金霉素预混剂的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种金霉素预混剂的制备方法，是将金色链霉菌采用纯种二级发酵培养，培养基采用实罐灭菌法，在整个培养过程中严格保持无菌状态并保持一定的罐温、罐压，通入无菌空气并不断搅拌，根据发酵代谢过程中的pH和糖量变化，采用通氨和补料的方式保持一定的酸碱度及营养，所得发酵液再经过钙化、板框过滤、旋转闪蒸干燥、粉碎、过筛、混合等过程，最终制得金霉素预混剂；本发明专利技术方法大大提高了发酵单位和提取收率，提高了产品质量和活性成分含量，同时生产工艺简单、快速、稳定。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于兽药领域，涉及一种抗生素预混剂的制备方法。
技术介绍
金霉素预混剂属四环类抗生素药物饲料添加剂，主要活性成分为金霉素钙盐，其抗菌谱广，对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、螺旋体、立克次体、支原体、衣原体等均有较强的抑制作用，不仅可以预防和治疗禽畜疾病如细菌性肺炎、细菌性肠炎、钩端螺旋体病、猪链球菌性颊部脓肿、鸡传染性滑膜炎等，而且可以促进禽畜对营养物质的吸收，提高饲料转化率，促进禽畜生长。此外，金霉素预混剂还具有生产工艺较成熟，效价较高，使用成本相对较低；人畜不交叉使用，避免了交叉耐药；使用安全性高，低剂量长期使用不会引起药物残留；与其它兽药之间少有配伍禁忌，可用作基础药物与其它兽药制成复合药物饲料添加剂·等优点。随着畜牧业的进一步发展，近年来金霉素预混剂的市场需求量不断扩大，预计在未来较长一段时间内也是药物饲料添加剂的主力产品之一，而国外客户对金霉素预混剂的质量要求越来越高(如金霉素含量大于23%)，且产品价格与活性成分含量直接相关，因此，有必要改进和完善。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种改进的制备金霉素预混剂的方法，提高发酵单位和提取收率，提高产品质量和活性成分含量，同时生产工艺简单、快速、稳定。为达到上述目的，本专利技术采用如下技术方案 ，包括以下步骤 a.种子培养将金色链霉菌atfreo/acie/75·)斜面孢子悬浮液接种入种子罐，用种子培养基在温度30-33°C、通气量1:1. 5-2.0 v/v/min、罐压O. 03-0. 05 MPa、搅拌速度150-230 rpm/min的条件下培养20-26小时；所述种子培养基按质量百分浓度计由以下组分组成淀粉酶0-0. 05%、硫酸铵O.2-0. 6%、碳酸钙O. 2-0. 6%、氯化钙0-0. 3%、玉米蛋白0_1%、玉米淀粉3_5%、玉米浆0-0. 8%、葡萄糖0-0. 6%、硫酸镁O. 02-0. 04%、花生饼粉0-4%、磷酸二氢钾O. 01-0. 06%、氯化钠0-0. 3%、黄豆饼粉0-4%、植物油或豆油0-0. 6%、酵母粉0-2%、余量为水； b.发酵培养将步骤a制得的种子培养液接入发酵罐，用发酵培养基在温度28-33°C、通气量 1:0. 8-1. O v/v/min、罐压 O. 02-0. 05 MPa、搅拌速度 120-180 rpm/min 的条件下发酵培养80-160小时，在发酵培养过程中通过添加氨水确保发酵液pH在5. 6-6. 2之间，并根据发酵液的总糖浓度和总糖浓度控制指标添加补料培养基； 所述总糖浓度控制指标为发酵培养0-40小时控制总糖质量百分浓度不低于4. 0%,发酵培养40-80小时控制总糖质量百分浓度低于4. 0%但高于2. 5%，发酵培养80小时后控制总糖质量百分浓度不高于2. 5% ；所述发酵培养基按质量百分浓度计由以下组分组成淀粉酶O. 002-0. 02%、硫酸铵O. 5-1%、消泡剂0-0. 06%、碳酸钙O. 4-0. 7%、氯化钙0_1%、玉米蛋白0_1%、玉米淀粉0_8%、玉米浆0-2%、葡萄糖0-1%、硫酸镁O. 001-0. 