新肺炎病毒组合物及其使用方法技术

本发明专利技术提供新鉴定的能感染哺乳动物的肺炎病毒，所述哺乳动物包括狗、猫和可能的人。提供分离的病毒多核苷酸和蛋白，和分离的病毒本身。发明专利技术包括检测病毒的组合物和方法，和预防和/或治疗与病毒出现正相关的疾病征兆的方法和组合物，和包括病毒的分离细胞。也提供完整病毒颗粒，病毒蛋白和其片段。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术一般涉及病毒学领域，并且更特定是在包括犬和猫在内的哺乳动物中发现的副粘病毒(Paramyxoviridae)科,肺炎病毒(Pneumovirinae)亚科的新发现病毒。_4]
技术介绍
关在一起的家犬，如在收容所、犬舍或繁育基地中，经常受到急性呼吸道感染(犬窝咳)影响。该疾病快速传播并难于消除，因为新动物会不断引入。一系列试剂会产生多 个和顺序重叠感染的复杂综合征，使诊断和治疗困难。受影响犬的临床征兆从轻度干咳和流鼻涕液到严重病例的肺炎和死亡。猫也被多种试剂感染，产生不同严重程度的呼吸窘迫。相同或相似病毒也能感染人。因此，当前且仍需要确定感染多种哺乳动物的试剂和发展用于诊断、预防和/或治疗这种感染的组合物和方法。本专利技术满足了这些需要。
技术实现思路
本专利技术基于新肺炎病毒的发现。所述病毒能感染不同类型的哺乳动物，包括但不必需限于犬、猫和可能的人。病毒的出现可与犬的急性呼吸疾病(ARDC)或猫呼吸疾病，或人或其他哺乳动物的呼吸或其他疾病正关联。专利技术提供病毒的分离多核苷酸和蛋白以及分离病毒本身。专利技术包括检测病毒的组合物和方法，以及预防和/或治疗与病毒出现正相关的疾病征兆的方法和组合物。也提供包括病毒的分离细胞。专利技术的病毒是负链RNA病毒。专利技术包括分尚负链,与负链反向互补的正链,RNA多核苷酸的DNA等价物，正链编码的蛋白，以及多核苷酸和蛋白的片段。某些实施方式中，经分离病毒包含的负链多核苷酸含有序列SEQ IDNO: I或与SEQID NO: I序列至少96%相同的序列。也提供包含SEQ IDN0:2或SEQ ID NO: 3序列的分离多核苷酸，或具有与SEQ ID N0:2或3序列至少96%相同的序列的多核苷酸。专利技术提供刺激哺乳动物免疫反应的方法。刺激免疫反应可以是细胞介导，体液或其结合，并能对动物提供预防和/或治疗益处。刺激免疫反应的方法包括给予哺乳动物包括本文所述多核苷酸和/或病毒，本文所公开病毒多核苷酸编码的病毒蛋白，所述蛋白的片段或其组合的组合物。多核苷酸，病毒和/或蛋白和/或其片段能从任何合适来源分离，或能用熟知技术重组生成。专利技术提供检测哺乳动物所得生物样品中病毒出现的方法。所述方法包括从哺乳动物获得生物样品并从生物样品中检测病毒包括的多核苷酸序列，或病毒蛋白或其片段。多核苷酸、蛋白、蛋白片段或其组合的出现指示哺乳动物被病毒感染。附图简要说明图I.使用人类呼吸道合胞病毒特异性单克隆抗体(Mab)的A72细胞免疫荧光分析。A)感染细胞上的Mab 2G122。B)未感染细胞上的Mab2G122。C)感染细胞上的Mab5H5N。D)未感染细胞上的Mab 5H5N。从生产商获得的初级Mab储液以1:100稀释使用。红色背景通过用伊文思蓝复染产生。图2.免疫荧光分析显示定向用于感染和未感染犬A72细胞的非呼吸相关测试的随机选定犬血清的反应性。A)1:320稀释的感染细胞血清。B) 1:320稀释的未感染细胞血清。红色背景由用伊文思蓝复染生成。图3.包括SEQ ID NO: I序列的病毒基因组构成的图示。专利技术描述本专利技术提供新型分离病毒，分离的病毒多核苷酸和蛋白，检测病毒的组合物和方法，和预防和/或治疗哺乳动物中与病毒出现正相关的疾病征兆的组合物和方法。 专利技术的病毒是负链RNA病毒。因此，病毒颗粒中包装的遗传材料是与正链反向互补的单链RNA。由RNA依赖的RNA聚合酶从负链转录生成正链。