制备方法简单可控，化合物纯度高，对所得化合物进行生物活性检测，该化合物显示良好的抗肿瘤活性，为抗肿瘤药物的研发提供了新的思路，具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于天然产物化学领域，具体涉及。
技术介绍
银粉背蕨WeyriiojDteri1? (Gmel. ) Fee，为中国蕨科粉背蕨属植物，又 称通经草，具有活血调经，止咳等功效，用于治疗月经不调，经闭腹痛，赤白带下，肺痨咳嗽。 天然产物具有结构多样的特点，然而尚未报道从通经草内提取分离到生物活性良好的单体 化合物。
技术实现思路
本专利技术提供了一种全新结构的二萜醇化合物，命名为粉背蕨素 B，同时提供其从银 粉背蕨中提取的方法和在抗肿瘤领域的应用。 本专利技术的二萜醇化合物结构为式一所示，化学式C2qH32O 3。 式一本专利技术同时提供所述化合物的药用盐。 本专利技术的化合物的制备方法为，从银粉背蕨中提取，具体方法为： 步骤（1)浸提：称取通经草的干燥全草，用质量分数为80%的乙醇回流提取，提取液用 16层纱布滤过，合并滤液，减压浓缩至药材量的2-5倍体积，以4000rpm离心5-10分钟，上 层液依次用等倍体积的环己烷、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分配提取，回收溶剂，分别得到环己 烷、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇提取物； 步骤（2)初级分离：以氯仿-甲醇（V/V=l:l)的混合溶剂溶解步骤（1)所得氯 仿提取物，加入相对于氯仿提取物1-2倍质量份的硅胶拌匀，挥去溶剂，得到上样样 品，所述上样样品上硅胶色谱柱，所述硅胶色谱柱选用200-300目硅胶，所述硅胶色 谱柱内硅胶的质量为上样量的50-100倍，用石油醚-乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱 (5:1 - 4:1 - 3:1 - 2:1 - 1:1 - 0:1，V/V)，通过薄层色谱跟踪检识，收集各梯度组分；所 述上样量为氯仿提取物和上样硅胶的总量。 步骤（3)次级分离：取步骤（2)石油醚-乙酸乙酯（I: 1)混合溶剂洗脱部分，减压 回收溶剂浓缩样品，所得样品拌入1-2质量份硅胶，拌样，挥干溶剂，上次级硅胶柱，所述次 级硅胶柱内硅胶质量为拌样后样品质量的50-100倍，用环己烷-氯仿一环己烷-氯仿-甲 醇（10:1 - 10:2 - 10:3:0. 5 - 10:4:1，V/V)的混合溶剂洗脱，收集环己烷-氯仿-甲醇 (10:3:0. 5 )洗脱部分，减压回收溶剂，得到浸膏； 步骤（4)反相分离：步骤（3)所得浸膏加质量浓度为50%的乙醇，形成混悬液，所述混 悬液加至反相硅胶柱，所述反相硅胶柱内反相硅胶质量为所述浸膏质量的100-150倍，用 30%-60%的乙醇梯度洗脱（30%-40%-50%-60%)，收集40%乙醇洗脱部分，减压浓缩，得到粗 晶； 步骤（5)重结晶：步骤（4)所得粗晶用甲醇溶解，进行重结晶，干燥，得到白色结晶状的 单体化合物，即为式一结构的化合物。 优选的，步骤（1)中回流提取为两次，分别为15倍于通经草样品体积回流2h和10 倍体积回流Ih。 优选的，其特征在于，步骤（1)以超声提取代替乙醇回流提取，超声提取时间为40 min〇 经现代波谱技术鉴定，由上述方法所得化合物的结构为式一所示，经结构查新鉴 定该化合物为新结构化合物，命名为粉背蕨素 B。 本专利技术还提供了该化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。 