一种从当归中制备高纯度阿魏酸的方法技术

本发明专利技术涉及一种从当归中制备高纯度阿魏酸的方法。本发明专利技术的目的是针对现行的收率较低，成本较高，市场竞争力弱进行改进，其特征在于包括如下操作步骤：a）阿魏酸的粗提：以当归为原料，用NaOH溶液进行提取；b）大孔型阴离子交换树脂吸附分离：采用湿法装柱，然后用盐酸溶液进行洗脱；c）大孔吸附树脂吸附分离：采用湿法装柱，上柱饱和后先用低浓度的甲醇进行除杂，然后用较高浓度的甲醇溶液进行洗脱；d）中压C18键合硅胶（ODS）柱层析纯化：湿法上样，以甲醇-水-冰醋酸为洗脱剂进行等梯度洗脱，回收溶剂，干燥得阿魏酸样品。经HPLC检测，阿魏酸样品的纯度可以到达98%以上。该工艺生产成本低，适合工业化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。
技术介绍
当归(学名Angelica sinensis),多年生草本植物，伞形科植物当归Angelicasinensis (Oliv.) Diels的干燥根。在中国分布于甘肃、云南、四川、青海、陕西、湖南、湖北、贵州等地，各地均有栽培。当归的根可入药，是最常用的中药之一。阿魏酸是一种有机酸，分子式为CltlHltlO4,平均分子量为194. 19,化学名称为3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-丙烯酸。由于阿魏酸中含有碳-碳双键，故阿魏酸有顺反异 构体，其中顺式为黄色油状液体，反式为正方形结晶或纤维结晶，溶点为174°C，微溶于水，可溶于热水，乙醇和乙酸乙酯，微溶于乙醚，难溶于苯和石油醚。阿魏酸(Ferulic acid)是当归(Angelica sinensis)中的一种有效成分。研究表明，阿魏酸是当归的主要药效成分之一，具有抗动脉粥样硬化，抗血小板凝集和血栓，清除氧自由基，解除血管平滑肌痉挛以及抗炎、镇痛、调节免疫功能、保肝利胆等药理作用，可用于治疗血栓闭塞性静脉炎和急性脑血栓等。目前，提取分离阿魏酸的方法有高速逆流萃取、微波辅助提取、超声波辅助提取、大孔吸附树脂吸附、超临界CO2萃取等方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现行的收率较低，成本较高，市场竞争力弱的制备方法进行改进，建立一条具有工业化可操作性的从当归中制备高纯度阿魏酸的方法。本专利技术的目的是这样实现的，其特征在于包括以下步骤a、阿魏酸的粗提用NaOH溶液于50 60°C搅拌浸提当归，过滤，收集滤液，残渣按上述步骤再提取两遍，过滤，收集滤液，合并前2次滤液，最后I遍滤液用作为下一批当归的提取溶剂；b、大孔型阴离子交换树脂吸附分离大孔型阴离子交换树脂经过预处理后，采用湿法装柱，上步骤的提取滤液以一定的上样速度上柱吸附，用HPLC跟踪检测流出液的浓度，直至树脂达到饱和，停止上样；吸附饱和的树脂先用反渗透水进行冲洗除杂，然后用盐酸溶液进行洗脱，HPLC跟踪检测流出液的浓度，直至洗脱完全；收集洗脱液，调节洗脱液的pH 2 3，待上大孔吸附树脂柱；C、大孔吸附树脂吸附分离大孔吸附树脂经过预处理后，采用湿法装柱；将上述大孔型阴离子交换树脂洗脱液以一定的上样速度上柱吸附，用HPLC跟踪检测流出液的浓度，直至树脂达到饱和，停止上样；吸附饱和的树脂先用低浓度的甲醇进行除杂；然后用较高浓度的甲醇溶液进行洗脱，HPLC跟踪检测流出液的浓度，直至洗脱完全；收集洗脱液，真空浓缩回收甲醇，干燥得阿魏酸粗品I ;阿魏酸粗品I待采用C18键合硅胶柱进一步纯化；d、中压C18键合硅胶ODS柱层析纯化将C18键合硅胶湿法装柱，用加压装置进行压缩，并用流动相平衡层析柱；将上述的阿魏酸粗品I用流动相进行溶解，湿法上样；用甲醇-水-冰醋酸为洗脱剂进行等梯度洗脱，紫外检测器在线监测，分步收集色谱峰对应流出液，HPLC检测流出液，合并具有相同成份的流出液，回收溶剂，干燥得阿魏酸样品II ;经HPLC检测，阿魏酸样品II的纯度可以到达98%以上。