本发明专利技术涉及一种三聚氰胺检测的方法，步骤为：(1)样品的提取；(2)上清液的净化：(3)离心浓缩；(4)衍生化；(5)三聚氰胺的定量检测。采用本发明专利技术的方法可以同时处理大量样品，最大可以同时处理24份样品，并可同时处理多种样品；采用本发明专利技术的方法可以回收甲醇，最大可能的降低环境污染，回收的甲醇经蒸馏处理后可以重复使用，降低了成本；真空浓缩仪综合利用离心力、加热和外接真空泵提供的真空作用来进行溶剂蒸发，可同时处理多个样品而不会导致交叉污染。冷阱能有效捕捉大部分对真空泵有损害的溶剂蒸气，对高真空油泵提供有效的保护。真空泵使系统处于真空状态，降低溶剂的沸点，加快溶剂的蒸发速率。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于产品质量检测领域，尤其涉及。
技术介绍
三聚氰胺(Melamine)简称三胺，是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，主要用途是作为生产三聚氰胺甲醛树脂。由于其氮的质量分数66%左右，一些不法厂商在饲料中大量添加，以提高产品中粗蛋白含量，水生生物食用含三聚氰胺的饲料后可能会在体内富集，严重损害了消费者的健康和利益，尤其是儿童，服用三聚氰胺超标的食品，会导致肾结石。2008年9月“三鹿奶粉事件”导致大量儿童肾结石，以三鹿，蒙牛，伊利等为首的乳品企业均在其产品内检出超标的三聚氰胺，一时间引起了人们对三聚氰胺的高度关注，随之，国家取消了食品类商品免检的待遇。这直接导致三聚氰胺的检测量大增。目前，用于三聚氰胺的检测的方法主要采用GB/T22388-2008的方法，其中包括高效液相色谱法、液相色谱-质谱法、气相色谱-质谱法等。另外，目前一些检测机构提出采用电色谱仪进行检测，例如，中国专利CN102650627A公开了一种本专利技术涉及一种加压毛细管电色谱仪检测水产品中三聚氰胺的方法，步骤为1)样品制备；2)样品预处理；3)配制三聚氰胺标准溶液；4)采用加压毛细管电色谱进行分析；5)将样品经检测分析后根据其保留时间进行定量分析，利用外标法根据其峰面积进行定量分析。针对这些检测方法，液相色谱法的灵敏度较低，且分析时间较长，气质、液质联用仪，电色谱仪虽然检测灵敏度和分辨率很高，但是，这几种检测方法均需要采用氮气吹干仪，氮气吹干仪处理三聚氰胺样品虽然能够较快的处理样品，但是，氮气吹干仪一次只能处理少量样品，增加了检测时间，无法满足目前大量检测样品需同时检测的需求；从试管内被氮气吹扫而挥发出来的有机溶剂不经任何处理，直接散发到周围环境中，这些溶剂常常是强酸、强碱以及强腐蚀性物质。直接操作的实验人员极易因此出现健康问题，而这些溶剂挥发到空气里，也会对周围环境造成危害，包括办公室工作人员，周围绿化等。蒸汽会腐蚀仪器(针头)，导致交叉污染；另外，氮气吹干仪本身于由于长期处在这种环境中，也会很快出现生锈等被腐蚀现象，虽然有些氮气吹干仪的设计将针头包上一层PTFE以防腐，但针的尾部和仪器其它部件无法全部包上PTFE，不仅影响美观、性能，而且在操作时稍有不慎，便会将铁锈等碰落到样品中，造成样品污染；氮气吹干操作麻烦，必须有人一直看守，增加了检测人员的负担；消耗大量氮气，增加检测成本。由此可见，改进氮气吹干仪在三聚氰胺检测中的缺陷是非常必要的。
技术实现思路
