【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及分子生物学，特别是涉及一种检测番茄斑萎病抗性的kasp标记引物及其应用。
技术介绍
1、番茄作为世界上栽培和消费最广泛、最重要的蔬菜作物，其产量和品质是影响番茄生产和加工的重要指标。近年来，番茄斑萎病严重影响了番茄产量和品质。目前克隆的sw-5是番茄中抵抗番茄斑萎病的唯一规模化应用和具有广谱抗性的抗病基因。然而，经过多年广泛应用以及tswv的进化变异，sw-5的抗性在高浓度或特异番茄斑萎病毒分离物侵染情况下常被克服或打破，导致番茄品种抗性减弱或丢失。本研究获得的抗病品种对番茄斑萎病表现突出的抗性，且抗性稳定，利用该品种开发分子标记可作为番茄抗病育种中优良的标记性状，用于杂交子代的选育，可大大节约杂交育种过程中的人力和物力。
2、前期研究已经对番茄斑萎病抗病品种的抗性性状有了深入的调查研究，明确其番茄斑萎病抗性性状受显性单基因控制，并且完成了番茄斑萎病抗病性状基因的遗传定位，且初步完成番茄抗病基因sldnaj的克隆和分析研究。利用抗病和感病品种间抗病基因的差异性开发竞争性等位基因特异性聚合酶链式反应(kompetitive allele specific pcr,kasp)分子标记，可高效检测出未知番茄材料是否表现番茄斑萎病抗性，对番茄商业化抗病育种及高品质遗传改良应用研究方面提供有效技术支持。
3、目前，未见相关文献报道用于鉴定关联番茄抗病基因sldnaj的kasp分子标记。为此，本专利技术基于突变位点开发了鉴定检测番茄斑萎病抗病番茄品种的kasp分子标记，本专利技术可高效的对携带番茄抗病基
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种检测番茄斑萎病抗性的kasp标记引物及其应用，以解决上述现有技术存在的问题，该kasp标记引物可实现sldnaj番茄斑萎病抗病基因的精准、快速、高通量检测，操作步骤简单、检测高效，为番茄斑萎病抗病育种应用提供一种新选择。
2、为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
3、本专利技术提供一种检测番茄斑萎病抗性的kasp标记引物，所述kasp标记引物包含kasp-1-f、kasp-2-f和kasp-r；所述kasp-1-f的核苷酸序列如seq id no：1所示，所述kasp-2-f的核苷酸序列如seq id no：2所示，所述kasp-r的核苷酸序列如seq id no：3所示。
4、本专利技术还提供一种鉴定番茄斑萎病抗性的检测试剂或检测试剂盒，包含上述的kasp标记引物。
5、本专利技术还提供上述的kasp标记引物在制备检测番茄斑萎病抗性的产品中的应用。
6、进一步地，所述产品包含检测试剂或检测试剂盒。
7、本专利技术还提供一种筛选或鉴定番茄斑萎病抗病品种的方法，包括如下步骤：
8、以待测番茄的基因组dna为模板，利用上述kasp标记引物或上述的检测试剂或检测试剂盒对模板进行荧光定量pcr扩增反应，根据pcr扩增结果对待测番茄进行基因分型。
9、进一步地，若基因型为aa，待测番茄为番茄斑萎病抗病品种；若基因型为gg，待测番茄为番茄斑萎病感病品种。
10、本专利技术还提供上述的kasp标记引物或上述的检测试剂或检测试剂盒在筛选或鉴定番茄斑萎病抗病品种中的应用。
11、本专利技术还提供上述的kasp标记引物或上述的检测试剂或检测试剂盒在改良番茄斑萎病抗性中的应用。
12、本专利技术还提供上述的kasp标记引物或上述的检测试剂或检测试剂盒在番茄分子标记辅助育种中的应用。
13、本专利技术公开了以下技术效果：
14、本专利技术设计的kasp标记引物可实现sldnaj番茄斑萎病抗病基因的精准、快速、高通量检测，操作步骤简单、检测高效，为番茄斑萎病抗病番茄种质资源的筛选、种质鉴定提供了简单、快捷、经济、有效的分子工具，可应用于番茄商业化抗病育种及高品质遗传改良应用研究，为番茄斑萎病抗病育种应用提供一种新选择。
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1.一种检测番茄斑萎病抗性的KASP标记引物，其特征在于，所述KASP标记引物包含KASP-1-F、KASP-2-F和KASP-R；所述KASP-1-F的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述KASP-2-F的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，所述KASP-R的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。
2.一种鉴定番茄斑萎病抗性的检测试剂或检测试剂盒，其特征在于，包含权利要求1所述的KASP标记引物。
3.如权利要求1所述的KASP标记引物在制备检测番茄斑萎病抗性的产品中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述产品包含检测试剂或检测试剂盒。
5.一种筛选或鉴定番茄斑萎病抗病品种的方法，其特征在于，包括如下步骤：
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，若基因型为AA，待测番茄为番茄斑萎病抗病品种；若基因型为GG，待测番茄为番茄斑萎病感病品种。
7.如权利要求1所述的KASP标记引物或权利要求2所述的检测试剂或检测试剂盒在筛选或鉴定番茄斑萎病抗病品种中的应用。
8.如权
9.如权利要求1所述的KASP标记引物或权利要求2所述的检测试剂或检测试剂盒在番茄分子标记辅助育种中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种检测番茄斑萎病抗性的kasp标记引物，其特征在于，所述kasp标记引物包含kasp-1-f、kasp-2-f和kasp-r；所述kasp-1-f的核苷酸序列如seq id no：1所示，所述kasp-2-f的核苷酸序列如seq id no：2所示，所述kasp-r的核苷酸序列如seq id no：3所示。
2.一种鉴定番茄斑萎病抗性的检测试剂或检测试剂盒，其特征在于，包含权利要求1所述的kasp标记引物。
3.如权利要求1所述的kasp标记引物在制备检测番茄斑萎病抗性的产品中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述产品包含检测试剂或检测试剂盒...
【专利技术属性】
技术研发人员：祁世明，鄂利峰，王勤礼，许耀照，陈修斌，
申请(专利权)人：河西学院，
类型：发明
国别省市：
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