一种新疆骏枣多糖提纯的方法技术

本发明专利技术公开了一种新疆骏枣多糖提纯的方法。本发明专利技术以去核粉碎的新疆骏枣为原料，将枣粉加水后加入1%（W/V）生物复合酶，在58-63℃，pH值6的条件下酶解56-66min，经离心、浓缩、静置和动态洗涤后，将所得粗多糖加水溶解上聚酰胺柱，聚酰胺用量为枣粗多糖的4倍，用1倍柱体积的去离子水以1.5mL/min的流速进行洗脱，然后再次浓缩、洗涤、干燥后得脱色的精多糖。该方法广泛应用于新疆骏枣多糖的提纯领域，具有广泛的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及提纯枣中多糖
，具体的说，本专利技术涉及一种新疆骏枣多糖提纯的

技术介绍
大枣{Zizyphus Jujuba Mill)又名中华火枣、华枣，为鼠李科植物枣的成熟果实。枣树原产我国，栽培历史悠久，距今已有3000年的历史，与桃、李、栗、杏并称为我同古代五果。《史记 货殖传》记载“安邑干树枣，燕秦千树桑，蜀汉江陵千树桔，其人与千户候。”，《战国策》中记有“北有枣粟之实，民虽不由田作，枣、粟之实，足食于民矣。”等。此外，《齐民要术》、《本草纲目》等古书中均有关于红枣的记载。元代柳贯的《打枣谱》是我国第一部关于红枣的专著，记载了 73个红枣品种的形状和产地。大枣的药用始载于《神农本草经》，列为卜品，为中医临床常用补益药，昧甘、性温，归脾、胃经，具有补中益气，养血安神之功，是同家公布的药食同源之品，古今均将其作为健脾专药，益气养血佳品。《神农本草经》、《证类本草》、《本草纲同》等古代代表本草中多有阐述。我国是世界上唯一拥有大面积栽培的优良枣树品种的国家。据中国农业年鉴统计资料，目前全国枣树栽种面积约67万公顷(1000万亩)，红枣年总产量约10亿公斤，占世界总产量的90%以上。枣树在 我国分布极广，北起内蒙，南至两广，西至新疆，东到沿海各省。新疆骏枣:产自世界水果优生区新疆，亘古代无污染沙化土壤，日照长，辐射强，积温高，温差大，每天15小时的充足日照，昼夜20多度的温差.全年长达220天的无霜期，昆山终年冰川雪水的灌溉，得天独厚的自然条件适合大枣等果树的生长。也造就了骏枣的卓越品质，相对于同类产品，其果形大、皮薄、肉厚、口感甘甜醇厚、其维生素C、蛋白质、矿物质含量均高于同类产品、被誉为“中华第一枣”它初夏开花，九月果熟，树上宛如挂红玛瑙，流芳溢香，光彩夺目。一个个红艳艳，光亮亮，大者如核桃，群众称它为“红宝石”。据清代文献记载“枣大疑仙种”。古语有〃一日吃三枣，终生不显老〃的说法，好处实在多多.心动不如行动哟！由于日照时间比较长，昼夜温差大，所以产出的大枣个头大、味甘甜。《本草纲目》载:“大枣味甘平无毒，主治心腹邪气，安中，养脾气，平胃气，通九窍，助十二经，补少气，和百药，久服轻身延年。”枣能调补中焦健脾益气、养血安神、缓和药性，李时珍引《日华子本草》曰“补五脏，治虚损”。《随居园饮食谱》中载红枣“鲜者甘凉。刮肠胃，助湿热。干者甘温补脾养胃，滋营充液，润肺，食之耐饥。以北产大而坚实肉厚者，补力最胜。多糖亦称为多聚糖,是由十个以上的单糖通过糖苷键连接而成，通常由上百乃至几千个单糖基组成的高分子化合物，其性质与单糖有较大差别。多糖作为药物始于1943年，自上世纪六十年代以来，多糖作为广谱免疫促进剂引起了人们的极大兴趣，有关研究日益增多。随着研究的深入，科学家们惊奇地发现多糖及其缀合物对多种危害人类健康的疾病，如免疫紊乱、癌症、糖尿病、高血压、肝炎、血栓等有显著的疗效，其中最引人注目的是它们的免疫修饰和抗肿瘤活性。目前，灵芝、茯苓和香菇多糖注射液被广泛用十临床，以治疗各种肿痛、提高免疫功能。然而，多精的抗肿瘤机理孥今尚未弄清楚。冈此，多糖的研究与开发口益引人注目。从已有的研究文献来看，大枣的药理作用与其含量较高的多糖类成分密不可分，多数药理探究报道本身就是大枣多糖的作用。归纳提取分离人枣多糖的过程一般分为两步:首先从粉碎后的大枣中提取含多糖粗品；其次从粗提取物中分离纯化多糖。从人枣中提取多糖的工艺步骤包括:破碎、浸提、沉淀、干燥等。其中浸提是影响产品得率的主要环节。目前采用的浸提方法主要有:中性热水长时间浸提法；酸碱浸提法；酶法浸提:微波辅助浸提法；超声波辅助浸提法；空气压力浸提法。采用辅助浸提法均是破坏植物细胞结构，从而保持有效成分的吲有结构和活性，提高多糖提取率。沉淀多糖的方法主要是有机溶剂法，最常用的溶剂是乙醇、甲醇、异丙醇、丙酮等。其中，乙醇、异丙醇是FDA认可的适合食品级多糖提取的最佳沉淀剂。原理是根据多糖是多羟基的醛或酮，乙醇的加入破坏多糖水溶液中的氢键，从而降低多糖的溶解度，使多糖从提取液中沉淀出来。