为了解决目前检测方法存在的不能一次处理大量样品，有毒气体污染环境，消耗大量氮气的技术问题。本专利技术提供了如下技术方案，该方法包括如下步骤(I)样品的提取液态奶、奶粉、酸奶和奶糖等称取5. OOg样品于50mL具塞比色管，加入30mL浓度Iwt %的三氯乙酸溶液,润镟振荡40s以上,再加入IOmL浓度Iwt %三氯乙酸溶液,超声提取20分钟以上，加入2mL、浓度22g/L的乙酸铅溶液，用lwt%三氯乙酸溶液定容至刻度；充分混匀后，转移上层提取液29-32mL至50mL的离心试管，以5000r/min离心15min以上，得到待净化的上清液；奶酪、奶油和巧克力等称取5. OOg样品于50mL具塞比色管中，用5mL热水溶解或者在加热的条件下溶解，再加入25mL浓度^^%的三氯乙酸溶液，涡漩振荡40s以上，再加入IOmL三氯乙酸溶液超声提取20分钟以上，加入2mL、浓度22g/L的乙酸铅溶液，用Iwt %三氯乙酸溶液定容至刻度；充分混匀后，转移上层提取液29-32mL至50mL的离心试管，以5000r/min离心15min以上,得到待净化的上清液；(2)上清液的净化取基质为苯磺酸化的聚苯乙烯-二乙烯基苯高聚物的混合型阳离子交换固相萃取柱，先依次用3-4mL甲醇、5-6mL水活化；移取5mL的待净化滤液至固相萃取柱中。再用3-5mL水、3-5mL甲醇淋洗,淋洗液送入回收装置,抽近干后用3_5mL体积分数5%的氨化甲醇溶液洗脱，收集洗脱液；所述氨化甲醇是5mL摩尔浓度为25% 28%的氨水和95mL甲醇，混匀后备用；⑶离心浓缩将12-24份(样品量调整到偶数，单数量样品可以用空的离心管配级成偶数)样品收集得到的洗脱液同时放入到真空离心浓缩仪的离心管中，进行真空离心干燥，在真空状态下辐射加热样品；并利用真空离心浓缩仪的冷阱捕捉溶剂蒸气，冷却，回收，送入回收装置；⑷衍生化取上述干燥残留物，加入600 μ L的优纯级吡啶和200 μ L衍生化试剂，混匀，70°C反应40min以上；所述衍生化试剂是由体积比99 : I的N，O-双三甲基硅基三氟乙酰胺(BSTFA)和三甲基氯硅烷(TMCS)，其中所述衍生化试剂是色谱纯的。 (5)三聚氰胺的定量检测首先，吸取三聚氰胺标准溶液，真空离心浓缩，衍生化，配成衍生化的标准化溶液，供测定，并绘制标准曲线；对步骤(4)得到的样品进行测定，比对标准曲线，即得到样品中三聚氰胺的含量。所述方法，还包括甲醇回收步骤将步骤(2)和(3)送到回收装置的回收液放入到甲醇蒸馏装置中，得到纯化的甲醇。所述方法，还包括将蒸馏纯化的甲醇重新送入到所述检测方法步骤(2)重复使用的步骤。采用本专利技术的方法检测三聚氰胺具有以下优点I、真空浓缩仪综合利用离心力、加热和外接真空泵提供的真空作用来进行溶剂蒸发，可同时处理多个样品而不会导致交叉污染。2、冷阱能有效捕捉大部分对真空泵有损害的溶剂蒸气，对高真空油泵提供有效的保护。3、真空泵使系统处于真空状态，降低溶剂的沸点，加快溶剂的蒸发速率。4、采用本专利技术的方法可以同时处理大量样品，最大可以同时处理24份样品，并可同时处理多种样品。5、采用本专利技术的方法可以回收甲醇，最大可能的降低环境污染，回收的甲醇经蒸馏处理后可以重复使用，甲醇的重复利用率达80%以上，降低了成本。附图说明附图I是三聚氰胺衍生物GC-MS选择离子质谱图。具体实施例方式下面对本专利技术的较佳实施例进行详细阐述，以使本专利技术的优点和特征能更易于被本领域技术人员理解，从而对本专利技术的保护范围做出更为清楚明确的界定。 