具有基因协同元件的病毒及其应用制造技术

本发明专利技术公开的是具有基因协同元件的病毒及其应用。本发明专利技术包括病毒载体，所述病毒载体上插入有病毒复制子和载体特异性复制单元，所述病毒复制子包括复制子复制基因，用于启动转录翻译复制子复制基因的启动子一，连接在复制子复制基因上的基因协同元件，以及设置在病毒复制子末端的加尾信号序列；该基因协同元件由细胞因子序列、热休克蛋白序列HSPs和CpG基序中的一种以上序列构成，该基因协同元件还设置有用于启动转录翻译基因协同元件的启动子二。本发明专利技术具有能更好地主动有效激发机体特异性免疫，进而更好地发挥疾病预防或治疗效果等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种病毒，具体涉及的是一种具有基因协同元件的病毒及其应用。
技术介绍
同类技术原理的已公开的专利分两类，一类是靶向病毒，如专利CN2004800131515和CN2014101476528中的记载，靶向病毒可特异在肿瘤细胞中复制，必须靶向肿瘤给药才能达到一定的疗效，利用病毒直接杀灭肿瘤细胞。该技术是利用腺病毒作为载体，加入一些凋亡基因可以导致肿瘤细胞死亡，该腺病毒可以特异在肿瘤细胞中复制，但这种技术的局限性在于靶向病毒容易被机体抗体识别并杀灭而失效。该技术可诱导增强机体肿瘤特异性免疫能力有限。另一类是腺病毒甲病毒杂交载体，如专利CN2005800161337、US20070224170和WO2005112541A中的记载，腺病毒甲病毒杂交载体通过肿瘤靶向给药，在肿瘤特异性启动子启动甲病毒复制子表达，从而诱导肿瘤细胞发生凋亡。该技术利用腺病毒作为载体，加入了甲病毒复制子，促进肿瘤细胞凋亡，但该技术缺乏病毒复制元件无法在癌细胞中实现病毒复制，发挥作用效能比较慢，且疗效较低。且该类技术多次给药时同样具有第一类的局限性，即该病毒容易被机体抗体识别而杀灭而失效。该技术可诱导增强机体肿瘤特异性免疫能力同样有限。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术中的病毒疗效较低的问题，提供能更好地主动有效激发机体特异性免疫，进而更好地发挥疾病预防或治疗效果的具有基因协同元件的病毒，并公开了该具有基因协同元件的病毒的应用。为达到上述目的，本专利技术的技术方案如下：一种新型的杂交微生物，包括病毒载体，所述病毒载体上插入有病毒复制子和载体特异性复制单元，所述病毒复制子包括复制子复制基因，用于启动转录翻译复制子复制基因的启动子一，连接在复制子复制基因上的基因协同元件，以及设置在病毒复制子末端的加尾信号序列；该基因协同元件由细胞因子序列、热休克蛋白序列HSPs和CpG基序中的一种以上序列构成，该基因协同元件还设置有用于启动转录翻译基因协同元件的启动子二。通过本专利技术上述结构的优化，可以有效用于疾病的预防或治疗用途，且本专利技术的该病毒在预防和治疗上效果十分显著。专利技术结构的优化，能更好地主动有效激发机体特异性免疫，进而更好地发挥疾病预防或治疗效果，该疾病包括：疫病、自身代谢病、肿瘤等。更进一步地，所述基因协同元件由细胞因子序列、热休克蛋白序列HSPs和CpG基序中的两种以上序列串联构成。通过在本专利技术中插入两种以上序列的基因协同元件的作用，能使基因协同元件中的各元件达到相互促进效果，能更好地达到显著促进预防和治疗的目的。进一步，所述复制子复制基因和基因协同元件之间连接有标签蛋白。所述病毒复制子末端的加尾信号序列位置处还连接有PolyA序列，该PolyA序列中包含连续70～200个腺苷。其中，所述病毒载体包括但不限于以下类型中的一种，包括腺病毒，如犬腺病毒I型和II型，腺病毒2型Ad2、腺病毒5型Ad5、腺病毒35型Ad35；疱疹病毒，如人单纯疱疹病毒1型HSV1、伪狂犬病毒PRV；腺相关病毒AAV，如AAV2；痘病毒，如人痘病毒、牛痘病毒、羊痘病毒；逆转录病毒；慢病毒等。所述启动子一为启动转录翻译病毒复制子，该启动子其来源包括但不限于以下类型中的一种，包括转录因子E2F；癌胚抗原CEA；端粒酶TERT；甲胎蛋白AFP；翻译延长因子EF-1；三磷酸甘油醛脱氢酶GAPDH；前列腺特异性抗原，如PSA；乳腺癌特异性抗原，如CA-153；人巨细胞病毒HCMV；肌动蛋白actin等。