本专利技术，其特征在于包括以下步骤a、阿魏酸的粗提用NaOH溶液于50 60°C搅拌浸提当归，过滤，收集滤液，残渣按上述步骤再提取两遍，过滤，收集滤 液，合并前2次滤液，最后I遍滤液用作为下一批当归的提取溶剂；b、大孔型阴离子交换树脂吸附分离大孔型阴离子交换树脂经过预处理后，采用湿法装柱，上步骤的提取滤液以一定的上样速度上柱吸附，用HPLC跟踪检测流出液的浓度，直至树脂达到饱和，停止上样；吸附饱和的树脂先用反渗透水进行冲洗除杂，然后用盐酸溶液进行洗脱，HPLC跟踪检测流出液的浓度，直至洗脱完全；收集洗脱液，调节洗脱液的pH 2 3，待上大孔吸附树脂柱；C、大孔吸附树脂吸附分离大孔吸附树脂经过预处理后，采用湿法装柱；将上述大孔型阴离子交换树脂洗脱液以一定的上样速度上柱吸附，用HPLC跟踪检测流出液的浓度，直至树脂达到饱和，停止上样；吸附饱和的树脂先用低浓度的甲醇进行除杂；然后用较高浓度的甲醇溶液进行洗脱，HPLC跟踪检测流出液的浓度，直至洗脱完全；收集洗脱液，真空浓缩回收甲醇，干燥得阿魏酸粗品I ;阿魏酸粗品I待采用C18键合硅胶柱进一步纯化；d、中压C18键合硅胶ODS柱层析纯化将C18键合硅胶湿法装柱，用加压装置进行压缩，并用流动相平衡层析柱；将上述的阿魏酸粗品I用流动相进行溶解，湿法上样；用甲醇-水-冰醋酸为洗脱剂进行等梯度洗脱，紫外检测器在线监测，分步收集色谱峰对应流出液，HPLC检测流出液，合并具有相同成份的流出液，回收溶剂，干燥得阿魏酸样品II ;经HPLC检测，阿魏酸样品II的纯度可以到达98%以上。步骤a中所述的当归应粉碎至20 40目；NaOH浓度为O. 5% 5% (m/m),提取的温度为50 60°C，提取时间为2 4 h，料液比为1:6 1:10。步骤b中所述的大孔型阴离子交换树脂为D201或D202，采用氯化钠和酸碱预处理；树脂采用湿法装柱，树脂柱的的径高比为1:6 1:10 ;步骤b中所述的上样吸附时的流速2 4 BV/h，用HPLC跟踪检测流出液的浓度；当流出液的浓度为上样浓度的O 4%时，该树脂即达到饱和，并且停止上样；步骤b中所述的除杂步骤用反渗透水进行冲洗，流速为4 BV/h，用量为I 3 BV ；步骤b中所述的洗脱步骤用3% 7%的盐酸溶液进行洗脱，洗脱的速度为2 4BV/h，洗脱体积为3 5 BV ;HPLC跟踪检测流出液的浓度，直至洗脱完全；步骤b中所述的洗脱液的pH值用盐酸或氢氧化钠溶液调节至pH=2 3。步骤c中所述的大孔吸附树脂为HPD-450、AB_8、弱极性或中等极性树脂，采用95%乙醇预处理；树脂采用湿法装柱，树脂柱的的径高比为1:5 1:9 ;步骤c中所述的上样吸附时的流速2 4 BV/h,用HPLC跟踪检测流出液的浓度；当流出液的浓度为上样浓度的O 4%时，该树脂即达到饱和，并且停止上样；步骤c中所述的除杂步骤用15% 35% (v/v)的甲醇进行除杂，流速为4 BV/h,用量为I 3 BV ;步骤c中所述的洗脱步骤用50% 80%(v/v)甲醇溶液进行洗脱，洗脱速度为2 4 BV/h，洗脱体积为3 5 BV5HPLC跟踪检测流出液的浓度，直至洗脱完全。步骤d中所述的中压C18键合硅胶柱层析装柱方法为称取适量的C18键合硅胶用初始流动相进行浸泡，并且搅拌，待C18键合硅胶中没有气泡时，湿法装入动态轴向不锈钢中压层析柱中；然后用加压装置进行压缩，使压缩后的C18键合硅胶柱在正常流速下的工作压力为5 20 bar,并用流动相平衡层析柱；步骤d中所述的上样量为I 3 g样品/50 g C18键合硅胶，用流动相溶解，湿法上样；步骤d中所述的洗脱剂采用甲醇水冰醋酸为30:68. 5:1. 5 (v/v)；本专利技术采用当归为原料，通过碱水提取、大孔型离子交换树脂耦合大孔吸附树脂吸附分离，以及C18键合硅胶纯化阿魏酸，制备高纯度的阿魏酸。 本专利技术的有益效果是由于采用新的提取工艺，通过简化操作、减少损失、提高产率，降低成本，增强产品的市场竞争能力。附图说明附图I为阿魏酸制备工艺流程图。附图2为E型阿魏酸化学结构式。