一种高纯度肺囊康定B0的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种利用丝状真菌Glarea?lozoyensis发酵培养物制备肺囊康定B0的方法。该方法包括使用助滤剂，经过浸提、脱色、吸附、结晶等步骤，得到肺囊康定B0粗提物，再借助聚合物微球对粗提物进行层析分离，得到高纯度的肺囊康定B0产品。本发明专利技术的优点在于采用大孔树脂提取分离肺囊康定B0，工艺简单易行，适宜于工业化生产；并首次将聚合物微球用于该产品的层析分离，可以制备高纯度的肺囊康定B0产品。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于工业微生物
，具体涉及一种高纯度肺囊康定Btl的制备方法。
技术介绍
棘白霉素是一类新型的抗真菌药，对于念珠菌属以及曲霉菌属均有效，而且安全性较高。目前已经有3个品种上市，即默克公司的卡泊芬净，藤泽药业的米卡芬净，以及辉瑞公司的阿尼芬净。其中卡泊芬净是美国FDA最早批准上市的一种棘白菌素，由默克公司研制开发，2001年2月首先在美国上市，用于白色念珠菌和烟曲霉菌的感染。卡泊芬净(Caspofungin)，是第一个被批准用于治疗由于不能耐受其它抗真菌药物，或者其它抗真菌药物疗效不佳的侵袭性曲霉病的棘白菌素类抗真菌药物(Groll AH,Piscitelli SC, Walsh TJ.Adv Pharmacol, 1998,44:343-500) 卡泊芬净对于念珠菌、曲霉菌等有良好的抑制活性(Georgopapadakou NH.Expert Opin Investig Drugs, 2001,10:269-280)，对于一些双相真菌如组织胞浆菌、粗球孢子菌、皮炎芽生菌等也有抑制作用。与其它棘白菌素类抗真菌药物相似，该药有良好的药代动力学特性。因此，卡泊芬净的研究开发具有重要意义。肺囊康定(Pneumocandin)是丝状真菌Glarea 1zoyensis的发酵代谢产物,分为肺囊康定Bci与肺囊康定Aci,其中肺囊康定Bci是合成卡泊芬净(caspofungin)的主要原料。肺囊康定Btl经BH3、Me2S还原酰胺基后，与胺乙基硫醇在对甲苯磺酸作用下脱去I分子水，在分子中引入胺乙基 硫基，用臭氧对硫氧化后，与乙二胺作用引入乙二胺基，再与2分子醋酸成盐制得卡泊芬净。肺囊康定B。的结构式如下:本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高纯度肺囊康定B0的制备方法，包括下述步骤：1)在肺囊康定B0发酵液中加入助滤剂，机械搅拌均匀；2)发酵液固液分离，得到固形发酵培养物；3)在固形发酵培养物中加入极性溶剂搅拌浸提；4)浸提液固液分离，得到肺囊康定B0提取液；5)将提取液导入大孔脱色树脂脱色，得到脱色液；6)调整脱色液中极性溶剂浓度后将其导入大孔吸附树脂进行吸附，吸附完毕用解吸剂进行解吸，得到解吸液；7)将解吸液依次浓缩、萃取、结晶，得到肺囊康定B0粗提物；8)粗提物依次经聚合物微球层析分离、洗脱溶剂洗脱后，得到洗脱液；9)将步骤8)中的洗脱液分段浓缩、萃取、结晶、干燥，得到高纯度的肺囊康定B0产品。

【技术特征摘要】
1.一种高纯度肺囊康定Btl的制备方法，包括下述步骤: 1)在肺囊康定Btl发酵液中加入助滤剂，机械搅拌均勻； 2)发酵液固液分离，得到固形发酵培养物； 3)在固形发酵培养物中加入极性溶剂搅拌浸提； 4)浸提液固液分离，得到肺·囊康定Btl提取液； 5)将提取液导入大孔脱色树脂脱色，得到脱色液； 6)调整脱色液中极性溶剂浓度后将其导入大孔吸附树脂进行吸附，吸附完毕用解吸剂进行解吸，得到解吸液； 7)将解吸液依次浓缩、萃取、结晶，得到肺囊康定Btl粗提物； 8)粗提物依次经聚合物微球层析分离、洗脱溶剂洗脱后，得到洗脱液； 9)将步骤8)中的洗脱液分段浓缩、萃取、结晶、干燥，得到高纯度的肺囊康定Btl产品。2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤I)中的助滤剂为珍珠岩或硅藻土，优选为珍珠岩；其用量为每升发酵液5-50克，优选为10-30克。3.根据权利要求1所述的方法，其中步骤2)、4)中的固液分离方式为真空抽滤或板框压滤。4.根据权利要求1所述的方法，其中步骤3)中的极性溶剂为甲醇、乙醇或丙酮之一，优选为乙醇；其加入量为每千克发酵培养物2...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晓露，张雪霞，任风芝，林毅，林旸，王海燕，李宁，王健，陈书红，李丽红，成晓迅，高月麒，张金娟，张丽，蒋沁，段宝玲，
申请(专利权)人：华北制药集团新药研究开发有限责任公司，
类型：发明
国别省市：