一种3D共培养球状体及其构建方法和应用、免疫毒性评价方法技术

本发明专利技术公开了一种3D共培养球状体及其构建方法和应用、免疫毒性评价方法，涉及免疫毒性分析技术领域。本发明专利技术3D共培养球状体的构建方法，包括以下步骤：用佛波酯处理THP‑1细胞，得到THP‑1mφs细胞；分别用胰蛋白酶消化BEAS‑2B细胞、MRC‑5细胞和THP‑1mφs细胞，将消化后的三种细胞混合，得到混合细胞悬液；将混合细胞悬液接种到超低附着板中进行培养，得到3D共培养球状体。本发明专利技术的构建方法能够得到在结构和功能上接近人体肺部的实际情况的3D共培养球状体，能够更真实和可靠地模拟人体肺部对环境污染物的免疫响应，弥补了2D细胞培养技术和传统动物模型的局限性。本发明专利技术还提成了基于3D共培养球状体的免疫毒性评价方法，能够更准确地评估环境污染物对肺部免疫系统的影响。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及免疫毒性分析，具体涉及一种3d共培养球状体及其构建方法和应用、免疫毒性评价方法。

技术介绍

1、免疫系统是污染物风险评估的敏感靶标，在当前日益严峻的环境污染问题下，对于环境污染物的免疫毒性评价显得尤为重要。肺作为人体吸入环境污染物的主要通道，发挥了重要的免疫防御作用，因此肺部免疫毒性的评价尤为关键。目前常用的肺部毒性评价模型有动物模型和2d细胞培养细胞。

2、动物模型能够提供与人类细胞和器官系统相似的复杂生理结构，但由于物种之间的差异，动物模型的研究结果通常难以准确反映人类的实际情况，且动物模型受到伦理问题的制约。传统的2d细胞培养细胞通常被培养在平坦的聚苯乙烯或玻璃培养皿，难以模拟体内真实环境中组织的复杂性，使得传统的2d细胞培养细胞在预测人体对环境污染物的反应时存在一定的局限性，难以准确评估环境污染物对肺部免疫系统的影响。因此，亟需开发一种能够模拟真实肺部微环境的肺部毒性评价模型，进而可以更准确地评估环境污染物对肺部免疫系统的影响。

技术实现思路

1、鉴于上述现有技术的不足，本专本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种3D共培养球状体的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的3D共培养球状体的构建方法，其特征在于，在步骤(2)中，BEAS-2B细胞、MRC-5细胞和THP-1mφs细胞按细胞数量比为(0.8～1.2)：(0.8～1.2)：(0.8～1.2)的比例进行混合。

3.一种3D共培养球状体，其特征在于，由权利要求1或2所述的3D共培养球状体的构建方法构建得到。

4.权利要求3所述的3D共培养球状体在制备模拟环境污染物对免疫毒性的模型中的用途。

5.一种基于3D共培养球状体的免疫毒性评价方法，其特征在于，使用权利要求3...

【技术特征摘要】

1.一种3d共培养球状体的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的3d共培养球状体的构建方法，其特征在于，在步骤(2)中，beas-2b细胞、mrc-5细胞和thp-1mφs细胞按细胞数量比为(0.8～1.2)：(0.8～1.2)：(0.8～1.2)的比例进行混合。

3.一种3d共培养球状体，其特征在于，由权利要求1或2所述的3d共培养球状体的构建方法构建得到。

4.权利要求3所述的3d共培养球状体在制备模拟环境污染物对免疫毒性的模型中的用途。

5.一种基于3d共培养球状体的免疫毒性评价方法，其特征在于，使用权利要求3所述的3d共培养球状体，或包括了权利要求1或2所述的3d共培养球状体的构建方法，还包括如下步骤：

6.根据权利要求5所述的基于3d共培养球状体的免疫毒性评价方法，其特征在于，步骤s2对暴露前后的3d共培养球状体进行形态学分析的方法包括如下步骤：

7.根据权利要求5所述的基于3d共培养球状体的免疫毒性评价方法，其特征在于，所述细胞活力检测中，采用细胞计数试剂试剂盒，在暴露结束后的孔板中加入cck-8...

【专利技术属性】
技术研发人员：周义鸾，李心砚，郑爽，沈权猷，栾天罡，
申请(专利权)人：广东工业大学，
类型：发明
国别省市：