一种评价防治骨质疏松药物作用的新方法技术

本发明专利技术公开了一种模式生物斑马鱼评价防治骨质疏松药物作用效果的新方法，该方法通过选用斑马鱼作为模型动物，通过优化的实验分组方法进行实验分组设计，采用优选的药物给药方式进行给药，采用优选的方法对斑马鱼骨骼进行茜素红染色，采用直观的显微观察捕捉图像，并采用优选的图像分析软件分析骨骼染色区域以反应骨矿化量，整个实验方法可操作性强，能客观的反应药物在斑马鱼体内对骨量生成的影响，能快速、准确评价化合物及复杂中药成分防治骨质疏松的作用。能克服一般体外细胞实验难条件苛刻，难以体现在体效应综合结果的缺点，并克服哺乳动物体内实验耗时长，受试药量大、劳动强度高等缺点。该方法实验结果准确度高，且实验方法可重复性强，所需受试药物量少，成本低，劳动强度低，应用范围广泛，且可成批量进行实验研究，工作效率高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种模式生物评价防治骨质疏松药物作用效果的新方法，具体涉及一种用模式生物斑马鱼评价防治骨质疏松药物作用效果的新方法。
技术介绍
活性筛选一直是药物发现的关键环节，也是中药物质基础、作用机理、质量控制、 炮制机理、配伍规律等关键领域的不可或缺手段，活性筛选新模型、新方法的研究是中药研究的重要组成部分。骨质疏松症是一种以骨量减少、骨组织显微结构异常和骨折危险性增加为特征的一类疾病，由于西药长期应用副作用大等缺陷，中药治疗骨质疏松的功效正日益受到重视。 但壮骨中药及其成分特别是微量成分的活性评价却不能高效进行，主要存在2个瓶颈问题一是评价模型问题现有动物壮骨模型耗时长，用样量大，劳动强度大，使得活性筛选效率低；现有细胞模型成本高，试验条件要求较高，原代培养难度增加，一般的实验室不能进行，此外，体外细胞模型作用环节相对单一，不能体现在体试验的综合效果；二是化合物的数量问题由于中药成分复杂，很难分离到能满足体内研究的足量化合物，大量的微量成分只能通过细胞模型进行筛选。可见，现有模型难以实现对中药及其成分壮骨活性的高效、 灵敏、高通量的筛选。模式生物是指在人们研究生命现象过程中长本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于评价防治骨质疏松药物作用效果的新方法，利用茜素红可特异性地与钙离子螯合从而使矿化的骨基质染成红色的特性，其特征在于运用模式生物斑马鱼为评价模型，在给予斑马鱼幼鱼防治骨质疏松药物后，通过对其骨骼进行茜素红染色后的图像进行采集和分析，计算出染色区域的面积和累积光密度，即反映骨矿化量和骨密度的数据，以此作为对药物作用效果的评价指标；具体包括以下步骤：步骤一：斑马鱼受精卵的收集：控制斑马鱼成鱼日夜节律，昼夜时间控制在14?12小时：10?12小时，收集受精卵，置于培养皿中，加入培养基，于26°C?30°C恒温培养箱中培养；步骤二：给药方案：取受精后3天斑马鱼胚胎放入盛有胚胎培养基的培养板中，根...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：韦英杰，贾晓斌，王长梅，蔡雪婷，詹扬，孙娥，舒娈，宋捷，
申请(专利权)人：江苏省中医药研究院，
类型：发明
国别省市：