本发明专利技术涉及一种从蜈蚣草中提取具有抑制金黄色葡萄球菌作用的黄酮类化合物及其制备方法。本发明专利技术从蜈蚣草中，用超声波协同复合酶(纤维素酶与果胶酶)提取，减压浓缩后依次用石油醚，氯仿，乙酸乙酯和正丁醇萃取，将乙酸乙酯层和正丁醇层萃取液减压浓缩，浓缩液经纯化处理分离出黄酮，再经真空冷冻干燥得蜈蚣草黄酮粉末。对该黄酮粉末进行不同菌种的抑菌实验。实验结果表明该乙酸乙酯层的黄酮对金黄色葡萄球菌有显著的抑制作用，且具有明显的量效关系。本发明专利技术还具有资源丰富、设备简便，产品提取率高，溶剂可回收等优点。因此具有广泛的药用价值及良好的功能食品和防腐剂的开发前景。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种从富含黄酮的蜈蚣草中提取的具有抑制金黄色葡萄球菌作用的黄酮及其制备方法。
技术介绍
金黄色葡萄球菌是人类的一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属，有“嗜肉菌"的别称，是革兰氏阳性菌的代表，可引起许多严重感染。如何防治金黄色葡萄球菌是一个世界性的卫生难题。黄酮类化合物具有广泛的生物活性，它是一种很强的抗氧化剂，可有效清除体内的多种自由基，这种抗氧化作用可以阻止细胞的退化、衰老，提高免疫力，也可阻止癌症的发生；也可以改善血液循环，大大降低了心脑血管疾病的发病率；还可以降低胆固醇，是糖尿病、高血脂、高血压患者的福音。黄酮类化合物对自然界中的很多病原微生物具有广泛的抑制和杀灭作用，可破坏细胞壁及细胞膜的完整性，从而抑制微生物的生长。因此可以预防伤口感染，促进伤口愈合，治疗炎症，还可以用作食品防腐剂等等。蜈蚣草属于蕨类植物，常地生和附生于溪边林下的石缝中和树干上，喜温暖潮润和半阴环境，资源丰富。其黄酮含量高达12%以上，民间有将蜈蚣草用来防治流行性感冒、 痢疾，治疗咬伤、疥疮，解毒杀虫等。黄酮类化合物在防病防菌方面起着重要的作用，因此从蜈蚣草中提取具有抑菌效果的黄酮类化合物具有很好的应用前景。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种从富含黄酮的蜈蚣草中提取具有抑菌作用的黄酮及其制备方法，这种黄酮可用于或直接用作药品和药品主料以及保健品，防腐剂等。本专利技术为解决上述提出的问题所采用的技术方案为从蜈蚣草中，用超声波协同复合酶提取、乙酸乙酯和正丁醇萃取的提取液，经真空浓缩后，将浓缩液低温真空干燥得黄酮粉末。本专利技术制备黄酮的技术方案为以蜈蚣草为原料，将其粉碎后备用，取一定量的蜈蚣草粉末用超声波协同复合酶提取，分离出提取液，经减压浓缩得浸膏，在浸膏中加入少量蒸馏水，先用石油醚萃取，对水层再加入氯仿萃取，取其水层再加入乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯层萃取液，对水层再加入正丁醇萃取，收集正丁醇层萃取液，将乙酸乙酯层和正丁醇层分别减压干燥浓缩，在_40°C真空冷冻干燥得乙酸乙酯层和正丁醇层的黄酮粉末。上述制备方法中，提取黄酮时，pH为3.8-5. 2，提取温度为45_60°C，复合酶为纤维素酶与果胶酶，其复合比为1: 1-6 1，超声波处理时间为45-55s，超声波功率为 500-800 。复合酶用量为每克原料300U。溶剂与蜈蚣草粉末的料液比按V/W(容量/重量) 为20 1-30 I。石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇分别萃取三次，萃取比(被萃取液萃取溶剂)为1: 2-1 : 5。本专利技术中的蜈蚣草采摘于广州大学城中心湖附近，其总黄酮含量为12. 59%本专利技术的提取和干燥过程在60°C以下的条件下进行。本专利技术的有益效果和功能活性作用在于1、通过本专利技术的黄酮粉末对不同菌种抑菌圈的实验。