正链至少有部分mRNA功能，因为由正链编码的病毒蛋白在感染细胞的细胞质中翻译，并且之后参与新病毒颗粒的组装和负链基因组的包装。在某些实施方式中，专利技术提供分离的病毒包括含有序列SEQ ID NO: I或与SEQ IDNO: I序列至少96%相同序列的负链多核苷酸。专利技术也提供与负链互补的多核苷酸。在某些实施方式中，所述多核苷酸包括SEQ ID NO:4所示序列，或与SEQ ID NO:4至少96%相同的序列。也提供分离多核苷酸，所述多核苷酸包括SEQ ID NO: I序列或与SEQ ID NO: I序列至少96%相同的序列，或包括SEQ ID N0:4序列或与SEQ ID N0:4序列至少96%相同的序列。也提供包括SEQ ID N0:2和/或SEQ ID NO:3序列的多核苷酸，或具有与SEQ ID NO:2或3序列至少96%相同序列的多核苷酸。也提供与所述序列和与反向互补物至少96%相同序列的反向互补序列。本文公开的所有这些多核苷酸和蛋白和其片段的结合也包括在专利技术中。能鉴定专利技术提供的病毒多核苷酸，其功能在于支持活病毒复制(包括减毒病毒)。也提供包括病毒的细胞。在多个实施方式中，包括病毒的细胞是分离细胞，或体外增殖以使病毒减毒的细胞，和/或用于疫苗或其他目的的病毒来源。因此，包括病毒的分离细胞，包括病毒的细胞培养物和/或细胞系，细胞培养基中出现的病毒和/或病毒产物，和包括病毒的分离组织都是专利技术的各个方面。在特定实施方式中，提供本专利技术所述各RNA序列的DNA等价物。因此，专利技术包括本文所述各RNA序列，其中RNA中的每个U (尿嘧啶)被T (胸腺嘧啶)取代。本专利技术所述的每个病毒多核苷酸包括与各多核苷酸指定SEQ ID NO中所存在序列相同的多核苷酸，并且还包括与病毒SEQ IDNO中所存在序列至少96%相同的所有多核苷酸。在特定实施方式中，与序列表所示多核苷酸序列至少96%相同的多核苷酸与那些跨其全长的序列至少96%相同。不希望受任何特定理论的束缚，认为本文出现和包括那些与序列表所列病毒多核苷酸序列有至少96%相同的多核苷酸序列与相关病毒例如已知感染鼠哺乳动物的病毒所含多核苷酸不同。不希望受任何特异理论的束缚，还认为病毒的减毒，例如连续传代，能产生包括和/或转录与序列表所示序列至少96%相同的多核苷酸的病毒。与序列表中特定引用序列不同的序列可与所示序列有96. 0%-99. 9%相同，包括其间到第一小数点的所有整数。96. 0%-100%序列相同性的所有范围(含端值)也是专利技术的实施方式。多核苷酸的片段也包括在本专利技术中。因此，在多个实施方式中，每个病毒多核苷酸(包括反向互补物和其DNA等价物)包括多核苷酸片段，长度从10个核苷酸到多核苷酸的全长，并包括其间所有整数。例如，本专利技术包含多核苷酸，所述多核苷酸含有SEQ ID N0:1序列且包含其序列所有片段，包含10个核苷酸长度到多至8，598个核苷酸长度，并且包含其间所有整数。本专利技术提供的多核苷酸，无论是否在病毒颗粒中出现，可以比本文所述那些更长，因为所示序列可能不包含完整病毒基因组序列和/或反向互补物和/或其DNA等价物。专利技术也提供刺激哺乳动物免疫反应的方法。经刺激免疫反应是能提供动物预防和/或治疗益处的免疫反应。经刺激免疫反应可以是体液和/或细胞介导的免疫反应。经刺激免疫反应能针对病毒编码的任何抗原和/或免疫原。因此，完整病毒颗粒，每个病毒蛋白，和病毒蛋白片段是能用于在哺乳动物中刺激免疫反应的本专利技术实施方式。在多种实施方式中，刺激免疫反应的动物是家犬(Canis familiaris)或家猫(Felis catus),即分别是驯养的犬或猫。在特定实施方式中，用于刺激犬免疫反应的多核苷酸包含SEQ IDN0:1序列或与·SEQ ID NO: I序列至少96%相同的序列本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：E·杜博维，R·W·瑞沙，
申请(专利权)人：康奈尔大学，
类型：
国别省市：