一种牛精液冷冻稀释液及其配制方法技术

本发明专利技术涉及牛冷冻精液生产技术领域，一种牛冻精稀释液，包括A液和B液，A液为每100ml稀释液中各原料的含量包括：柠檬酸三钠或柠檬酸钠2.5～3.4g,庆大霉素0.1～0.2g、环丙沙星0.03～0.1g、氨苄西林钠和链霉素各5～10万单位、果糖1～2g、卵黄10～15ml，余量为蒸馏水；其中B液为取自体积比84%～88%的A液作为基础液，再加入12～16ml的甘油或乙二醇构成。其配制方法主要包括步骤：称取各种原料及蒸馏水备用；基础液的配制；A液的配制；B液的配制。所述稀释液能有效降低牛精液冷冻后含菌数量，抗菌效果好，可大大提高牛冻精生产效率及冻精品质，其制备方法操作简单、经济实用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及牛冷冻精液生产
，尤其是一种牛冻精稀释液及其配制方法，属于生物

技术介绍
牛精液冷冻保存与人工受精技术的结合在现代养牛生产中发挥着极其重要的作用，应用冷冻精液进行人工受精可以不受时间、地域、牛品种及个体的限制，并且大量減少公牛的饲养数量，降低生产成本，提高优良种公牛的利用率，为养牛业带来巨大的经济效益。同时，牛精液冷冻技术的发展和牛冷冻精液的使用在牛品种引进、杂交改良，以及提高繁殖性能、疾病控制及牛遗传多祥性保护方面具有重要的意义。 精液冷冻稀释液是畜禽精液冷冻保存能否成功的前提条件，只有深入了解稀释液中各成分的用途与作用机理，才能使其发挥有效作用。稀释液的作用主要可以补充精子的营养，減少精液黏稠度，降低异物对精子的影响，同时缓和代谢产物的危害作用，另外还能够保护精子，增强其抵抗低温打击和搞氧化的能力，減少冷冻所造成的损伤。精液冷冻稀释液通常选用葡萄糖、柠檬酸钠、卵黄、甘油、抗生素等作为主要成分，但是，随着对牛精液冷冻保存技术研究的不断深入，如何能根据品种进行精液特殊的理化性质，将众多成分组合起来，按其合理的比例配制有效的精液冷冻稀释液，仍是今后牛精液冷冻保存工作中的ー个重要问题。虽然在牛精液冷冻方面已有ー套成熟的技木，还需进一步探索，使新的精液冷冻稀释液能进一步提闻解冻精子的质量，提闻解冻精液的受精能力。
技术实现思路
针对目前牛精液冷冻后含菌数较多、冻后活力较低、抗菌效果不太理想的缺陷，本专利技术的目的在于提供一种能够有效降低牛精液冷冻后含菌数量，抗菌效果好，可大大提高牛冻精生产效率及冻精品质的牛精液冷冻稀释液，另ー个专利技术目的在于提供操作简单、经济实用的该种牛精液冷冻稀释液的制备方法。本专利技术公开了ー种牛冻精稀释液，其特征在于所述牛冻精稀释液包括A液和B液，其中A液为每100ml稀释液中各原料的含量主要包括 柠檬酸三钠或柠檬酸钠2. 5 3. 4g,庆大霉素0. 1 0. 2g、环丙沙星0. 03 0. lg、氨苄西林钠和链霉素各5 10万単位、果糖1 2g、卵黄10 15ml，余量为蒸馏水； 其中B液为取自体积比84% 88%的A液作为基础液，在其中加入12 16ml的甘油或こニ醇构成。所述A液中每100ml稀释液中各原料的含量最佳值为 柠檬酸三钠或柠檬酸钠2. 9g、庆大霉素0. 16g、环丙沙星0. 04g、氨苄西林钠为8万单位、链霉素为5万単位、果糖1. lg、卵黄12ml，余量为蒸馏水。其中B液为最好是取自体积比85%的A液作为基础液，在其中加入15ml的甘油或こニ醇配制而成，即其中的主要原料含量最佳值包括朽1檬酸三钠或朽"檬酸钠2. 465g、庆大霉素0. 136g、环丙沙星0. 34g、氨节西林钠为6. 8万单位、链霉素为4. 25万单位、果糖0. 935g、卵黄10. 2ml、甘油或こニ醇为15ml,余量为蒸馏水。 所述的牛冻精稀释液的配制方法，其特征在于包括以下步骤 (1)称取各种原料朽1檬酸三钠或朽"檬酸钠2.5 3. 4g,庆大霉素0. 1 0. 2g、环丙沙星0. 03 0. lg、氨节西林钠和链霉素各5 10万单位、果糖1 2g、卵黄10 15ml,甘油或こニ醇为12 16ml及蒸馏水备用； (2)每100ml蒸馏水用2.5 3. 4g的柠檬酸三钠或柠檬酸钠配制成溶液为基础液，配制时溶解定容消毒、过滤； (3)A液的配制在上述基础液中加入庆大霉素0.1 0. 2g、环丙沙星0. 