【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种生产犏牛体外胚胎的方法，尤其涉及。
技术介绍
犏牛是普通牛Bos taurus ( )为父本与牦牛Bos grunniens (早)为母本通过种间杂交产生的后代，其具有明显杂交优势，乳、肉生产能力、役用能力均优于牦牛，另外利用年限长，市场售价高，是牦牛生产的重要补充，很受人们的喜欢。除此，犏牛对人们的生产和生活具有极其重要的作用:第一，役用，去势的公犏牛不仅具有牦牛同样对高原气候环境的适应力，还具有较温顺易驾驭的优点，所以在牧区犏牛常被用来当做驮牛使用，在半农半牧区或农区被用来当耕牛用来犁地；第二，奶用，与牦牛相比，母犏牛产奶量将成倍增加，且产奶周期长，能较好的满足牧户食奶或青藏高原地区大中城市对牛奶不断增加的需求，一方面牧户利用犏牛食奶，减少牦牛生产中，牧民与牦牛犊争食牦牛奶的问题，另一方面也能较大程度的满足城市人口增长对奶的需求；第三，肉用，公犏牛具有生长速度快、产肉量高等特点，另外犏牛既可以在牧区放牧，也可以利用半农半牧区或农区农作物秸杆等饲草资源丰富的优势，为人们提供大量的牛肉。利用体外受精生产优良犏牛胚胎，国内外已有文献报道。但尚未见...
【技术保护点】
一种生产犏牛可控性别体外胚胎的方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）将牦牛卵巢去除周围结缔组织后，用无菌生理盐水冲洗3～4次，从清洗干净的牦牛卵巢表面抽取卵母细胞，将卵母细胞置于收集液中，在体视显微镜下选取卵母细胞，将选取后的卵母细胞用收集液洗涤2～3次，再用成熟培养液洗涤1次；（2）将洗涤后的卵母细胞转入添加有血清、激素、卵泡液和Hepes缓冲液的培养皿中，再将培养皿放入培养箱中进行成熟培养；（3）取由流式细胞仪分离的新鲜的普通牛的含X或Y染色体的精子或37℃解冻的普通牛的含X或Y染色体的精子，通过Percoll梯度分离液将精液中的死精子与活精子分开；（4）将步骤（2）中...
【技术特征摘要】
1.一种生产犏牛可控性别体外胚胎的方法，其特征在于:包括以下步骤: (1)将牦牛卵巢去除周围结缔组织后，用无菌生理盐水冲洗3 4次，从清洗干净的牦牛卵巢表面抽取卵母细胞，将卵母细胞置于收集液中，在体视显微镜下选取卵母细胞，将选取后的卵母细胞用收集液洗涤2 3次，再用成熟培养液洗涤I次； (2)将洗涤后的卵母细胞转入添加有血清、激素、卵泡液和Hepes缓冲液的培养皿中，再将培养皿放入培养箱中进行成熟培养； (3)取由流式细胞仪分离的新鲜的 普通牛的含X或Y染色体的精子或37°C解冻的普通牛的含X或Y染色体的精子，通过Percoll梯度分离液将精液中的死精子与活精子分开； (4)将步骤(2)中培养成熟的卵母细胞从Hepes缓冲液中拣出，用受精液洗涤2次后转入用受精液制成的受精微滴中，精子稀释后将含X或Y染色体的精子加入到含有卵母细胞的受精微滴中，放入培养箱中进行体外受精培养； (5)体外受精培养至受精后进行囊胚成熟处理； (6)在受精后第6、第7和第8天待囊胚成熟时回收囊胚，如有合适的受体牛，则进行胚胎移植；否则将发育良好的优质性控胚胎进行冷冻保存处理，然后置于液氮罐中贮存，供以后胚胎移植用。2.根据权利要求1所述的生产犏牛可控性别体外胚胎的方法，其特征在于:所述步骤(O中，牦牛卵巢取自屠宰场，屠宰场回收牦牛卵巢后置于30°C无菌生理盐水中，用保温瓶尽快带回实验室，用装有8号的注射器，从卵巢表面直径为2 8mm的卵泡中抽取卵母细胞，在体视显微镜下选取有三层以上致密颗粒细胞且外形明亮、细胞质均匀的卵母细胞；所述收集液为用Ifepes缓冲的、添加有5mmoI/LNaHCO3、3%0CS (发情牛血清)的TCM199的卵母细胞收集液。3.根据权利要求1所述的生产犏牛可控性别体外胚胎的方法，其特征在于:所述步骤(2)...
【专利技术属性】
技术研发人员：安添午，罗晓林，杨平贵，官久强，吴伟生，赵洪文，毛德才，谢荣清，李华德，周明亮，陈明华，蒋世海，
申请(专利权)人：四川省草原科学研究院，
类型：发明
国别省市：
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