药品中盐酸可乐定的含量和含量均匀度的测定方法及其应用技术

本发明专利技术涉及一种药品中盐酸可乐定的含量和含量均匀度的测定方法及其应用。本发明专利技术的药品中盐酸可乐定的含量测定方法，包括下列步骤：将药品制备成供试品溶液；采用阳离子固相萃取小柱对样品进行纯化与富集；用高效液相色谱进行含量测定。采用本发明专利技术的方法检测盐酸可乐定的含量，具有理想的分离效果，专属性强、精密度、重复性和准确度良好，为含量和含量均匀度的测定提供了可靠的技术手段。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种药品特定成分的测定方法及其应用，特别是涉及一种药品中盐酸可乐定的含量和含量均匀度的测定方法及其应用。
技术介绍
盐酸可乐定为α受体激动剂，具有中枢降压作用，是珍菊降压片中主要有效成分之一(分子结构式和UV光谱见图1)，但其每片含量仅30 μ g，含量极低，又受到到野菊花相 关成分的干扰，其测定非常困难。随着人们安全意识的不断强化，SFDA对药品监管力度逐年加大，在标准增加盐酸可乐定的含量或含量均匀度控制指标已是大势所趋，因此建立专属、灵敏、准确的含量和含量均匀度测定方法成为产品质量控制和工艺评价需要首先解决的技术难题。由于盐酸可乐定含量极低，且只在紫外末端有吸收，再加上野菊花相关成分严重的阴性干扰，使其定量检测异常困难。文献中报道的含量和含量均匀度测定方法基本都采用了复杂的溶剂萃取和PH调节等操作进行样品前处理来去除干扰杂质，其操作步骤繁琐，方法准确度和可操作性存在较大问题，不适用于日常检测，因此一直未能被纳入法定标准.医药导报，2009，28 (6) : 764-766)，许谙等将C18固相萃取小柱用于珍菊中盐酸可乐定的测定的样品前处理，但除杂效果仍不够理想。高苏亚(高苏亚，李华，曹晓芹.区带毛细管电泳法测定珍菊降压片有效成分的含量·时珍国医国药，2008，19(11) : 1656-2567)、Yun-qiu (Su，S._m·，Yu, Y. -q.Simultaneous Determination of Clonidine Hydrochloride, Hyrochlorothiazide,and Rutin in Zhenju Jiangya Tablet by Capillary Electrophoresis. JournalofChinese Pharmaceutical Sciences, 2005,14 (3) : 173-175. )、丁飞等(丁飞，陈黎明·毛细管电泳-安培检测法同时测定中成药珍菊降压片中有效成分.理化检验-化学分册，2008,44(5) :430-432)采用毛细管电泳技术尝试同时测定珍菊降压片中的盐酸可乐定、盐酸可乐定、芦丁，取得较好的效果，由于仪器的普及问题，该方法难以在日常检验中推广。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了克服现有技术中的缺陷，提供一种药品中盐酸可乐定的测定方法及其应用。本专利技术首先提供了一种药品中盐酸可乐定的含量测定方法，包括下列步骤I)将药品制备成供试品溶液；2)固相萃取采用阳离子固相萃取(SPE)小柱对样品进行纯化与富集；3)用高效液相色谱(HPLC)进行含量测定。将药品制备成供试品溶液的方法包括下列步骤将药品与提取溶剂混匀后，超声5-60分钟，固液分离后获得供试品溶液。超声时间较佳为5-20分钟,最优选15分钟。如所述药品为固体制剂，可在药品与提取溶剂混和前，先将药品粉碎，或者在药品与提取溶剂混合后，采用加入玻璃珠，在震荡器上震荡破碎的方法进行样品前处理，较佳的，所述提取溶剂可为水或酸水溶液，配置酸水溶液的酸可以是盐酸、磷酸、醋酸、甲酸等常用酸，酸水溶液的PH值范围为I. (Γ7. 0，优选O. lmol/L盐酸水溶液。所述供试品溶液pH为I. (Γ7. O。所述固相萃取依次包括下列步骤固相萃取小柱的活化、平衡、上样、淋洗和洗脱。优选的，所述阳离子固相萃取小柱为SCX (以苯磺酸键合硅胶为填充剂)固相萃取柱。所述阳尚子固相萃取小柱的填充剂重量为50-1000mg。固相萃取小柱的活化方法可为常规，如用甲醇活化。 