三聚氰胺的检测方法，该方法包括如下步骤(I)样品的提取液态奶、奶粉、酸奶和奶糖等称取5. OOg样品于50mL具塞比色管，加入30mL浓度Iwt %的三氯乙酸溶液,润镟振荡40s以上,再加入IOmL浓度Iwt %三氯乙酸溶液,超声提取20分钟以上，加入2mL、浓度22g/L的乙酸铅溶液，用lwt%三氯乙酸溶液定容至刻度；充分混匀后，转移上层提取液29-32mL至50mL的离心试管，以5000r/min离心15min以上，得到待净化的上清液；奶酪、奶油和巧克力等称取5. OOg样品于50mL具塞比色管中，用5mL热水溶解或者在加热的条件下溶解，再加入25mL浓度^^%的三氯乙酸溶液，涡漩振荡40s以上，再加入IOmL三氯乙酸溶液超声提取20分钟以上，加入2mL、浓度22g/L的乙酸铅溶液，用Iwt %三氯乙酸溶液定容至刻度；充分混匀后，转移上层提取液29-32mL至50mL的离心试管，以5000r/min离心15min以上,得到待净化的上清液；(2)上清液的净化取基质为苯磺酸化的聚苯乙烯-二乙烯基苯高聚物的混合型阳离子交换固相萃取柱，先依次用3-4mL甲醇、5-6mL水活化；移取5本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种三聚氰胺检测的方法，该方法包括如下步骤：(1)样品的提取液态奶、奶粉、酸奶和奶糖等称取5.00g样品于50mL具塞比色管，加入30mL浓度1wt％的三氯乙酸溶液，涡漩振荡40s以上，再加入10mL浓度1wt％三氯乙酸溶液，超声提取20分钟以上，加入2mL、浓度22g/L的乙酸铅溶液，用1wt％三氯乙酸溶液定容至刻度；充分混匀后，转移上层提取液29？32mL至50mL的离心试管，以5000r/min离心15min以上，得到待净化的上清液；奶酪、奶油和巧克力等称取5.00g样品于50mL具塞比色管中，用5mL热水溶解或者在加热的条件下溶解，再加入25mL浓度1wt％的三氯乙酸溶液，涡漩振荡40s以上，再加入10mL三氯乙酸溶液超声提取20分钟以上，加入2mL、浓度22g/L的乙酸铅溶液，用1wt％三氯乙酸溶液定容至刻度；充分混匀后，转移上层提取液29？32mL至50mL的离心试管，以5000r/min离心15min以上，得到待净化的上清液；(2)上清液的净化取基质为苯磺酸化的聚苯乙烯？二乙烯基苯高聚物的混合型阳离子交换固相萃取柱，先依次用3？4mL甲醇、5？6mL水活化；移取5mL的待净化滤液至固相萃取柱中。再用3？5mL水、3？5mL甲醇淋洗，淋洗液送入回收装置，抽近干后用3？5mL体积分数5％的氨化甲醇溶液洗脱，收集洗脱液；所述氨化甲醇是5mL摩尔浓度为25％～28％的氨水和95mL甲醇，混匀后备用；(3)离心浓缩将12？24份(样品量调整到偶数，单数量样品可以用空的离心管配级成偶数)样品收集得到的洗脱液同时放入到真空离心浓缩仪的离心管中，进行真空离心干燥，在真空状态下辐射加热样品；并利用真空离心浓缩仪的冷阱捕捉溶剂蒸气，冷却，回收，送入回收装置；(4)衍生化取上述干燥残留物，加入600μL的优纯级吡啶和200μL衍生化试剂，混匀，70℃反应40min以上；(5)三聚氰胺的定量检测首先，吸取三聚氰胺标准溶液，真空离心浓缩，衍生化，配成衍生化的标准化溶液，供测定，并绘制标准曲线；对步骤(4)得到的样品进行测定，比对标准曲线，即得到样品中三聚氰胺的含量。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：贾晓川，于燕燕，李晶，丁宇，于智睿，周磊，张彬，王娜，
申请(专利权)人：天津出入境检验检疫局工业产品安全技术中心，
类型：发明
国别省市：
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