本发明专利技术公开了一种应用膜分离和全二维气相色谱-飞行时间质谱快速检测中药中农药多残留的方法。中药样品中的农药残留用乙腈提取，无机氧化铝膜超滤分离，固相分散萃取净化，全二维气相色谱-飞行时间质谱检测。全二维气相色谱采用两支极性不同的色谱柱对中药基质中的基质和待测组分的进行正交分离，并在调制解调器的作用下进入飞行时间质谱完成定性定量检测，外标法定量。本发明专利技术方法具有快速、简便，灵敏度高、分离效果好，节省试剂、定性定量准确可靠等特点，解决了复杂基质如中药中农药残留的分离及同时定性和定量的难题。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于食品安全
，涉及一种。
技术介绍
我国是中药种植、使用及出口大国，其药用功效越来越得到国内外消费者的认可。近年来由于种植不当、环境污染或利益驱动，人工种植中药不断出现农药残留污染问题，成为影响药物疗效和安全性的重要因素，对人类和环境造成的危害也是不容忽视的，近年来国内外对中药农药残留的关注度呈上升趋势，目前欧美、日本、韩国等国家都对中药中的农药残留制定了严格的限量标准，对我国中药出口造成技术壁垒。因此建立快速准确的中药中农药残留的检测方法是很有必要的。现在中药中的农药残留的检测主要有气相色谱法、液相色谱法以及气相色谱-质谱法，液相色谱-质谱法，气相色谱-串联质谱和液相色谱-串联质谱法，气相色谱法和液相色谱法主要依赖色谱分离，针对复杂基质如各种中药，在农药的定性上存在一定难度，基质中的干扰峰与待测农药不能有效分离，干扰结果的准确性，甚至造成假阳性。气相色谱-质谱法和液相色谱-质谱法主要利用低分辨质谱检测器，由于受到扫描速度的限制，在农药多残留的分析上灵敏度会不理想，气相色谱-串联质谱法和液相色谱-串联质谱法在 农药多残留的定量分析上具有较高的灵敏度，适合分析目标化合物；在对复杂基质的分离和未知物的筛选及定性定量上，近年来发展较快的二维气相色谱-飞行时间质谱(TOFMS)技术具有优势，气相色谱采用两支极性不同的色谱柱，当样品经过第一支非极性柱时，待测组分按分子大小进行分离，在一维色谱柱上未分开的组分在调制解调器的作用后进入第二支极性色谱柱，一维相同保留时间的组分在第二支色谱柱上按极性再次分离，实现了样品组分的正交分离，强度在三维谱图上显示，得到三维谱图。TOFMS可提供非常高的采集频率，这使得在GCXGC上重叠峰得以分辨，并自动解析。该方法具有较高的分辨率、灵敏度，提高了农药在定性和定量上的准确性和可靠性，解决了复杂基质如中药的分离及同时定性和定量的难题。目前国内涉及中药中农药残留的检测标准很少，2010年修订颁布的新版《中华人民共和国药典》中涉及了中药中二十多种农药的检测方法，多为气相色谱法，国标gb /t23200-2008桑枝、金银花、枸杞子和荷叶中488种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法，gb / t 23201-2008桑枝、金银花、枸杞子和荷叶中413种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱-串联质谱法涉及了多残留农药的检测，但方法仅适用于基质比较简单的桑枝、金银花、枸杞子和荷叶四种中药，而应用二维气相色谱-飞行时间质谱检测中药中的多残留农药还研究很少。中药中农残前处理方法主要有溶剂提取、加速溶剂萃取、液液分配、固相微萃取等，这些方法存在耗时长、试剂消耗量大、待测物回收不稳定、易分解、固相微萃取造价高等问题。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术的目的在于设计提供一种快速、简便，灵敏度高、分离效果好，有效减少来自复杂的中药基质干扰的。为了解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案是一种，包括以下步骤I)中药样品中农药残留的乙腈提取；2)氧化铝无机膜的超滤分离；3)样品提取溶液的固相分散萃取净化； 4)使用二维气相色谱-飞行时间质谱检测；5)结果分析。具体地说，包括以下步骤I)中药样品中农药残留的乙腈提取称取I 2g中药粉末样品，加入2 4mL蒸馏水使中药润湿，加入IOmL乙腈，剧烈震摇，得到由中药基质、水、乙腈组成的混合匀浆溶液，在上述匀浆溶液中加入Ig氯化钠固体，再剧烈震摇，然后进行离心操作，静置分层，取出上清液，离心管中再加IOmL乙腈，重复提取一次，合并2次提取液；2)氧化铝无机膜的超滤分离氧化铝无机膜膜厚O. 