3%、花生饼粉0-4%、磷酸二氢钾O. 01-0. 03%、氯化钠O. 1-0. 4%、黄豆饼粉0-5%、植物油或豆油0-0. 3%、酵母粉0-2%、余量为水； 所述补料培养基按质量百分浓度计由以下组分组成淀粉酶0-0. 08%、硫酸铵0-0. 7%、消泡剂O. 02-0. 08%、碳酸钙O. 2-0. 6%、氯化钙0-1. 0%、玉米蛋白0-1. 0%、玉米淀粉0_50%、玉米浆0-2. 6%、葡萄糖0-0. 6%、硫酸镁0-0. 03%、花生饼粉0_1%、磷酸二氢钾0-0. 02%、氯化钠0.2-0. 5%、黄豆饼粉0-1%、植物油或豆油0-0. 6%、酵母粉0-0. 5%、余量为水； c.提取取步骤b制得的发酵液，加入相当于发酵液体积0-12%的碳酸钙，搅拌20-40分钟，板框压滤，压滤完毕后，将板框滤饼在进风温度210-26(TC、排风温度90-120°C条件下进行旋转闪蒸干燥，干燥物料经振动筛筛分，筛上的大颗粒经粉碎机粉碎后重新筛分，最后混合，即得金霉素预混剂。·优选的，所述种子培养基按质量百分浓度计由以下组分组成硫酸铵O. 4-0. 5%、碳酸钙O. 4%、玉米淀粉3. 6-4%、硫酸镁O. 02%、花生饼粉I. 6-1. 8%、磷酸二氢钾O. 03%、氯化钠O. 12%、黄豆饼粉I. 3-1. 5%、植物油或豆油O. 5%、酵母粉I. 0-1. 1%、余量为水。优选的，所述发酵培养基按质量百分浓度计由以下组分组成淀粉酶O. 006%、硫酸铵O. 88%、消泡剂O. 02%、碳酸钙O. 6%、氯化钙O. 6%、玉米淀粉6. 05%、玉米浆I. 4-1. 8%、硫酸镁O. 16%、花生饼粉I. 7%、磷酸二氢钾O. 03%、氯化钠O. 22%、黄豆饼粉I. 0-1. 5%、植物油或豆油O. 2%、酵母粉O. 8-1. 2%、余量为水。优选的，所述补料培养基按质量百分浓度计由以下组分组成淀粉酶O. 03%、硫酸铵O. 25%、消泡剂O. 03%、碳酸钙O. 375%、氯化钙O. 25%、玉米淀粉40%、玉米浆I. 7-2. 0%、氯化钠O. 375%、植物油或豆油O. 075%、余量为水。更优选的，所述包括以下步骤 a.种子培养将金色链霉菌atfreo/acie/75·)斜面孢子悬浮液接种入种子罐，用种子培养基在温度30-33°C、通气量1:1. 5-2.0 v/v/min、罐压O. 03-0. 05 MPa、搅拌速度150-230 rpm/min的条件下培养24小时； 所述种子培养基按质量百分浓度计由以下组分组成硫酸铵O. 42%、碳酸钙O. 4%、玉米淀粉3. 67%、硫酸镁O. 02%、花生饼粉I. 67%、磷酸二氢钾O. 03%、氯化钠O. 12%、黄豆饼粉1.33%、植物油O. 5%、酵母粉I. 04%、余量为水； b.发酵培养将步骤a制得的种子培养液接入发酵罐，用发酵培养基在温度28-33°C、通气量 1:0. 8-1. O v/v/min、罐压 O. 02-0. 05 MPa、搅拌速度 120-180 rpm/min 的条件下发酵培养85小时，在发酵培养过程中通过添加氨水确保发酵液pH在5. 6-6. 2之间，并根据发酵液的总糖浓度和总糖浓度控制指标添加补料培养基； 所述总糖浓度控制指标为发酵培养0-40小时控制总糖质量百分浓度不低于4. 0%,发酵培养40-80小时控制总糖质量百分浓度低于4. 0%但高于2. 5%，发酵培养80小时后控制总糖质量百分浓度不高于2. 5% ； 所述发酵培养基按质量百分浓度计由以下组分组成淀粉酶O. 006%、硫酸铵O. 88%、消泡剂O. 02%、碳酸钙O. 6%、氯化钙O. 6%、玉米淀粉6. 05%、玉米浆I. 4%、硫酸镁O. 16%、花生饼粉I. 7%、磷酸二氢钾O. 03%、氯化钠O. 22%、黄豆饼粉1%、植物油O. 2%、酵母粉O. 88%、余量为水； 所述补料培养基按质量百分浓度计由以下组分组成淀粉酶O. 03%、硫酸铵O. 25%、消泡本文档来自技高网...

