损伤部位治疗用组合物制造技术

本发明专利技术提供：损伤部位治疗用组合物，其用于修复靶组织的损伤部位，该组合物含有通过培养干细胞而得到的干细胞培养上清；损伤部位治疗方法，其是用于修复或恢复靶组织的损伤部位的损伤部位治疗方法，该方法包括将上述损伤部位治疗用组合物以用于修复上述靶组织的损伤部位的治疗有效量对具有上述损伤部位治疗用组合物的靶组织的患者进行给药的步骤；脑梗塞的治疗方法，该方法包括将上述损伤部位治疗用组合物以用于修复脑损伤部位的有效量对脑梗塞患者进行给药的步骤；中枢神经疾病的治疗方法，该方法包括将上述损伤部位治疗用组合物作为中枢神经疾病治疗用组合物以治疗有效量对中枢神经疾病患者进行给药的步骤。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及损伤部位治疗用组合物以及使用该组合物的治疗方法。
技术介绍
在现有的医疗中，作为针对难以治疗的疾病的通用替代技术，利用干细胞的再生医疗受到了人们的关注。利用干细胞的再生医疗在对于全部疑难病的新型临床平台中是有希望的手段。已经有以胚胎干细胞(ES细胞)、诱导多能干细胞(iPS细胞)以及成体干细胞为代表的各种干细胞的报告。在成体干细胞中，由骨髓、脂肪组织、皮肤、脐带、胎盘等各种组织中分离出的间充质干细胞(MSC)被特别用于皮肤再生的临床应用方面。但是，骨髓穿刺对于供体来说为一种侵袭性且有痛性的技术。进一步地，骨髓干细胞(BMSC)的数目、增殖以及分化能力随着年龄的增长而降低。可应用再生医疗或期待应用再生医疗的疾病有很多，已经进行了许多面向临床应用的研究。神经疾病、特别是脊髓损伤等难治性神经疾病为期待利用再生医疗进行治疗的疾病之一。人们已经认识到，使用 人胎儿或ES细胞来源的神经干细胞来进行的难治性神经疾病的移植治疗(例如日本特开2002-281962号公报)为具有现实性的研究课题，但其在伦理性、安全性方面大有问题，对于实用性的“干细胞源”迄今仍为摸索状态(例如Keirstead et al·，Human embryonic stem cell-derived oligodendrocyte progenitorcelItransplants remyelinate and restore locomotion after spinal cord injury,Journal ofNeuroscience(2005)vol. 25(19)pp. 4694 ；0kano et al. , Neural stem cellsandregeneration of injured spinal cord,Kidney international(2005), Vol. 68, pp.1927—1931 ；Okada et al.，Spatiotemporal recapitulation of central nervous systemdevelopment bymurine embryonic stem cell derived neural stem and progenitorcells, Stem Cells (2008) vol. 26(12)pp. 3086-3098)。作为生物体内干细胞，有骨髓或脂肪来源的干细胞(例如国际公开第02/086108号小册子)，这些干细胞有几个缺点，即(1)随着年龄的增加，可采集的干细胞数目减少；(2)随着年龄的增加而累积的基因变异使得移植干细胞难以确保安全性；(3)细胞增殖能力低；(4)干细胞采集中伴随有剧烈的生物体侵袭(例如Gronthos etal., Postnatal human dental pulp stem cells (DPSCs) in vitro and in vivo,ProcNatl Acad SciUSA(2000)vol. 97(25)pp. 13625-13630 ；Miura et al. , SHED:stem cellsfrom humanexfoliated deciduous teeth,Proceedings of the National Academy ofSciences (2003) Vol. 100, 5807-5812);等等。开发出用于解决这些问题的新型难治性神经疾病治疗用干细胞资源是重要的。人脱落乳牙牙髓干细胞(stemcells from exfoliated deciduous teeth ；SHED)及智齿来源的恒牙牙髓干细胞(dental pulp stem cells ；DPSC)是医疗废弃物,经鉴定其是与BMSC具有同样的自我复制能力和多分化能力的新型干细胞群。这些细胞是显示出与神经谱系相近性状的神经嵴来源的细胞群，在分化诱导为神经细胞方面显示出较高的反应性(例如，Miura et al. , SHED: stem cells fromhumanexfoliated deciduous teeth, Proceedings of the National Academy ofSciences(2003)Vol. 100, 5807-5812 ；Arthur et al·，Adult human dental pulp stemcells differentiate towardfunctionalIy active neurons under appropriateenvironmental cues, Stem Cells (2008) vol. 26 (7) pp. 1787-1795)。