本专利技术的有益效果在于： (1) 贝壳杉烷型二萜类化合物具有良好的生物活性，本专利技术提供了一种新结构的二萜 类化合物，丰富了二萜化合物的结构类型； (2) 本专利技术从银粉背蕨中利用天然产物化学手段对其化学成分进行分离提纯，操作简 单可控，以此方法获得的贝壳杉烷型二萜类化合物纯度高，利用本制备方法得到的新型二 萜类化合物为从未在通经草化学成分中报道过的化合物类型，对银粉背蕨今后的化学成分 研究提供了新的研究方向和思路； (3) 本专利技术对所述新结构的贝壳杉烷型二萜类化合物进行抗肿瘤细胞活性检测，其对 HL-60和H0-8910细胞表现出良好的抑制活性，该化合物具有良好的抗肿瘤活性，为抗肿瘤 药物的研发提供了一种新的先导化合物，对抗肿瘤的研究具有一定的推动作用，具有广阔 的应用前景。【附图说明】 图1为本专利技术化合物的1H-NMR谱； 图2为本专利技术化合物的13C-NMR谱； 图3为本专利技术化合物的1H-1H COSY谱； 图4为本专利技术化合物的HMBC谱； 图5为本专利技术化合物的HMQC谱； 图6为本专利技术化合物的NOESY谱。【具体实施方式】 实施例1化合物的制备 称取通经草干燥全草I. 5kg，用80%乙醇回流提取2h，80%乙醇与通经草的体积比 15:1，收集提取液，剩余样品加入10倍体积的80%乙醇回流提取lh，收集提取液；合并两次 提取液，滤过，合并滤液，减压浓缩至2-5倍体积（v/w)，4000rpm离心5分钟，上层液依次用 等倍体积的环己烷、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分配提取，回收溶剂，同时得到环己烷、氯仿、乙 酸乙酯、正丁醇部分的提取物。 所得氯仿提取物20. 6g，加入氯仿-甲醇（1:1，V/V)的混合溶剂使提取物溶解，加 入30g硅胶拌匀，上硅胶色谱柱，所述硅胶色谱柱规格为内径100mm，使用200目硅胶5Kg， 用石油醚-乙酸乙酯（5:1 - 4:1 - 3:1 - 2:1 - 1:1 - 0:1)混合溶剂洗脱，通过薄层色 谱跟踪检识，分份收集。 取上述石油醚-乙酸乙酯（1:1)混合溶剂洗脱部分的样品（4倍柱体积)，减压回收 溶剂，浓缩至近干得浸膏5. 2g，拌入硅胶10g，挥干溶剂。另取硅胶3kg，装入硅胶柱，所述硅 胶柱的规格为80mmX 1000mm，样品上柱。用环己烷-氯仿一环己烷-氯仿-甲醇（2:1 - 1: 1 -1:1:0. 1 - 1:2:0. 2-1:2:0. 5)的混合溶剂洗脱，收集环己烷-氯仿-甲醇（1:2:0. 2)洗 脱部分（2-4倍柱体积)，减压回收溶剂，得到浸膏0. 87g。 上述浸膏加50%乙醇使成混悬液，加至100倍质量份的反相硅胶柱上，用30%-60% 的乙醇梯度洗脱，收集40%乙醇洗脱部分，减压回收溶剂，得到粗的结晶183mg。 粗晶用甲醇进行重结晶，干燥，得到白色结晶状的单体化合物144mg。 白色针状或片状结晶溶于氯仿、甲醇，硫酸乙醇显色为紫红色。UV在198nm处有最 大吸收，ESI-MS给出准分子离子峰m/z 287 +，结合1H-NMR和13C-NMR数据，推断该 化合物分子式为QwH32O3。 13C-NMR (DMSO)谱中，在d 7. 6-154. 4的范围内共出现20个碳信号峰，其中d 23. 8、30· 5、34· 1、41· 6、45· 3、65· 1、106· 4 为二级碳，d 39. 2、43· 7、50· 9、73· 9、80· 9、132· 4 为三级碳，d 41. 1、44. 8、135. 7、154. 4当前第1页1 2 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种新型二萜醇化合物，其特征在于，其结构为式一所示：（式一）。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李建晨，廖明丽，哈静，
申请(专利权)人：河北科技大学，
类型：发明
国别省市：河北;13