【技术保护点】
金霉素预混剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：a．种子培养：将金色链霉菌（Streptomyces？aureofaciens）斜面孢子悬浮液接种入种子罐，用种子培养基在温度30？33℃、通气量1:1.5？2.0？v/v/min、罐压0.03？0.05？MPa、搅拌速度150？230？rpm/min的条件下培养20？26小时；所述种子培养基按质量百分浓度计由以下组分组成：淀粉酶0？0.05%、硫酸铵0.2？0.6%、碳酸钙0.2？0.6%、氯化钙0？0.3%、玉米蛋白0？1%、玉米淀粉3？5%、玉米浆0？0.8%、葡萄糖0？0.6%、硫酸镁0.02？0.04%、花生饼粉0？4%、磷酸二氢钾0.01？0.06%、氯化钠0？0.3%、黄豆饼粉0？4%、植物油或豆油0？0.6%、酵母粉0？2%、余量为水；b．发酵培养：将步骤a制得的种子培养液接入发酵罐，用发酵培养基在温度28？33℃、通气量1:0.8？1.0？v/v/min、罐压0.02？0.05？MPa、搅拌速度120？180？rpm/min的条件下发酵培养80？160小时，在发酵培养过程中通过添加氨水确保发酵液pH在5.6？6.2之间，并根据发酵液的总糖浓度和总糖浓度控制指标添加补料培养基；所述总糖浓度控制指标为：发酵培养0？40小时控制总糖质量百分浓度不低于4.0%，发酵培养40？80小时控制总糖质量百分浓度低于4.0%但高于2.5%，发酵培养80小时后控制总糖质量百分浓度不高于2.5%；所述发酵培养基按质量百分浓度计由以下组分组成：淀粉酶0.002？0.02%、硫酸铵0.5？1%、消泡剂0？0.06%、碳酸钙0.4？0.7%、氯化钙0？1%、玉米蛋白0？1%、玉米淀粉0？8%、玉米浆0？2%、葡萄糖0？1%、硫酸镁0.001？0.3%、花生饼粉0？4%、磷酸二氢钾0.01？0.03%、氯化钠0.1？0.4%、黄豆饼粉0？5%、植物油或豆油0？0.3%、酵母粉0？2%、余量为水；所述补料培养基按质量百分浓度计由以下组分组成：淀粉酶0？0.08%、硫酸铵0？0.7%、消泡剂0.02？0.08%、碳酸钙0.2？0.6%、氯化钙0？1.0%、玉米蛋白0？1.0%、玉米淀粉0？50%、玉米浆0？2.6%、葡萄糖0？0.6%、硫酸镁0？0.03%、花生饼粉0？1%、磷酸二氢钾0？0.02%、氯化钠0.2？0.5%、黄豆饼粉0？1%、植物油或豆油0？0.6%、酵母粉0？0.5%、余量为水；c．提取：取步骤b制得的发酵液，加入相当于发酵液体积0？12%的碳酸钙，搅拌20？40分钟，板框压滤，压滤完毕后，将板框滤饼在进风温度210？260℃、排风温度90？120℃条件下进行旋转闪蒸干燥，干燥物料经振动筛筛分，筛上的大颗粒经粉碎机粉碎后重新筛分，最后混合，即得金霉素预混剂。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：谢昌贤，刘运添，邓维康，郝新乐，王鹏飞，
申请(专利权)人：金河生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：