大枣多糖是大枣中重要的生物活性物质，可作为免疫促进剂，能控制细胞的分裂和分化，调节细胞的生长和衰老，具有明显的抗补体活性和促进淋巴细胞增殖作用，对提高机体免疫力具有重要作用。大枣多糖易溶于水，不溶于高浓度的有机溶剂，高温易失去活性，过酸或偏碱都会使多糖发生部分降解。杨世平等人研究发现，大枣多糖提取最佳工艺条件为温度90°C、料水比1:15。吴娜等人研究表明，大枣多糖提取最佳工艺条件为时间6 h、料水比1:24、温度90°C。有关大枣多糖提取工艺的研究较多，但大多以大枣为原料直接提取，而以大枣为原料进行综合提取的研究较少。目前，多糖提取的研究主要集中在传统热水提取，近年来出现了超声、微波新型辅助提取技术的研究，未见报道有生物复合酶解技术提取骏枣多糖；多糖纯化的研究主要集中在柱层析技术的研究，包括离子交换柱层析和凝 胶柱层析法，采用聚酰胺柱层析技术纯化枣多糖未见报道。这种高效提纯骏枣多糖的方法具有得率和纯度高等多种优越性，开发一种效率高、成本低的新提取方法具有重要意义。
技术实现思路
针对目前国内外针对骏枣未见采用生物复合酶解技术和采用聚酰胺柱层析技术提取纯化功能性多糖的现状。本专利技术旨在提供，通过采用生物复合酶解技术提取，并采用聚酰胺柱层析技术纯化骏枣多糖的方法，不仅解决了目前提取方法提取率低、产品生物活性低等问题，还为枣加工企业提升技术水平提供了切实可行的方法。本专利技术通过以下技术方案实现: 通过将骏枣去核粉碎，加水后加入1% (W/ν)生物复合酶，在58-63°C，pH为6的条件下酶解56-66 min，离心，浓缩，静置和动态洗涤，得粗多糖，随后上聚酰胺柱，聚酰胺用量为枣粗多糖的4倍，用I倍柱体积的去离子水以1.5 mL/min的流速进行洗脱，然后再次浓缩、洗涤、冷冻干燥，得到脱色的精多糖。本专利技术提供，制备方法如下: (1)把去核粉碎的骏枣加水后加入生物复合酶进行酶解； (2)酶解结束后离心，将上清液真空浓缩，工业酒精调至含醇量为80%，静置过夜，离心，沉淀依次用无水乙醇、丙酮洗涤，得粗多糖；(3)取粗多糖加水溶解上聚酰胺柱，用水洗脱，收集流出液； (4)经洗涤沉淀，冷冻干燥后得脱色的精多糖。进一步，本专利技术详细提供了新疆骏枣多糖提纯的方法，具体制备方法步骤如下: (I)前处理:将骏枣去核、粉碎，制得枣粉。(2)酶解:将枣粉加水后添加1% (W/V)生物复合酶，在58_63°C，pH值6的条件下酶解56-66 min，其中，按重量比计，生物复合酶按照干果专用酶:蛋白酶为1:1。(3)浓缩:酶解结束后离心，合并上清液，之后将上清液进行真空浓缩。(4)洗涤:将上述步骤(3)获得浓缩产物用工业酒精调至含醇量为80%，静置过夜，离心，沉淀依次用无水乙醇、丙酮洗涤各洗三次。(5)洗脱:取上述步骤(4)获得提取的粗多糖加5倍体积的水溶解，上聚酰胺柱，按体积比计，采用的聚酰胺用量为酶解后提取的粗多糖的4倍，用I倍柱体积的去离子水以1.5 mL/min的流速进行洗脱。(6)干燥:将上述步骤(5)获得提取的粗多糖经洗脱沉淀进行冷冻干燥。同时，本专利技术提供经过上述制备方法制备获得的骏枣多本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种新疆骏枣多糖提纯的方法，其特征在于，所述的提纯方法具体步骤如下：（1）前处理：将骏枣去核、粉碎，制得枣粉;（2）酶解：将枣粉加水后添加1%（W/V）生物复合酶，在58‑63℃，pH值6的条件下酶解56‑66 min，其中，按重量比计，生物复合酶按照干果专用酶:蛋白酶为 1:1;（3）浓缩：酶解结束后离心，合并上清液，之后将上清液进行真空浓缩;（4）洗涤：将上述步骤（3）获得浓缩产物用工业酒精调至含醇量为80%，静置过夜，离心，沉淀依次用无水乙醇、丙酮洗涤各洗三次;（5）洗脱：取上述步骤（4）获得提取的粗多糖加5倍体积的水溶解，上聚酰胺柱，按体积比计，采用的聚酰胺用量为酶解后提取的粗多糖的4倍，用1倍柱体积的去离子水以1.5 mL/min的流速进行洗脱;（6）干燥：将上述步骤（5）获得提取的粗多糖经洗脱沉淀进行冷冻干燥。

【技术特征摘要】
1.一种新疆骏枣多糖提纯的方法，其特征在于，所述的提纯方法具体步骤如下: (1)前处理:将骏枣去核、粉碎，制得枣粉； (2)酶解:将枣粉加水后添加1%(W/V)生物复合酶，在58-63°C，pH值6的条件下酶解56-66 min，其中，按重量比计，生物复合酶按照干果专用酶:蛋白酶为1:1; (3)浓缩:酶解结束后离心，合并上清液，之后将上清液进行真空浓缩； (4)洗涤:将上述步骤(3)获得浓缩产物用工...

【专利技术属性】
技术研发人员：山衡，苏霞，陈文霞，阿里木江穆提拉，
申请(专利权)人：新疆优康来生物科技开发有限公司，
类型：发明
国别省市：新疆;65