H5N1谱系的通用疫苗制造技术

本发明专利技术涉及通用H5N1疫苗。本发明专利技术更特别涉及三种H5N1毒株的鉴别，它们覆盖大多数H5N1谱系中血凝素的中和表位中的全部变体。本发明专利技术进一步涉及通用H5N1疫苗，其包含所述三种H5N1毒株或者这三种毒株每一毒株的血凝素肽。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】H5N1谱系的通用疫苗相关申请的交叉参考本申请涉及并要求2010年4月30日申请的美国临时申请系列号61/329，802的优先权，其援引加入本文。序列提交本申请与电子形式序列表一起提交。序列表名称为2577_201PCT_ST25. txt，创建于2011年I月13日，大小为54kb。电子形式序列表的信息是本申请一部分并且以其全文援引加入本文。专利技术背景 本专利技术涉及通用H5N1疫苗。本专利技术更特别涉及三种H5N1毒株的鉴别，其覆盖大多数H5N1谱系中血凝素的中和表位中的全部变体。本专利技术进一步涉及通用H5N1疫苗，其包含所述三种H5N1毒株或者包含这三种毒株每一毒株的血凝素肽。本文中用于例证本专利技术背景或者提供关于实施的其它详细描述的出版物及其它材料均援引加入本文，为方便起见在“参考文献”中分别列出。流感病毒通过随机改变抗原决定簇如存在于血凝素球形头部区域中的主要中和表位而逃避免疫系统。在感染时,宿主应答的主要特征在于诱导针对这种中和表位的抗体，其阻断病毒血凝素对于靶细胞受体的附着。然而，这些HA的中和表位内相当多的氨基酸变化导致抗原性独特的流感H5N1病毒的出现。事实上，已报道季节性流感病毒在人群中通过抗原性漂移能有效逃避疫苗诱导的免疫性。此外，HAl可变区中几个关键氨基酸的突变足以使得病毒逃避疫苗诱导的抗体应答。先前鉴别逃避单克隆抗体的中和作用的变体的HA序列内的氨基酸取代的尝试揭示了 HA的中和表位位点(Kaverin et al. , 2002 ；Kaverin etal. , 2007)。流感病毒随机突变及进化为具有多样抗原性决定簇的新类型的性质在流感感染控制中是重要的挑战(Plotkin et al. , 2002) 0通过近年来H5N1禽流感的爆发及目前HlNl猪源性甲型流感病毒(S-OIV)的大流行局面已经清楚地认识到这点。事实上，在文献中已经充分记录了 H5N1已经获得感染人体组织的能力，这主要由于突变事件发生所致(Ayora-Talavera et al.，2009)。高致病性禽流感(HPAI)H5N1由于血凝素(HA)序列中的差异而是抗原性可区别的，由此产生H5N1的不同谱系或进化枝，HA是流感免疫性的主要决定簇(Lam et al.，2008 ；WH0, 2005)。使用目前的H5N1疫苗控制感染看起来对于异源毒株或H5N1的系统发生变体进化枝不是有效的，这部分是由于HA序列、特别是中和表位区域中的变化所致。由于现有疫苗仅基于诱导针对这些表位的中和抗体，因此这些序列中的差异可导致目前的疫苗不能胜任预防全球性流感。事实上，目前的H5N1疫苗候选物持续提供对于相应进化枝内大多数分离株的良好的抗原性覆盖，近年来认识到进化枝1、2. 2及2. 3自身内一些病毒示出抗原性异质性的迹象。为克服这种限制及完全了解世界范围的疫苗潜力，近年来提出了基于保守病毒蛋白质的通用疫苗的观念。已经对流感病毒的高度保守的离子通道蛋白(M2)或者核蛋白(NP)诱导交叉保护性细胞免疫性和病毒清除进行了评估(Wu et al. , 2007 ；Chen andSubbarao, 2009)。一种类似的使用血凝素的保守的融合肽的方法是抑制病毒与宿主细胞膜融合的另一选项(Gerhard et al.，2006)。针对这些保守蛋白产生的抗体可以降低病毒传播及促进从流感中康复。然而，特异于这些蛋白质的抗体的免疫原性不佳且发现是感染容许的(infection permissive)。