03 0. lg、氨节西林钠和链霉素各5 10万单位、果糖1 2g、卵黄10 15ml配制而成； (4)B液的配制以上述备用的取自体积比84% 88%的A液作为基础液，加入甘油或こニ醇12 16ml配制而成； 上述(3) (4)步骤所获得的A液和B液为所要得到的牛冻精稀释液。上述牛冻精稀释液在实际操作使用当中，使用的是二次稀释法，即鲜精接入后先置于一定温度的水浴锅内，经过记录、计算得出所需添加稀释A、B液的量后，首先添加等温的A液，然后直接置于常温(22-25°C )水浴中降温30-60min后，添加B液，最后连同水浴(22-25°C)放入4°C低温操作柜内降温平衡4小时，封装打印。附图1为利用传统牛冻精稀释液与利用本专利技术所提供的牛冻精稀释液所做的实验对比数据，表中所示利用改进前传统的稀释液所做实验组为i，利用改进后本专利技术所提供的稀释液所做实验组ii。国标中冻后活力> 0. 35或35%,菌落数< 800个/剂。通过改进前后两种稀释液的配方对比，新配方中将柠檬酸三钠或柠檬酸钠溶液，先溶解定容后过滤消毒，真正起到过滤残渣消毒的作用。经过上述实验证明，庆大霉素、环丙沙星、氨苄西林钠和链霉素四种抗生素的含量小可控制细菌菌落，对精液活力没有影响。由于卵黄不仅具有对精子在受到降温和冷刺激时能起到较好的保护作用，同时配合抗冻剂甘油对于精子在冷冻中有更好的保护作用。我们发现，本专利技术所提供的稀释液配制过程有利于精液冷冻保存，其优势在于方便、快捷、抗菌效果好、冻后活力高、菌落数均达标。稀释液作为冷冻精液的保护机制，不仅为精液提供能量，也对精子有着保护的作用。它的成分有糖类、卵黄、抗冻剂、缓冲剂、抗菌素及非电解质。其中糖类和抗冻剂尤为重要。在冻精生产流程中，二次稀释时，糖类和抗冻剂是包含在稀释B液中的。糖类具有补充精子的能量消耗，对精子在低温情况下有保护的作用。抗冻剂的作用当精液冷冻时，主要受到危害是冰晶从精子细胞原生质中抽去水，使精子细胞造成脱水状态，发生不可逆的变化死亡，而甘油可減少和降低这种冷冻对精细胞带来的危害。然而，甘油浓度发生变化，会引起精液滲透压的变化，影响精液冷冻后活力和顶体完整率，添加较高的甘油对精子的主要损害时甘油使稀释液中滲透压明显升高，这种高滲透压对精子的顶体有损害作用，这就需要把甘油含量掌握在一个可控的范围内，当每lOOmlB液中甘油的含量达到12 16ml时，冷冻效果最佳。与现有技术相比，本专利技术的优点利用本专利技术所提供的牛冻精稀释液进行牛精液的冷冻保存，获得了良好的效果，解冻后精子的存活率有效提高，增加年产精液量，并且显著提高了精液品质，本专利技术所提供的稀释液配制过程有利于精液冷冻保存，其优势在于方便、快捷、抗菌效果好、冻后活力高、菌落数均达标。附图说明图1为利用传统牛冻精稀释液与利用本专利技术所提供的牛冻精稀释液所做的实验对比数据表格。具体实施方式 实施例1 : 一种牛冻精稀释液，所述牛冻精稀释液包括A液和B液，其中A液为每100ml稀释液中各原料的含量主要包括 柠檬酸三钠2. 9g、庆大霉素0. 16g、环丙沙星0. 04g、氨苄西林钠为8万单位、链霉素为5万単位、果糖1. lg、卵黄12ml，余量为蒸馏水。其中B液为取自体积比85%的A液作为基础液，在其中加入15ml的甘油配制而成，即其中的主要原料含量包括 朽1檬酸三钠或朽"檬酸钠2. 465g、庆大霉素0. 136g、环丙沙星0. 34g、氨节西林钠为6. 8万単位、链霉素为4. 25万単位、果糖0. 935g、卵黄10. 2ml、甘油15ml，余量为蒸馏水。所述的牛冻精稀释液的配制方法，其特征在于包括以下步骤 (1)称取各种原料柠檬酸三钠2.9g、庆大霉素0. 16g本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种牛冻精稀释液，其特征在于所述牛冻精稀释液包括A液和B液，其中A液为每100ml稀释液中各原料的含量主要包括：柠檬酸三钠或柠檬酸钠2.5～3.4g,庆大霉素0.1～0.2g、环丙沙星0.03～0.1g、氨苄西林钠和链霉素各5～10万单位、果糖1～2g、卵黄10～15ml，余量为蒸馏水；其中B液为取自体积比84%～88%的?A液作为基础液，在其中加入12～16ml的甘油或乙二醇构成。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：朱兵山，丁娟，
申请(专利权)人：新疆天山畜牧生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：