间质肺炎病毒的减毒制造技术

本发明专利技术涉及用于抗间质肺炎病毒属成员或者ＲＳＶ或者包含的Ｆ蛋白质区域与间质肺炎病毒属成员具有显著遗传同源性的病毒的疫苗，其中所述疫苗是减毒活疫苗。尤其是，所述疫苗抗禽或者人类来源的间质肺炎病毒。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及抵抗间质肺炎病毒属或者RSV(呼吸道合胞体病毒)成员的疫苗，该疫苗是减毒活疫苗。特别地，该疫苗抵抗鸟禽或者人类起源的间质肺炎病毒。本专利技术进一步涉及产生抗间质肺炎病毒或者呼吸道合胞体病毒属病毒成员的疫苗的方法。本专利技术进一步涉及间质肺炎病毒属的减毒活疫苗。本专利技术也涉及含有这种病毒的宿主细胞。本专利技术进一步涉及特定的DNA或者cDNA或者RNA序列以及含有该DNA，cDNA或者RNA序列的载体或者质粒。最后，本专利技术涉及修饰的F蛋白，以及F蛋白在生产预防间质肺炎病毒属或者呼吸道合胞体病毒属病毒产生的紊乱或者疾病中的应用。副粘病毒科的副粘病毒和肺炎病毒亚科包括人类和动物的几种重要病原体。在分类学上，肺炎病毒被分成肺炎病毒属和间质肺炎病毒属。如下所述，肺炎病毒属的人呼吸道合胞体病毒在世界范围内被认为是引起早期婴儿下呼吸道疾病的唯一和最主要的因素。肺炎病毒属的其它成员包括牛呼吸道合胞体病毒，绵羊呼吸道合胞体病毒和小鼠肺炎病毒。禽肺炎病毒APV叙述如下，并且先前被称为火鸡鼻气管炎病毒(TRTV)。它被认为是RTI病原体，先前被认为是近来建立的间质肺炎病毒属的唯一成员。副粘病毒科包括多个不同的病毒， 参与人和动物的程度不同的严重病症或者疾病。副粘病毒包含单分子的单一毒株负RNA作为基因组，它们全部与宿主的急性呼吸道疾病相关(Pringe，C.R.(1987)″病毒性疾病的分子基础″，W.C.Russell和J.W.Almond出版，普通微生物学会，40卷，91到138页，剑桥大学出版社)。在这个科的许多病毒中，呼吸道合胞体病毒(RS病毒)排在麻疹病毒之后对人最具显著的临床影响。人RS病毒在世界范围内是每年导致儿童严重下呼吸道传染疾病的主要原因(Chanock等，1991，″人的病毒感染″，525到544页，A.S.Evans出版，Plenum出版社)。尽管包括RS病毒的肺炎病毒和其它副粘病毒只有有限的核苷酸或者氨基酸序列同源性，然而它们具有诸如主要核蛋白(N)和F蛋白质(F)等某些重要结构特点，这些结构在大量病毒的具有类似功能的蛋白质中是保守的(Barr等，1991，J.of Gen.Virol.72，677到685；Chambers等，1990，J.of Gen.Virol.71，3075到3080)。对由核衣壳复合物构成的副粘病毒实施了不同的RNA合成方法，所述核衣壳复合物由基因组RNA，核蛋白，含磷蛋白质(P)和聚合酶(L)蛋白形成。该核蛋白复合物的功能取决于所有3种蛋白质的彼此相互作用和与基因组RNA的相互作用，以及可能地与其它病毒和/或细胞组分的相互作用(Barik，1992，J.of Virol.66，6813到6818)。病毒粒子的成熟取决于核糖核蛋白复合体，基体(M)蛋白质和嵌入修饰的细胞膜的病毒糖蛋白之间的一系列相互作用。然而肺炎病毒中，诸如RS，其它2种蛋白质，即膜关联的小疏水(SH)蛋白质和第二基质蛋白质(M2)也以尚未被了解的方式参与病毒粒子结构，并可能涉及病毒粒子的装配。命名为NS1和NS2的肺炎病毒蛋白的功能是未知的，它们看来并非形成病毒颗粒的一部分(Collins，1991，″Paramyxoviruses″，103到162页，D.W.Kingsbury出版，Plenum出版社)。属于副粘病毒科的其它经济上重要的病毒为先前命名为TRT病毒的APV病毒。APV病毒是间质肺炎病毒属的成员。它引起在火鸡中作为急性呼吸道疾病的火鸡鼻气管炎。关于它的描述首先出现在七十年代末期的南非，后来出现在欧洲和世界其它部分。该疾病是过去这些年火鸡工业经济损失的主要原因之一。A和B血清型的APV通常发现于欧洲，而类似的感染存在于美国科罗拉多州。