一种毛细管电泳检测抗体与多肽相互作用的方法技术

本发明专利技术涉及一种毛细管电泳检测抗体与多肽相互作用的方法，属于生物分析领域。首先将抗体与不同比例的多肽混合，然后进行毛细管电泳检测，同时检测抗体多肽复合物和荧光多肽的出峰时间及荧光强度，对抗体多肽复合物的电泳峰进行积分，将积分面积换算为复合物浓度，根据公式可计算抗体与多肽的解离常数KD。该方法还可以检测两种外源多肽与抗体相互作用的竞争过程。实验证明，该方法操作简单，检测灵敏度高，所需时间短。该方法是对传统抗体多肽相互作用检测技术进行改进，结合荧光检测灵敏度高等优点，建立的一种新的高灵敏抗体多肽相互作用检测技术。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物分析领域，特别涉及。
技术介绍
多价结合的相互作用在研究溶液中生物分子之间的相互作用起着非常重要的作用。例如，IgG抗体有两个抗原多肽结合位点，可以结合两种抗原，属于一种二价结合作用。然而，通过色谱分辨1:1和1:2的IgG抗体-肽复合物，在溶液中是非常具有挑战性的，因为在分子量、表面形状和疏水性的差异两者之间是非常接近的。因此，实现两种不同比例的抗体-肽复合物的分离是非常困难的。 FLAG标签多肽是一个与重组蛋白相融合的由8个亲水氨基酸组成的多肽片段，倾向于定位在融合蛋白表面，因此更易与抗体结合。FLAG标签只有8个氨基酸组成，因此它不会占据融合蛋白的其他表位和结合域，导致融合蛋白·的功能、分泌性以及转运发生改变。因此，该标签被广泛的应用于融合蛋白的表达、纯化和检测等方面。抗FLAG单克隆抗体能识别位于氨基端或羧基端的FLAG标签，具有高灵敏度，高特异性和高亲和力。生物分析技术在揭示抗体和多肽的相互作用中起到了至关重要的作用。目前研究抗体与多肽相互作用的方法主要有表面等离子体共振(SPR) (M. Oda, T. Azuma,Mol.1mmunol., 2000本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种毛细管电泳检测抗体与多肽相互作用的方法，其特征在于：首先将抗体与不同比例的经荧光标记的多肽混合，然后分别进行毛细管电泳检测，同时检测抗体多肽复合物和荧光多肽的出峰时间及荧光强度，对抗体多肽复合物的电泳峰进行积分，根据公式可计算抗体与多肽的解离常数KD。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王建浩，王车礼，邱琳，蒋鹏举，夏江，
申请(专利权)人：常州大学，
类型：发明
国别省市：