因此,基于流感病毒血凝素的疫苗的开发看起来是预防HPAI如H5N1感染的唯一可行选项。然而，H5亚型中主要抗原性中和表位区域内的氨基酸改变限制了针对不同H5N1谱系的这种通用疫苗的开发。因此，需要开发一种通用疫苗，其提供对于不同H5N1谱系的一定程度的保护性免疫性。专利技术概述本专利技术涉及通用H5N1疫苗。本专利技术更特别涉及三种H5N1毒株的鉴别，其覆盖大多数H5N1谱系中血凝素中和表位中的全部变体。本专利技术进一步涉及通用H5N1疫苗，其包含所述三种H5N1毒株或者包含这三种中每一毒株的血凝素肽。因此，第一方面，本专利技术提供了预防对象疾病的通用H5N1疫苗，其中所述疾病与禽流感病毒的H5N1亚型相关。在一个实施方案中，所述通用H5N1疫苗包含预防有效量的第一免疫原性物质，预防有效量的第二免疫原性物质以及预防有效量的第三免疫原性物质。在另一实施方案中，每种免疫原性物质均包含血凝素或其抗原性部分或者编码所述血凝素或其抗原性部分的核酸。在另一实施方案中，所述抗原性部分包括血凝素的表位。在进一步的实施方案中，所述对象可以是人、家畜(狗、猫、猴等)、牲畜(马、牛、绵羊、山羊、猪等)、野禽(野鹅、野鸭等)以及家禽(鸡、鸭、鹅等)。在一个实施方案中，免疫原性物质是包含血凝素的病毒。在另一实施方案中，所述病毒是失活的。在另一实施方案中，所述病毒是减毒的病毒。在另一实施方案中，所述病毒是病毒体形式。在进一步的实施方案中，所述病毒衍生自卵或者衍生自细胞培养物。在另一实施方案中，所述免疫原性物质是包含血凝素的裂解病毒或者裂解病毒抗原性制备物。在一个实施方案中，所述免疫原性物质是血凝素或其抗原性部分。在另一实施方案中，所述血凝素或其抗原性部分已经被分离。在另一实施方案中，所述血凝素或其抗原性部分是通过表达系统产生的。在一个实施方案中，所述表达系统是任何表达系统，如病毒表达载体，其中血凝素或其抗原性部分呈递或展示在所述病毒表面。在一个实施方案中，所述病毒表达载体是任何病毒表达载体，如修饰的痘苗病毒表达载体，腺病毒表达载体，痘病毒表达载体，杆状病毒表达载体等。在一个实施方案中，所述表达载体是杆状病毒表达载体，呈递或展示血凝素或其抗原性部分的病毒是杆状病毒。在另一实施方案中，所述免疫原性物质是编码血凝素或其抗原性部分的核酸，其能在对象中表达。第二方面，本专利技术提供了一种对禽流感病毒产生保护性免疫性的方法，所述方法包括给对象施用预防有效量的通用H5N1疫苗。所述通用H5N1疫苗如上文所述。第三方面，本专利技术提供了一种预防或治疗与禽流感病毒相关疾病的方法，所述方法包括给对象施用预防有效量的通用H5N1疫苗。所述通用H5N1疫苗如上文所述。第四方面，本专利技术提供了通用H5N1疫苗在刺激对于禽流感病毒的免疫应答中的应用。所述通用H5N1疫苗如上文所述。第五方面，本专利技术提供了通用H5N1疫苗在预防与禽流感病毒相关疾病中的应用。所述通用H5N1疫苗如上文所述。第六方面，本专利技术提供了通用H5N1疫苗，其用于医药中。第七方面，本专利技术提供了通用H5N1疫苗，其用于调节对象体内的免疫应答。第八方面，本专利技术提供了通用H5N1疫苗，其用于治疗或预防对象中与禽流感病毒相关的疾病。第九方面，本专利技术提供了通用H5N1疫苗在生产调节对象体内免疫应答的药物中的应用。第十方面，本专利技术提供了通用H5N1疫苗在生产治疗或预防对象中与禽流感病毒相关的疾病的药物中的应用。附图简述图I示出血清血细胞凝集抑制效价。将小鼠组在第O天和第28天用 BacHA (BacHA-VN)的 Tri-BacHA (BacHA-mix)或 Mono-BacHA (A/Vietnam/1203/2004 (H5N1))或者失活的全病毒疫苗(WT-H本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：P·木根，F·和，HS·J·光，
申请(专利权)人：淡马锡生命科学研究院有限公司，
类型：
国别省市：