02 O. 2um,固定于溶液过滤接收装置上，加样前先用乙腈润湿，真空抽滤，弃去接收器中的乙腈，加入提取液，真空抽滤至膜面近干，再加入IOmL乙睛抽滤洗膜，接收液转入旋转蒸馏瓶中旋转蒸发近干，加入ImL丙酮于蒸馏瓶中溶解待测样品；3)样品提取溶液的固相分散萃取净化在2mL离心管中分别加入150 300mg无水硫酸镁,50 IOOmgN-丙基-乙二胺，100 200mg石墨碳黑，再加入ImL待测物丙酮溶解液，再进行震荡离心取上清液，上清液过O. 22um有机滤膜，即得到样品溶液；4)用二维气相色谱-飞行时间质谱检测c)标准溶液的制备分别准确称取标准品农药，用甲苯或甲苯-丙酮混合液溶解并配成lmg/mL的储备液，使用时再根据各农药的响应，用乙睛稀释成标准工作液；d)使用二维气相色谱-飞行时间质谱仪检测标准溶液和样品溶液由自动进样器分别吸取标准工作液和样品溶液，注入二维气相色谱-飞行时间质谱仪中，样品溶液中农药组分和部分中药基质经一维色谱柱分离后，经双喷口 4通道调制解调器加热冷却后进入二维气相色谱柱再分离，飞行时间质谱全扫描检测；5)结果分析软件Leco ChromaTOF-GC V 4. 32用于数据处理，当样品在EI电离源70V电压的条件下电离时，其质谱图与NIST/PEST He谱库相比对，当相似度大于设定值，该物质被自动识别完成定性，定量离子是软件根据碎片离子的最大丰度自动选定；以标准工作液的质量浓度X为横坐标，定量离子的峰面积Y为纵坐标，绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行单离子外标法定量；用标准曲线和定量离子一维和二维保留时间设定定量处理方法，当样品中的定量离子的信噪比大于设定值，一维保留时间偏差在6 10ms，二维保留时间偏差在O. I O. 5ms内，样品被设定的定量处理方法自动定量。所述步骤2)氧化铝无机膜在使用前要用8mL乙腈润湿。所述步骤3)在漩涡震荡器上震摇O. 5 2min，然后在离心机8000 12000rpm下离心4 6min。 所述的步骤4)中标准品农药为敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、五氯苯、灭线磷、氧化乐果、四氯硝基苯、氟乐灵、久效磷、硫线磷、甲拌磷、A-666、六氯苯、乐果、莠去津、B-666、五氯硝基苯、特丁硫磷、C-666、二嗪磷、地虫硫磷、卩密霉胺、氟虫脲、乙拌磷、D-666、百菌清、异稻温净、五氯苯胺、乙草胺、敌稗、甲基毒死蜱、甲基对硫磷、甲草胺、七氯、扑草净、炔螨特代谢物、甲基嘧啶磷、杀螟硫磷、马拉硫磷、五氯硝基苯代谢物、异丙甲草胺、毒死蜱、禾草丹、倍硫磷、4，4_ 二氯苯酚、对硫磷、艾氏剂、毒虫畏、嘧菌环胺、二甲戊乐灵、氟虫睛、环氧七氯、喹硫磷、三唑醇I、腐霉利、pp-DDD、三唑醇2、杀扑磷、噻嗪酮、氯丹、苯线磷、pp-DDE、A-硫丹、丙硫磷、稻痕灵、丙溴磷、op-DDE、异狄氏剂、氟娃唑、睛菌唑、环氟菌胺、狄氏剂、虫螨睛、虫螨磷、乙酯杀螨醇、B-硫丹、乙硫磷、PP-DDT、三唑磷、丙环唑、硫丹硫酸盐、甲氧滴滴涕、炔螨特、增效醚、戊唑醇、联苯菊酯、溴螨酯、亚胺硫磷、甲氰菊酯、伏杀硫磷、三氟氯氰菊酯、保棉磷、氯菊酯、蝇毒磷、氟氯氰菊酯、苯醚菊酯、氯氰菊酯、氟氰戊菊酯、丙炔氟草胺、氰戊菊酯、氟胺氰菊酯、烯酰吗啉、苯醚甲环唑、溴氰菊酯共103种。所述的步骤4)中二维气相色谱条件一维柱为非极性柱30mX O. 25mmX O. 25um+5mX O. 25mm>5%diphenyl/95%dimethylpolysiloxane ；二维柱为中极性柱 Rtx_200 2. OmXO. 18m本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种应用膜分离和全二维气相色谱？飞行时间质谱快速检测中药中农药多残留的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）中药样品中农药残留的乙腈提取；2）氧化铝无机膜的超滤分离；3）样品提取溶液的固相分散萃取净化；4）使用二维气相色谱？飞行时间质谱检测；5）结果分析。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王云凤，高健会，刘旸，
申请(专利权)人：天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心，
类型：发明
国别省市：
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