【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及干扰素领域,更具体地,涉及斜带石斑鱼干扰素IFN Y 2及其制备方法和应用。
技术介绍
干扰素(IFN)是一组具有多种功能的活性蛋白质(主要是糖蛋白),在细胞和机体受病毒感染或其他诱导剂作用后由单核细胞和淋巴细胞产生的细胞因子。根据同源性及受体特异性的不同,迄今为止,发现3类干扰素:I型、II型和III型。其中II型IFN (IFNy )也被称为免疫干扰素,是主要的巨噬细胞刺激因子和调控免疫反应的关键信号分子,能激活效应细胞,提高自然杀伤细胞(NK)和巨噬细胞活性,促进免疫球蛋白的转换,具有抗肿瘤、抗病毒、调节和增强机体免疫功能等作用。干扰素IFN Y 2和IFN Y 2基因是鱼类IFN Y基因的两个亚型,其氨基酸序列的特征是含有[IV]-Q-X-[KQ]-A-X2-E- [LF]_X2_[IV]这个保守结构,这与已研究过的其他种类中的IFNy结构类似。IFN Y具有广泛的生物学活性。IFN Y主要通过与其受体结合,活化JAK-STAT信号通路,激活下游基因的转录,包括相关转录因子和免疫分子,如STATU IRF1、TLR3和MHC II等,调节T ...
【技术保护点】
斜带石斑鱼干扰素IFNγ2的基因序列,其特征在于,所述的基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:2所示。
【技术特征摘要】
1.斜带石斑鱼干扰素IFNY2的基因序列,其特征在于,所述的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2 所示。2.斜带石斑鱼干扰素IFNy2重组蛋白,其特征在于,所述的蛋白的氨基酸序列如SEQID NO:1 所示。3.斜带石斑鱼干扰素IFNY 2重组表达载体,其特征在于,所述的重组表达载体的核苷酸序列中,含有如SEQ ID N0:2所示的核苷酸序列。4.一种根据权利要求1所述的斜带石斑鱼干扰素IFNY2的基因序列的获取方法,其特征在,以斜带石斑鱼头肾总mRNA为模板,以RNA Oligo dT为引物,反转录得到cDNA ;再以此cDNA为模板,设计上游引物及下游引物进行PCR扩增,即得, 所述的RNA Oligo dT的序列如SEQ ID NO:3所示, 所述的上游引物的序列如SEQ ID N0:4所示, 所述的下游引物的序列如SEQ ID NO:5所示。5.一种根据权利要求2所述的斜带石斑鱼干扰素IFN Y 2重组蛋白的生产方法,其特征在于,包括以下步骤: 51.构建含干扰素IFNY 2的基因序列的重组表达载体; 52.将步骤SI得到的重组表达载体,转化入工程菌中; 53.培养工程菌,使得工程菌中的重组表达载体表达干扰素IFNY 2重组蛋白; 54.干扰素IFNY 2重组蛋白的纯化和变复性处理。6.根据权利要求5所述的的斜带石斑鱼干扰素IFNY2重组蛋白的生产方法,其特征在于,步骤SI所述的构建含干扰素IFNy 2的基因序列的重组表达载体,包括以下步骤: 511.以含斜带石斑鱼干扰素IFNY 2编码基因的质粒为模板,设计分别带有酶切位点的上下游引物,PCR扩增,所述的带有酶切位点的上游引物的序列如SEQ ID N0:...
【专利技术属性】
技术研发人员:卢丹琪,孙艳,易诗白,彭弯,张勇,林浩然,
申请(专利权)人:中山大学,
类型:发明
国别省市:
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