结果如表I所示，乙酸乙酯层黄酮粉末对金黄色葡萄球菌有显著的抑制作用， 剂量为10. 12mg/ml，抑菌圈直径达23. 15mm。表I蜈蚣草各萃取层黄酮(剂量为10. 12mg/ml)对不同菌种的抑菌圈直径(mm)权利要求1.一种具有抑菌作用的黄酮，其特征在于从富含黄酮的蜈蚁草中，用超声波协同复合酶提取，将提取液减压浓缩后经石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，收集乙酸乙酯层和正丁醇层分别经真空干燥后，将浓缩液经纯化处理分离出黄酮，再经真空冷冻干燥制得蜈虫公草黄酮粉末。2.按权利要求1所述的蜈蚣草，其特征在于其采摘于广州大学城中心湖附近，是一种蕨类植物，常地生和附生于溪边林下的石缝中和树干上。喜温暖潮润和半阴环境。蜈蚣草的总黄酮含量为12. 59%。3.一种具有抑菌作用的黄酮的制备方法，其特征在于以蜈蚣草为原料，将采摘后的蜈蚣草烘干并将其粉碎后备用，取一定量的蜈蚣草粉末用超声波协同复合酶提取，分离出提取液，经减压浓缩得浸膏，在浸膏中加入少量蒸馏水，先用石油醚萃取三次除去色素等极性较小的杂质，对水层再加入氯仿萃取三次除去亲脂性部位，对水层再加入乙酸乙酯萃取三次，收集乙酸乙酯层萃取液，对水层再加入正丁醇萃取三次，收集正丁醇层，将乙酸乙酯层和正丁醇层分别减压干燥浓缩，再_40°C真空冷冻干燥得乙酸乙酯层和正丁醇层粉末。4.按权利要求3所述的制备方法，其特征在于用超声波协同复合酶提取时，pH为 3.8-5. 2，提取温度为45-60°C，复合酶为纤维素酶与果胶酶，其复合比为1: 1_6 1，超声波处理时间为45-55s，超声波功率为500-800 。复合酶用量为每克原料300U。溶剂与蜈蚣草粉末的料液比按V/W(容量/重量)为20 1-30 I。5.按权利要求3所述的制备方法，其特征在于萃取黄酮时，被萃取液和萃取溶剂的体积比均为1: 2-1 : 5。6.按照权利要求3所述的制备方法，其特征在于蜈蚣草采摘于广州大学城中心湖附近，其总黄酮含量为12. 59%。7.按权利要求3所述的制备方法，其特征在于真空冷冻干燥过程在_40°C以下的条件下进行。全文摘要本专利技术涉及一种从蜈蚣草中提取具有抑制金黄色葡萄球菌作用的黄酮类化合物及其制备方法。本专利技术从蜈蚣草中，用超声波协同复合酶(纤维素酶与果胶酶)提取，减压浓缩后依次用石油醚，氯仿，乙酸乙酯和正丁醇萃取，将乙酸乙酯层和正丁醇层萃取液减压浓缩，浓缩液经纯化处理分离出黄酮，再经真空冷冻干燥得蜈蚣草黄酮粉末。对该黄酮粉末进行不同菌种的抑菌实验。实验结果表明该乙酸乙酯层的黄酮对金黄色葡萄球菌有显著的抑制作用，且具有明显的量效关系。本专利技术还具有资源丰富、设备简便，产品提取率高，溶剂可回收等优点。因此具有广泛的药用价值及良好的功能食品和防腐剂的开发前景。文档编号A61K36/11GK102988428SQ201210572468公开日2013年3月27日 申请日期2012年12月14日 优先权日2012年12月14日专利技术者丁利君, 余姣, 熊俊娟, 冯思 申请人:广东工业大学本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种具有抑菌作用的黄酮，其特征在于从富含黄酮的蜈蚣草中，用超声波协同复合酶提取，将提取液减压浓缩后经石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，收集乙酸乙酯层和正丁醇层分别经真空干燥后，将浓缩液经纯化处理分离出黄酮，再经真空冷冻干燥制得蜈蚣草黄酮粉末。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：丁利君，余姣，熊俊娟，冯思，
申请(专利权)人：广东工业大学，
类型：发明
国别省市：
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