特异促进肝细胞CYP3A4基因高表达的慢病毒表达载体及其构建方法与应用技术

技术编号:8188133 阅读:341 留言:0更新日期:2013-01-09 23:49
本发明专利技术提供一种特异促进肝细胞CYP3A4基因高表达的慢病毒表达载体,包括pLVX-AcGFP-C1表达载体的基本序列、抗性基因序列、多克隆位点序列、启动子序列和CYP3A4基因cDNA序列;所述多克隆位点包括XhoI酶切位点和XmaI酶切位点,所述CYP3A4基因cDNA序列包括XhoI酶切位点、CYP3A4基因编码序列和XmaI酶切位点,所述CYP3A4基因cDNA序列正向插入所述多克隆位点序列中。本发明专利技术提供的慢病毒表达载体具有转染效率高、用量少、可特异、持续、高效、稳定地表达CYP3A4基因的优点,可作为有力工具应用于与CYP3A4相关的药物研究与开发。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程
,尤其涉及特异促进肝细胞CYP3A4基因高表达的慢病毒表达载体及其构建方法与应用
技术介绍
细胞色素P450酶(Cytochrome P450,CYP450)是一类重要的混合功能氧化酶系统,主要分布在生物体的内质网上和线粒体中,参与许多内源性和外源性物质的生物转化过程。CYP3A4属于CYP450家族中的CYP3A亚族,由CYP3A4基因编码,主要存在于肝脏中,约占肝脏CYP酶总量的30-40%,是肝脏中含量最丰富的CYP,也是最重要的人类药物代谢酶。CYP3A4参与代谢大约38类多于150种的临床治疗药物,包括抗生素、抗真菌药物、安定 药物、抗组胺剂、抗抑郁药物、激素以及钙拮抗剂等等,此外,CYP3A4还参与一些前体致癌物的激活过程。因为其广泛的代谢底物谱,许多药物不良反应是由药物相互作用导致CYP3A4的代谢活性改变所引起的。现有技术中,阮昊和徐田雪分别将CYP3A4基因cDNA片段连接到了 pFastBac载体上,并将其包装成杆状病毒后感染sf9细胞,得到了能表达CYP3A4基因的sf9细胞,该细胞能够用于体外研究药物代谢,但因不是人源细胞不适本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种特异促进肝细胞CYP3A4基因高表达的慢病毒表达载体,其特征在于:包括pLVX?AcGFP?C1表达载体的基本序列、抗性基因序列、多克隆位点序列、启动子序列和CYP3A4基因cDNA序列;所述多克隆位点包括Xho?I酶切位点和Xma?I酶切位点,所述CYP3A4基因cDNA序列包括Xho?I酶切位点、CYP3A4基因编码序列和Xma?I酶切位点,所述CYP3A4基因cDNA序列正向插入所述多克隆位点序列中。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:徐新云毛侃琅何晓阳毛吉炎应明
申请(专利权)人:深圳市疾病预防控制中心
类型:发明
国别省市:

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