用于制定大肠菌群定量曲线的标准样本的制备方法，该定量曲线的制作方法及其应用技术

本发明专利技术涉及用于制定大肠菌群定量曲线的标准样本的制备方法，该定量曲线的制作方法及其应用。首先取与待测的液体样本为同种产品的不含大肠菌群的样本，并调节pH值，制成无菌样本；再向无菌样本中加入大肠菌群标准菌株，并调节pH值，制得富菌样本，用无菌样本将富菌样本进行十倍递减稀释，制得标准样本。将标准样本进行培养，检测其pH值达到某一阈值时的检出时间。同时用平板法检测标准样本中的大肠菌群数。根据检出时间和平板法检测结果绘制大肠菌群定量曲线。取液体样本并调节pH值，制成待检测液，并用上述方法得到检出时间，再对照定量曲线得到液体样本的大肠菌群数。由于本方法平衡了样本之间的背景值，因此提高了检测的准确性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及用于制定定量曲线的标准样本的制备方法，该定量曲线的制作方法及其应用，特别适用于 液体样本中大肠菌群的定量检测。
技术介绍
常规的大肠菌群计数方法主要包括大肠菌群Petrifilm 测试片法、国标GB4789. 3-2010《中华人民共和国国家标准食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》中提到的MPN计数法和平板计数法。这些检测方法耗时较长，工作量大，不利于大肠菌群的快速检测。目前，开发出许多利用大肠菌群生长过程中酸碱度变化快速检测大肠菌群含量的检测方法。如实时光电微生物快速检测系统，通过向培养中的样本加入酸碱指示剂、并利用比色法监测其PH值的变化，当pH值达到某一阈值时记录检出时间，由检出时间对照定量曲线判断样品中大肠菌群含量。实时光电微生物快速检测系统易操作且耗时较短，仅需6-10小时就可得出检测结果，其中，定量曲线的制作是准确定量的关键所在。定量曲线制作过程中用到标准样本，用目前的方法制备的标准样本都存在样本背景不一致的问题，影响定量曲线的准确性，在最终用于大肠菌群含量的检测时造成不必要的误差。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供用于制定大肠菌群定量曲线的标准本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于制定大肠菌群定量曲线的标准样本的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：　　取不含大肠菌群的样本，调节pH至6.7±0.2，制成无菌样本；　　向每毫升所述无菌样本中加入≥104CFU且≤1010CFU的活化的大肠菌群标准菌株，并调节pH至6.7±0.2，获得富菌样本；和　　将所述富菌样本用所述无菌样本进行十倍递减稀释，待稀释后的所述富菌样本的理论大肠菌群浓度值≤10CFU/毫升时，停止所述稀释，制成所述富菌样本的十倍递减系列稀释液，即为标准样本。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘晓川，薛志清，杜丽，喻东威，赵源，刘志楠，李梅，刘卫星，
申请(专利权)人：内蒙古蒙牛乳业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：