具体实施例方式本专利技术涉及，是利用当归为原料，通过碱水提取、大孔型离子本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从当归中制备高纯度阿魏酸的方法，其特征在于包括以下步骤：a、阿魏酸的粗提：用NaOH溶液于50～60℃搅拌浸提当归，过滤，收集滤液，残渣按上述步骤再提取两遍，过滤，收集滤液，合并前2次滤液，最后1遍滤液用作为下一批当归的提取溶剂；b、大孔型阴离子交换树脂吸附分离：大孔型阴离子交换树脂经过预处理后，采用湿法装柱，上步骤的提取滤液以一定的上样速度上柱吸附，用HPLC跟踪检测流出液的浓度，直至树脂达到饱和，停止上样；吸附饱和的树脂先用反渗透水进行冲洗除杂，然后用盐酸溶液进行洗脱，HPLC跟踪检测流出液的浓度，直至洗脱完全；收集洗脱液，调节洗脱液的pH？2～3，待上大孔吸附树脂柱；c、大孔吸附树脂吸附分离：大孔吸附树脂经过预处理后，采用湿法装柱；将上述大孔型阴离子交换树脂洗脱液以一定的上样速度上柱吸附，用HPLC跟踪检测流出液的浓度，直至树脂达到饱和，停止上样；吸附饱和的树脂先用低浓度的甲醇进行除杂；然后用较高浓度的甲醇溶液进行洗脱，HPLC跟踪检测流出液的浓度，直至洗脱完全；收集洗脱液，真空浓缩回收甲醇，干燥得阿魏酸粗品I；阿魏酸粗品I待采用C18键合硅胶柱进一步纯化；d、中压C18键合硅胶ODS柱层析纯化：将C18键合硅胶湿法装柱，用加压装置进行压缩，并用流动相平衡层析柱；将上述的阿魏酸粗品I用流动相进行溶解，湿法上样；用甲醇？水？冰醋酸为洗脱剂进行等梯度洗脱，紫外检测器在线监测，分步收集色谱峰对应流出液，HPLC检测流出液，合并具有相同成份的流出液，回收溶剂，干燥得阿魏酸样品II；经HPLC检测，阿魏酸样品II的纯度可以到达98%以上。...

【技术特征摘要】
1.一种从当归中制备高纯度阿魏酸的方法，其特征在于包括以下步骤 a、阿魏酸的粗提用NaOH溶液于50 60°C搅拌浸提当归，过滤，收集滤液，残渣按上述步骤再提取两遍，过滤，收集滤液，合并前2次滤液，最后I遍滤液用作为下一批当归的提取溶剂； b、大孔型阴离子交换树脂吸附分离大孔型阴离子交换树脂经过预处理后，采用湿法装柱，上步骤的提取滤液以一定的上样速度上柱吸附，用HPLC跟踪检测流出液的浓度，直至树脂达到饱和，停止上样；吸附饱和的树脂先用反渗透水进行冲洗除杂，然后用盐酸溶液进行洗脱，HPLC跟踪检测流出液的浓度，直至洗脱完全；收集洗脱液，调节洗脱液的pH 2 3，待上大孔吸附树脂柱； C、大孔吸附树脂吸附分离大孔吸附树脂经过预处理后，采用湿法装柱；将上述大孔型阴离子交换树脂洗脱液以一定的上样速度上柱吸附，用HPLC跟踪检测流出液的浓度，直至树脂达到饱和，停止上样；吸附饱和的树脂先用低浓度的甲醇进行除杂；然后用较高浓度的甲醇溶液进行洗脱，HPLC跟踪检测流出液的浓度，直至洗脱完全；收集洗脱液，真空浓缩回收甲醇，干燥得阿魏酸粗品I ;阿魏酸粗品I待采用C18键合硅胶柱进一步纯化； d、中压C18键合硅胶ODS柱层析纯化将C18键合硅胶湿法装柱，用加压装置进行压缩，并用流动相平衡层析柱；将上述的阿魏酸粗品I用流动相进行溶解，湿法上样；用甲醇-水-冰醋酸为洗脱剂进行等梯度洗脱，紫外检测器在线监测，分步收集色谱峰对应流出液，HPLC检测流出液，合并具有相同成份的流出液，回收溶剂，干燥得阿魏酸样品II ;经HPLC检测，阿魏酸样品II的纯度可以到达98%以上。2.按照权利要I所述的一种从当归中制备高纯度阿魏酸的方法，其特征在于 步骤a中所述的当归应粉碎至20 40目；NaOH浓度为O. 5% 5% (m/m),提取的温度为50 60°C，提取时间为2 4 h，料液比为1:6 1:10。3.按照权利要I所述的一种从当归中制备高纯度阿魏酸的方法，其特征在于 步骤b中所述的大孔型阴离子交换树脂为D201或D202，采用氯化钠和酸碱预处理；树脂采用湿法装柱，树脂柱的的径高比为1:6 1:10 ; 步骤b中所述的上样吸附时的流速2 4 BV/h，用HPLC跟踪检测流...

【专利技术属性】
技术研发人员：向极钎，杨永康，程新华，殷红清，覃大吉，张亮，龙澜，李红英，李亚杰，
申请(专利权)人：恩施清江生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：