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鸡-γ-干扰素基因序列,其重组工程菌及应用制造技术

技术编号:8449213 阅读:284 留言:0更新日期:2013-03-21 03:20
本发明专利技术涉及“鸡-γ-干扰素基因序列,其重组工程菌及应用”,属于生物技术领域。本发明专利技术对采用人工合成的序列如SEQ?ID?NO1或SEQ?ID?NO2,以酿酒酵母作为宿主菌株,得到了重组工程菌,经PCR、酶切、测序、SDS-PAGE、ELISA和CPE检测结果表明:ChIFN-α和ChIFN-γ基因均能在宿主菌株中胞内表达,并表达蛋白具有明显的生物学活性。实验表明,本发明专利技术将酿酒酵母作为生物反应器生产鸡干扰素药用蛋白,不仅可以极大降低干扰素生产成本,而且可以在提供优质蛋白的同时达到改善机体免疫功能的目的,为利用酵母添加剂防治动物疫病奠定基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物程领域,特别是涉及人工合成的鸡干扰素基因序列,一种以酿酒酵母作为受体菌而得到的重组工程菌,其能进行胞内表达生产动物干扰素。
技术介绍
酿酒酵母(S a cch a romyces cerevisiae)是一种良好的营养与保健饲料添加剂, 其营养丰富,富含B族维生素、矿物质、消化酶、促生长因子和较齐全的氨基酸。使用酵母添加剂可以提高饲料蛋白含量,刺激有益菌生长,提高机体免疫力,促进营养物质消化吸收和动物生长发育。同时,酿酒酵母也是最早用于基因工程的酵母菌株,是真核生物生物学研究的模式生物,其表达蛋白能有效保持生物学活性,利用酿酒酵母表达系统,人类已经获得一些重要药用蛋白。鸡α干扰素(ChIFN-α)和鸡、干扰素(ChIFN-Y )具有高效广谱的抗病毒、免疫调节、抗肿瘤细胞增殖、提高抗逆性和促进生长等多种重要生理功用,是养禽业用来防治鸡新城疫、传染性支气管炎、传染性喉气管炎、传染性法氏囊、减蛋综合征等多种鸡病毒性传染病的重要药物。尽管干扰素的临床价值极高,但是目前因生产的高昂成本却制约着其在畜牧业中的广泛应用。
技术实现思路
针对上述领域中的缺陷,本专利技术提供一种人工合本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人工合成的鸡干扰素基因YEChIFNG,其核苷酸序列如SEQ?ID?NO2所示。

【技术特征摘要】
1.ー种人工合成的鸡干扰素基因YEChlFNG,其核苷酸序列如SEQ ID N02所示。2.—种重组表达载体,具有权利要求I所述的人工合成的鸡干扰素基因YEChlFNG,其骨架载体为PYES2/CT。3.—种重组工程菌,具有权利要求I所述的人工合成的鸡干扰素基因YEChlFNG,所述受体菌为酿酒酵母菌株INVScl。4.权利要求3所述的重组工程菌生产药用蛋白鸡干扰素的方法,包括如下步骤 (1)、酵母菌的培养保种的重组工程菌接种于SC选择培养基上,于30°C,200r/min过夜震荡培养; (2)、酵母菌的诱导表达培养当过夜培养的新鲜菌液OD6tltl=O.3-0. 5时,离心收集菌体并用含半乳糖的液体诱导培养基重悬,并于30°C、200r/min振荡培养。5.根据权利要求4所述的方法,所述步骤(2)的培养条件为诱导1...

【专利技术属性】
技术研发人员:赵德刚李义宋莉卢凌霄
申请(专利权)人:贵州大学
类型:发明
国别省市:

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