那里分离的APV毒株是所谓的Colorado或者C毒株。另一APV毒株分离自法国的鸭子。除了A，B和C型，现在可能存在其它非A，非B型APV。因此，APV是第一次分离自鸟的禽间质肺炎病毒属成员。禽间质肺炎病毒可能也参与导致大量母鸡生产损失的″头部肿大综合症″。禽间质肺炎病毒(APV)是多型RNA病毒，具有定位于壳中的融合蛋白(F)和由糖蛋白(G)组成的刺突。它被命名为“间质肺炎病毒”。该病毒不具有血细胞凝集特性。基于该糖蛋白(G)的核苷酸和推断的氨基酸序列，最初的APV被分为两种亚型。来自南非和英国的APV最初具有亚型A，而其它欧洲APV毒株属于亚型B。如上所指出，此外目前已知可能的其它亚型有非A亚型，非B亚型，和C亚型。禽间质肺炎病毒可以培养在具有致纤毛运动停滞效应的气管环形培养物中。它还可能培养在胚胎化的蛋中和其它细胞培养物中。美国毒株也可以培养在HEF(鸡胚胎纤维原细胞)，Vero细胞和胚胎化的蛋中。火鸡鼻气管炎的临床症状相应于急性鼻气管炎感染的临床症状。动物在感染之后2到3天表现出麻木和咳嗽，打喷嚏和头部摆动。如果感染没有变得更恶化，该动物在感染之后7到8天又恢复为正常。在鸡中的临床症状相应于火鸡中的症状，然而，通常它们不是那么严重。如果另外有大肠杆菌或者其它细菌参与，可以导致大量损失，而疾病持续时期可以具有不令人喜欢的期限。然而，鸡中的APV只很少导致产生大量损失的″头部肿大综合症″。次要临床疾病引起的持续损失可能更为重要。在普通APV感染后，鸡和火鸡在血清中产生可以通过ELISA检测的中和抗体。这些抗体似乎对于鼻气管炎控制没有显著的重要性。母体抗体并不能够使雏禽有效抗病毒APV的早期感染。然而，循环抗体似乎对于年老动物生殖腺感染的保护是重要的。局部抗体似乎具有重要的保护效应。具有病毒中和效应的病毒特异性IgA和IgG抗体在毒性APV感染后出现在泪腺液体中。至今，已知没有APV感染的治疗方法。除美国外，人们正在尝试通过疫苗接种控制APV。副粘病毒的另一重要成员是分离自具有呼吸道疾病的年幼儿童的新发现的人间质肺炎病毒。这些分离自荷兰28个年幼儿童的病毒，基于病毒学资料，序列同源性和基因丛，被确定为间质肺炎病毒属的新成员(Van Den Hoogen等，Nature Medicine，卷7，6期，2001年6月，719到724页)。直到发现这些新的间质肺炎病毒，如上所述APV被认为是新近命名的间质肺炎病毒属的唯一成员(病毒分类学，病毒分类学国际委员会第7次报告(Van Regenmortel出版，M.H.，Fauquet，C.M.和Bishop，D.H.)551，557，559到560页(Academic出版社，圣迭戈，2000))。然而在上述文章中，作者基于序列同源性和基因丛得出结论，人的病毒似乎是间质肺炎病毒属的新成员，并因此将它们预先命名为人间质肺炎病毒。F蛋白质区域在人MPV和例如APV之间具有例如80％的基因同源性。因此推断人间质肺炎病毒最初可能起源于禽类并且新近传播给人群。如上所述，至今尚未发现上述指定疾病的治疗方法。为此，人们的注意力集中于疫苗接种。然而，目前尚无用于接种的疫苗能够提供抗上述与例如间质肺炎病毒属病毒相关疾病的长期和安全的保护。至于呼吸道合胞体病毒，从这些病原体的临床重要性来看疫苗开发仍然是重要目标。现在的方法涉及温度敏感型突变体的应用。提供抗RS病毒合适疫苗的尝试集中于2个重要领域，含有推断的ATP结合部本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种疫苗，其抗间质肺炎病毒属成员或者ＲＳＶ或者在Ｆ蛋白质区域与间质肺炎病毒属成员具有显著遗传同源性的病毒，其特征在于它含有病毒或者病毒的一部分，该病毒与野生型病毒相比在Ｆ蛋白（融合蛋白）的２９３－２９６位氨基酸区域，或者在与 例如ＲＳＶ中的３２３－３２８位氨基酸具有相同功能的区域被修饰。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：克莱夫J内勒，
申请(专利权)人：罗曼动物保健两合有限公司，
类型：发明
国别省市：DE[德国]