SHED 与 DPSC 为自身来源的组织干细胞，因而移植中的安全性高，也极少有伦理问题。但是，在现有的SHED与DPSC的研究中，除了神经细胞谱系的片段化分析、或将神经分化诱导后的SHED或DPSC移植到啮齿类中对其生存进行观察之外，并未明确提出更进一步的技术思想(例如Arthur et al. , Adult human dental pulp stemcellsdifferentiate toward functionally active neurons under appropriateenvironmental cues,Stem Cel Is (2008)vol. 26 (7)pp. 1787-1795;Huang etal., Putative dental pulp-derivedstem/stromal cells promote proliferation anddifferentiation of endogenous neural cells inthe hippocampus of mice,StemCells(2008)vol. 26(10)pp. 2654-2663)。进一步地，据报告，DPSC具有可用于神经系统疾病、心脏病等全身性疾病用的基于细胞的治疗中的可能性，并且DPSC可减轻缺血性疾病(Arthur et al.，Adult humandentalpulp stem cells differentiate toward functionalIy active neurons underappropriateenvironmental cues,Stem Cells (2008)vol. 26(7) pp. 1787-1795 ；GandiaC，Arminan A, Garcia-Verdugo JMj et al., Human dental pulp stem cells improve leftventricular function,induce angiogenesis，and reduce infarct size in rats withacute myocardial infarction, StemCells 2008 ；26:638-645. ；Iohara K，Zheng Lj WakeH，et al. , A novel 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.12.01 JP 2010-267962;2011.02.23 JP 2011-037021.一种损伤部位治疗用组合物，其用于修复靶组织的损伤部位，该组合物含有通过培养干细胞而得到的干细胞培养上清。2.如权利要求1所述的损伤部位治疗用组合物，其中，该组合物不含有所述干细胞。3.如权利要求1或权利要求2所述的损伤部位治疗用组合物，其中，所述干细胞培养上清含有至少2种细胞因子。4.如权利要求1 3的任意I项所述的损伤部位治疗用组合物，其中，所述干细胞培养上清含有选自由血管内皮增殖因子(VEGF)、肝细胞增殖因子(HGF)、胰岛素样生长因子(IGF)、血小板来源生长因子(TOGF)、转化生长因子-β (TGF-β)组成的组中的至少2种细胞因子。5.如权利要求1 4的任意I项所述的损伤部位治疗用组合物,其中,所述干细胞为成体干细胞。6.如权利要求1 5的任意I项所述的损伤部位治疗用组合物,其中,所述干细胞来源于间充质干细胞。7.如权利要求1 6的任意I项所述的损伤部位治疗用组合物,其中,所述干细胞为牙髓干细胞。8.如权利要求1 7的任意I项所述的损伤部位治疗用组合物，其中，该组合物不含有血清。9.如权利要求1 8的任意I项所述的损伤部位治疗用组合物，其中，所述损伤部位治疗为皮肤、牙周组织或者骨的损伤的治疗；脑硬塞治疗；或中枢神经疾病治疗。10.如权利要求1 9的任一项所述的损伤部位治疗用组合物，其中，所述损伤部位治疗为中枢神经疾病的治疗，所述中枢神经疾病为选自由脊髓损伤、神经退行性疾病、神经细胞的退行或脱落以及伴有神经细胞障碍的视网膜疾病组成的组中的疾病或病症。11.如权利要求1 10的任意I项所述的损伤部位治疗用组合物的制造方法，其包括以下的步骤⑴ ⑶ (1)从牙髓细胞中挑选出粘附细胞的步骤； (2)对所述粘附细胞进行培养的步骤；和 (3)回收培养上清的步骤。12.如权利要求11所述的制造方法，其进一步包括以下的步骤(4) (4)对于回收后的培养上清进行处理的步骤，所述处理选自由离心处理、浓缩、溶剂的置换、透析、冷冻、干燥、冷冻干燥、稀释、脱盐和保存组成的组中的至少I种。13.如权利要求11或权利要求12所述的制造方法，其进一步包括下述步骤(a)和(b)中的至少一个步骤 (a)针对...

【专利技术属性】
技术研发人员：上田实，山田阳一，蛯泽克己，山本朗仁，酒井阳，松原弘记，服部宇，杉山昌彦，井上崇德，
申请(专利权)人：国立大学法人名古屋大学，
类型：
国别省市：