优选的，固相萃取小柱平衡采用水或pH为I. (Γ7. O的酸水溶液。最优选O. Imol/L盐酸水溶液，该平衡液可确保目标成分的完全电离和充分交换。淋洗可采用常规试剂。优选的，淋洗所用淋洗液为水和任意比例的甲醇水溶液，最优选水和体积百分比50%的甲醇水溶液，此选择可在保证除去杂质的前提下减少有机溶剂的用量，更加环保。优选的，固相萃取的洗脱用洗脱液为氨水-甲醇水溶液，所述氨水-甲醇水溶液中，氨水(分析纯，含量为25 28%)的体积百分比浓度为O. 5飞％，甲醇的体积百分比浓度为5(Γ99. 5%。最优的，氨水的体积百分比浓度为2%，甲醇的体积百分比浓度为50%，其可在保证脱附效果的前提下，减少了其它低极性杂质的洗脱，有利缩短检测时间。固相萃取的流速对萃取效果影响不大，可采用常规的流速如O. 5-3. Oml/min。优选的，洗脱后收集的洗脱液用酸液定容。酸液定容可使游离的可乐定完全成盐，避免测定时出现峰拖尾。所述酸液优选盐酸水溶液。上样体积及各试剂使用的体积可根据小柱的规格确认。采用反相高效液相色谱进行测定。优选的，高效液相色谱时，采用的色谱柱为C18色谱柱。优选的，高效液相色谱以乙腈-磷酸水溶液系统为流动相。所述乙腈-磷酸水溶液系统中，乙腈的体积百分数为5_30%，所述磷酸水溶液中的磷酸重量百分比浓度为O. 0Γ0. 5%。最优选的，所述乙腈-磷酸水溶液系统中，乙腈与磷酸水溶液的体积比为10:90，磷酸水溶液中的磷酸重量百分比浓度为O. 05%。高效液相色谱法测定时，流动相的流速为常规流速。高效液相色谱法测定时，柱温可为20_40°C，最优选为30°C。高效液相色谱法测定时，检测波长可为200-230nm，最优选220nm。所述药品中盐酸可乐定的含量测定方法中，可采用相同条件测定对照品溶液中盐酸可乐定的含量，并按外标一点法计算供试品溶液中盐酸可乐定的含量。对照品溶液的配制采用与供试品提取相同的溶剂。 在获知供试品溶液中盐酸可乐定的含量后，将很容易折算出药品中盐酸可乐定的含量。本专利技术的盐酸可乐定的含量测定方法中，各项优选条件可以随意组合搭配。本专利技术所述药品中盐酸可乐定的含量测定方法可用于药品的质量检测，尤其适用于珍菊降压片中盐酸可乐定的含量测定或用于珍菊降压片中盐酸可乐定的含量均匀度测定。本专利技术还进一步提供了一种珍菊降压片的质量检测方法，包括采用前述方法检测珍菊降压片中盐酸可乐定的含量，以及检测珍菊降压片中的盐酸可乐定的含量均匀度。本专利技术用于检测珍菊降压片中盐酸可乐定的含量均匀度时，可以珍菊降压片与提取溶剂和玻璃珠共同置于提取容器中撞击破碎后，再进一步超声提取制备供试品溶液，玻璃珠的用量可以根据提取容器的大小和提取溶剂的用量灵活调整，当采用IOOmL以下的提取容器、25mL提取溶剂时，玻璃珠的最佳用量为15g。由于盐酸可乐定在珍菊降压片中含量仅30 μ g/片，由于含量低，活性强，容易出现安全性问题，易因含量均匀度不合格而影响临床疗效，因此本专利技术认为，有必要将其含量均匀度考察作为一项质量检测指标引入质量检测方法中，必须严格控制其在制剂中的含量和含量均匀度。 进一步的，在检测珍菊降压片中的盐酸可乐定的含量均匀度时，取数片供试品，按前述方法分别检测每片供试品中盐酸可乐定的含量，按含量均匀度检查法计算含量均匀度。本专利技术采用SPE-HPLC联用技术，有效消除了盐酸可乐定测定时的阴性干扰，解决了微量有效成分盐酸可乐定的定量难题，并通过对方法的优化使操作过程更加简捷高效，显著改善了传统测定方法的专属性、灵敏度、重现性和准确性，为珍菊降压片中盐酸可乐定的质量控制提供了可靠的技术手段，让珍菊降压片中盐酸可乐定的含量和含量均匀本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种药品中盐酸可乐定的含量测定方法，包括下列步骤：1）将药品制备成供试品溶液；2）固相萃取：采用阳离子固相萃取小柱对样品进行纯化与富集；3）用高效液相色谱进行含量测定。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：敬应春，张聪，蔡国琴，徐玲玲，
申请(专利权)人：上海雷允上科技发展有限公司，上海市中药研究所，
类型：发明
国别省市：