所述复制子复制基因来源于单股正链RNA病毒(ssRNApositive-strandvirus)，该病毒类型包括但不限于以下类型中的一种，包括甲病毒属病毒Alphavirus，如东方马脑炎病毒Easternequineencephalitisvirus、森林脑炎病毒SemlikiForestvirus、委内瑞拉马脑炎病毒Venezuelanequineencephalomyelitisvirus；辛德毕斯病毒Sindbisvirus、鲑鱼胰腺病病毒Salmonpancreasdiseasevirus、盖他病毒Getahvirus、基孔肯雅病毒Chikungunyavirus；风疹病毒属病毒Rubivirus，如风疹病毒Rubellavirus；星状病毒Astrovirus，如哺乳动物星状病毒Mamastrovirus、禽星状病毒Avastrovirus；杯状病毒Calicivirus，如兔杯状病毒Lagovirus、诺如病毒Norovirus、人杯状病毒Sapovirus、动物杯状病毒Vesivirus；普罗维登斯病毒Providencevirus；黄病毒Flavivirus，如黄热病毒Yellowfevervirus、寨卡病毒Zikavirus、登革热病毒Denguevirus、乙型脑炎病毒Japaneseencephalitisvirus、丙型肝炎病毒HepatitisCvirus、边界病病毒Borderdiseasevirus、牛病毒性腹泻Bovineviraldiarrheavirus、猪瘟病毒Classicalswinefevervirus；戊型肝炎病毒HepatitisEvirus；动脉炎病毒Arterivirus，如马动脉炎病毒Equinearteritisvirus、蓝耳病毒Porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus、猴出血热病毒Simianhemorrhagicfevervirus；冠状病毒Coronaviridae，如传染性胃肠炎病毒Transmissiblegastroenteritisvirus、猪流行性腹泻病毒Porcineepidemicdiarrheavirus；小核糖核酸病毒Picornaviridae，如口蹄疫病毒Foot-and-mouthdiseasevirus、鸭肝炎病毒DuckhepatitisAvirus、脑心肌炎病毒Encephalomyocarditisvirus、肠病毒A型EnterovirusA、肠病毒B型EnterovirusB、肠病毒C型EnterovirusC、肠病毒D型EnterovirusD、肠病毒E型EnterovirusE、肠病毒F型EnterovirusF、肠病毒G型EnterovirusG、肠病毒H型EnterovirusH、肠病毒J型EnterovirusJ、人肠病毒Humanenterovirus、柯萨奇病毒Coxsackievirus、艾柯病毒Echovirus、人脊髓灰质炎病毒Humanpoliovirus、鼻病毒A型RhinovirusA、鼻病毒B型RhinovirusB、鼻病毒C型RhinovirusC、马B型鼻病毒EquinerhinitisBvirus、人甲肝病毒HepatitisAvirus、捷申病毒Porcineteschovirus、禽脑脊髓炎病毒Avianencephalomyelitisvirus等。该复制子复制基因为原始病毒复制子上的复制酶蛋白序列，如甲病毒SFV的NSP-1～NSP-4。所述标签蛋白为绿色荧光蛋白，可替换为半乳糖甘酶LacZ，荧光素酶Luciferase，肿瘤相关抗原，致病原相关的抗原等。肿本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有基因协同元件的病毒，包括病毒载体，其特征在于：所述病毒载体上插入有病毒复制子，所述病毒复制子包括复制子复制基因，用于启动转录翻译复制子复制基因的启动子一，连接在复制子复制基因上的基因协同元件，以及加在病毒复制子末端的加尾信号序列；该基因协同元件由细胞因子序列、热休克蛋白序列HSPs和CpG基序中的一种以上序列构成，该基因协同元件还设置有用于启动转录翻译基因协同元件的启动子二。

【技术特征摘要】
1.具有基因协同元件的病毒，包括病毒载体，其特征在于：所述病毒载体上插入有病毒复制子，所述病毒复制子包括复制子复制基因，用于启动转录翻译复制子复制基因的启动子一，连接在复制子复制基因上的基因协同元件，以及加在病毒复制子末端的加尾信号序列；该基因协同元件由细胞因子序列、热休克蛋白序列HSPs和CpG基序中的一种以上序列构成，该基因协同元件还设置有用于启动转录翻译基因协同元件的启动子二。2.根据权利要求1所述的具有基因协同元件的病毒，其特征在于，该基因协同元件由细胞因子序列、热休克蛋白序列HSPs和CpG基序中的两种以上序列串联构成。3.根据权利要求1所述的具有基因协同元件的病毒，其特征在于，所述复制子复制基因和基因协同元件之间连接有标签蛋白。4.根据权利要求1所述的具有基因协同元件的病毒，其特征在于，所述细胞因子序列选自IL-2，IL-3，IL-12，IL-15，IL-23，IL-27，IL-30，IL-35，G-CSF，M-CSF，GM-CSF，IFN中的一种；所述热休克蛋白序列HSPs选自HSP110，HSP90，HSP70，HSP65，HSP60以及sHSPs中的一种。5.根据权利要求1所述的具有...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄朝述，
申请(专利权)人：黄朝述，
类型：发明
国别省市：四川;51