分离高纯度细胞群体的生理学方法技术

本公开提供用于分离源自干细胞的纯的或富集的分化细胞群体的方法，包括分化干细胞群体；和迁移分化细胞通过分化设备中的多孔膜，以分离纯的或富集的分化细胞群体。本公开也提供用于分离源自干细胞的纯的或富集的分化细胞群的分化设备，设备包含多孔膜；和胞外基质。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】分离高纯度细胞群体的生理学方法
本公开总体上涉及干细胞的领域，并且更具体地涉及分离源自干细胞的纯的或富集的分化细胞群体的方法和设备。
技术介绍
人多能干细胞，包括人胚胎干细胞(hESC)、人孤雌生殖干细胞(hpSC)和人诱导多能干细胞(hiPSC)能够无限复制并且分化成所有3个胚层：内胚层、中胚层和外胚层的衍生物。因此，人多能干细胞的分化能力具有很大的希望用于治疗性应用。高纯度治疗性细胞的衍生是再生医学的一个主要目标。hESC源自早期胚胎的胚细胞的内细胞团。相比之下，hpSC和hiPSC二者避免该伦理考虑。第一策划产生的hpSC源自由化学刺激物活化的未受精卵母细胞的胚泡的内细胞团。hpSC，像hESC经历广泛的自我更新并且具有体外和体内的多能分化能力。通过诱导特定基因的“强迫”表达，hiPSC人工源自非多能细胞，典型地成体体细胞。hpSC的产生克服了与hESC相关的伦理障碍，因为hpSC的衍生起源于未受精的卵母细胞。iPSC首先于2006年从小鼠细胞并且于2007年从人细胞中产生。除了伦理考虑，hiPSC也避免植入物抗宿主疾病和免疫排斥问题，因为不像hESCs，它们全部源自患者。多能本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.04.20 US 61/326,084;2010.05.18 US 61/345,9491.在分化设备中分离源自多能细胞的纯的或富集的分化细胞群体的体外方法，所述方法包括使用激活素A信号和Wnt3a信号分化多能细胞，从而使所述多能细胞经历上皮-至-间充质转换(EMT)以产生具有间充质表型的细胞；允许具有所述间充质表型的细胞迁移通过具有接种有多能细胞的上侧的多孔膜并且进入包括三维胞外基质(ECM)的下侧；和使用激活素A信号和Wnt3a信号允许所述三维ECM中的迁移的细胞分化成高纯度定形内胚层(DE)，以及其中所述高纯度DE以大于90％的纯度分离，其中所述多能细胞不是源自人胚胎，其中所述激活素A和Wnt3a信号模拟细胞在原条内移期间接收的TGF-β和Wnt信号，并且其中所述多孔膜具有从5微米至12微米的任何大小的孔。2.权利要求1所述的方法，其中细胞迁移包含趋化性迁移或通过所述分化设备的结构性能或组件布置而诱导的迁移。3.权利要求1所述的方法，其中所述DE用于治疗或研究目的。4.权利要求3所述的方法，其中所述治疗用途包括糖尿病、视网膜病、心脏病或肝脏疾病治疗。5.权利要求1所述的方法，其中多能细胞选自胚胎干细胞系、诱导多能干细胞、分离自器官和组织的成体干细胞、分离自脐带血的干细胞、分离自毛囊的干细胞、间充质干细胞，神经元干细胞和癌干细胞。6.权利要求1所述的方法，其中所述多能细胞是哺乳动物多能细胞。7.权利要求1所述的方法，其中所述多孔膜包括任一高表面积支架，所述高表面积支架包括由下述组成的一种或多种多孔二维或三维膜或海绵体：聚碳酸酯、聚乙烯、聚四氟乙烯或碳酸钙。8.权利要求1所述的方法，其中所述多孔膜包括接种有多能细胞的上侧和下侧，所述下侧包括胞外基质，所述胞外基质包括人或非人胶原、层粘连蛋白、纤连蛋白、弹性蛋白、包含硫酸肝素的蛋白聚糖、硫酸软骨素、硫酸角质素、包含透明质酸的非蛋白聚糖多糖。9.权利要求1所述的方法，其中所述多孔膜包括接种有多能细胞的上侧，其包括纤维结构；海绵体；网状结构；生长因子的分子，所述生长因子的分子包括TGF家族蛋白、激活素A、各种FGF、各种BMP、HGF、KGF、OSM；或各种类型的粘附活细胞，所述粘附活细胞以二维或三维模式或其组合布置在所述多孔膜上。10.权利要求9所述的方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：N·托洛维茨，A·赛麦金，L·阿加波娃，J·杰尼斯，
申请(专利权)人：国际干细胞公司，
类型：
国别省市：