用于肺结核证候特征蛋白质检测的试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了用于肺结核证候特征蛋白质检测的试剂盒及其应用，其包括iTRAQ同位素标记试剂，SAA1、IGHG3、IGHM、IGHA1、LAC2、IGLL5、HPT、HBA和HBD蛋白标准品。本发明专利技术的试剂盒能够筛选肺结核中医证候的特征性血清蛋白质，具有较高的特异性和准确性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及蛋白质组学
，尤其涉及的是用于肺结核证候特征蛋白质检测的试剂盒及其应用。
技术介绍
血清蛋白质组组成成分、表达水平与证候有密切联系，用蛋白质组学方法分析动态变化的蛋白质组，对统一肺结核证候辨证，规范证候分型，探讨证候的生物学本质有重要意义。iTRAQ-2DLC-MS/MS是将iTRAQ同位素标记技术、二维液 相色谱串联质谱技术相联用，能对所有蛋白质进行同位素标记；与质谱联用时，信号离子表现为不同质荷比的峰，根据波峰的高度及面积可得到准确的蛋白质定量信息，非常适合对多样本的平行分析，可用以发现更多与疾病相关的特征蛋白。为此，应用iTRAQ-2DLC-MS/MS技术，研究肺结核证候的差异蛋白质，获得能反映肺结核证候的特征性蛋白质，有助于研究肺结核中医证候的生物学本质。SAAl (Serum amyloid A proteinl),即淀粉样蛋白I,是一种急性炎性蛋白，具有巨噬细胞趋化作用；能通过促进脂肪分解(主要是甘油三酯TG的分解)、抑制脂肪生成、抑制机体对脂肪酸利用等，使机体积累脂肪酸。IGHG3 (Ig gamma-3 chain C region)，即 IgG本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于肺结核证候特征蛋白质检测的试剂盒，其包括iTRAQ同位素标记试剂，SAA1、IGHG3、IGHM、IGHA1、LAC2、IGLL5、HPT、HBA和HBD蛋白标准品。

【技术特征摘要】
1.用于肺结核证候特征蛋白质检测的试剂盒，其包括iTRAQ同位素标记试剂，SAA1、IGHG3、IGHM、IGHAl、LAC2、IGLL5、HPT、HBA 和 HBD 蛋白标准品。2.根据权利要求1所述的蛋白质检测试剂盒，其特征在于所述的iTRAQ同位素标记试剂包括安捷伦多重吸附去高丰度蛋白液相色谱柱、iTRAQ试剂盒和S印-Pak Vac C18反相硅胶吸附脱盐柱。3.权利要求1-2任意一项所述的试剂盒和吸附柱在制备肺结核证候特征蛋白质的标记中的应用。4.权利要求1-2任意一项所述的试剂盒和吸附柱在检测离体血清样本中标记肺结核证候特征蛋白质中的应用，其中所述的应用包括如下步骤 (1)血清于_80°C中取出，待4°C自然溶解，将血清样品使用Agilentmultipleaffinityremoval LC column-Human 14(MARS)柱子，除高丰度蛋白，所述高丰度蛋白包括血清白蛋白、免疫球蛋白G，抗胰蛋白酶，IgA，IgM，然后收集第一个峰，流出柱子后蛋白质进行3K分子量截留超滤以去除洗脱液中的盐成分，再用丙酮在-20°沉淀过夜，蛋白质沉淀用溶解液再悬浮； (2)进行蛋白消化，再用iTRAQ试剂标记样本首先取样品加入预冷的丙酮，于-20°沉淀I小时，12000rpm...

【专利技术属性】
技术研发人员：李继承，江婷婷，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：