松材线虫的玻璃化冷冻保存及解冻复苏方法技术

本发明专利技术公开了松材线虫(Bursaphelenchus?xylophilus)的玻璃化冷冻保存及解冻复苏方法，该方法包括以下步骤：(1)将松材线虫悬液与冷冻保护剂混合均匀得到混合物；将混合物进行平衡处理；(2)平衡处理后的混合物在液氮中冷冻保存；(3)解冻、复苏；其中，所述的冷冻保护剂是二甲基亚砜和卵黄。本发明专利技术对玻璃化冷冻保存方法中的各工艺参数进行了优化，筛选到了最适宜于松材线虫玻璃化冷冻保存的保护剂的种类、浓度以及包括预处理、平衡和解冻复苏在内的最适宜的处理方式。采用本发明专利技术方法冷冻保存松材线虫，冷冻后的松材线虫存活率高、冻后繁殖率高，能适用于松材线虫不同株系的冷冻保存。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)的冷冻保存方法,尤其涉及，属于松材线虫的冷冻保存领域。
技术介绍
松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)是松材线虫病的病原物,属于侧尾腺口纲，垫刃目，滑刃超科，滑刃科，伞滑刃线虫属。松树是中国的主要造林树种且其中许多种类是感病的，全中国一半以上省份的气候适合松材线虫病的发生，在中国大部分地区具备成灾和流行的基本条件，是中国林业和生态环境建设的心腹大患。松材线虫病又名松材线虫萎蔫病、松树萎蔫病、松树枯萎病，是松属树种的一种毁灭性的病害，因其危害严重且防治非常困难而被世界上许多国家列为检疫对象。松材线虫危害黑松(Pinus thunbergii)、赤 松(P. sylvestris)、马尾松(P. massoniana)和湿地松(P. elliottii)等多种松树，被称为松树的“癌症”。自发现松材线虫病以来，国内外就展开了大量研究，一直在不断地探索其防治措施。松材线虫的低温冷冻保存能够充分利用并收集各种来源的松材线虫，可为松材线虫的致病机理和生物防治技术的研究和应用提供大量实验材料本文档来自技高网...

【技术保护点】
松材线虫(Bursaphelenchus?xylophilus)的玻璃化冷冻保存及解冻复苏方法，包括以下步骤：(1)松材线虫悬液与冷冻保护剂混合均匀得到混合物；将混合物进行平衡处理；(2)平衡处理后的混合物在液氮中冷冻保存；(3)解冻、复苏；其中，所述的冷冻保护剂是二甲基亚砜和卵黄。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王曦茁，张永安，汪来发，朴春根，田国忠，林彩丽，李永，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所，
类型：发明
国别省市：