利用甘薯愈伤组织繁殖培养和保存植物寄生线虫的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用甘薯愈伤组织繁殖培养和保存植物寄生线虫的方法。本发明专利技术通过以下步骤实现：新鲜甘薯经洗净、表面消毒、削皮和切片放入培养皿后在培养箱中培养获得甘薯愈伤组织；取经消毒处理的植物寄生线虫接种到甘薯愈伤组织上；分别放在各自适宜温度的培养箱中黑暗培养繁殖；培养一段时间后，将植物寄生线虫连同甘薯愈伤组织于4～20℃保存。本发明专利技术方法可实现即简单、大量人工培养繁殖植物寄生线虫，又能长期保存植物寄生线虫资源的目的。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及植物寄生线虫的繁殖培养和保存方法，具体涉及一种。
技术介绍
对于植物寄生线虫，要研究其系统分类、分子生物学、功能基因组学以及蛋白质组学等基础研究，或者在实验室和田间进行生物学、病理学以及防治方法等基础和应用研究，都需要大量、纯化的线虫。 然而，植物寄生线虫大多都是专性寄生的，很难在纯培养基上培养，只能在相应的寄生植物上繁殖。在实际中，人们往往利用植物组织培养技术在White(1963)、Krusberg (1961)和Gamborg’ s B5等植物组织培养基或I %水琼脂培养基上，培养新鲜的植物愈伤组织、离体根或其他一些植物器官及整株植物幼苗，然后在这些植物材料上接种培养繁殖植物寄生线虫；兼食真菌的植物线虫，也可以用某些种类的真菌菌丝来培养(冯志新，2001)。不同类型线虫的培养所采用的具体方法取决于其生物学特性。腐烂莖线虫(Ditylenchus destructor)、起绒草莖线虫(D. dipsaci)和香蕉穿孔线虫(Radopholus similis)都是迁移性内寄生线虫，严重为害多种作物，均被我国列为检疫性植物有害生物。对腐烂茎线虫和起绒草茎线虫，目前可本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用甘薯愈伤组织繁殖培养和保存植物寄生线虫的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）甘薯愈伤组织的制备：将新鲜健康的甘薯洗净晾干，用酒精浸泡后，灼烧，至表皮变暗，削去表皮，切成甘薯片，放入灭菌培养皿中，封口，于22～28℃暗培养至长出甘薯愈伤组织；（2）植物寄生线虫的消毒和接种：挑取或吸取植物寄生线虫，消毒，然后离心，去除上清，将沉淀的线虫用无菌水混匀继续离心，去除上清，最后将沉淀的线虫用无菌水稀释分散滴在甘薯愈伤组织上，封口；（3）植物寄生线虫的繁殖培养：将步骤（2）中接种了植物寄生线虫的甘薯愈伤组织进行暗培养繁殖，培养温度为植物寄生线虫繁殖的适宜温度；（4）植物寄生线虫的保存：将植物寄生线...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：谢辉，徐春玲，李宇，丁莎，李克梅，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：