本发明专利技术涉及了一种全能花碱的制备方法，方法步骤是：（1）取滨生全能花干燥鳞茎，用饱和1%氨水浸泡2-6h，晾干，加入闪式提取器中，以85-95%乙醇溶液为提取溶剂，进行闪式提取，过滤得到提取液；（2）将提取液浓缩，经氧化铝柱层析；（3）制备型液相色谱分离得到全能花碱。该方法具有快速安全高效节能、不破坏有效成分等特点，适合工业化生产。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及，特别是涉及一种闪式提取全能花碱的方 法。
技术介绍
全能花碱(Pancratistatin),分子式C14H15NO8,分子量325. 27。全能花碱是从石蒜科全能花属植物滨生全能花littorale Jacq.的鳞莖中提取分离的一种生物碱类化合物。实验研究表明，全能花碱具有1.细胞毒活性。对鼠P388非常有效，其ED5tl (体夕卜)为O. 01 μ g/ml ;体内在O. 75-12. 5mg/kg时，延命率38%_106%，对鼠卵巢肉瘤M-5076也有效。2.抗RNA病毒活性。对感染乙脑小鼠注射本品后，存活率增加100%，对黄热病病毒和本雅病毒(bunyaviruses)也有效。3.植物生长抑制剂。抑制种子发芽和植物根的生长。4.抗肿瘤活性。最敏感为黑素瘤株，其次为脑、结肠、肺、肾肿瘤。目前，国内尚未见全能花碱的提取纯化方法方面的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供，该方法工艺简单、快速、重现性好。易于产业化放大。本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的 ，其特征在于包含以下步骤 (1)取滨生全能花干燥鳞茎，用1%氨水浸泡2-6h，晾干，加入闪式提取器中，以85-95%乙醇溶液为提取溶剂，进行闪式提取，过滤得到提取液； (2)上述提取液浓缩至浸膏，加氧化铝拌匀、干燥后装柱，用氯仿-丙酮混合溶液洗脱，薄层检测，收集全能花碱流分，浓缩； (3)将上述浓缩液采用制备型液相色谱分离，紫外检测器在线监测，收集全能花碱组分，将洗脱液旋转蒸发浓缩，干燥即得产品。所述步骤(I)中闪式提取电压为140-160V，提取时间为90s-120S。所述步骤(2)中氧化铝为80-100目，氯仿-丙酮体积比为1:1，用量为柱体积的4-8 倍。所述步骤(3)中制备型液相色谱的流动相为乙腈-O. 2%乙二胺水溶液，体积比为45 :55，紫外检测波长为278nm。本专利技术的特点是采用闪式提取、柱层析与制备型液相色谱法相结合技术制备全能花碱，高效节能，生产周期短，易于产业化。具体实施例方式 下面将结合具体实施方式进一步说明本专利技术，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例I :取滨生全能花干燥鳞茎200g，用1%氨水浸泡4h，晾干，加入闪式提取器中，以90%乙醇溶液为提取溶剂，提取电压为140V，提取时间为90s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液减压回收试剂得浸膏，向浸膏中加氧化铝(100目)拌匀、干燥后装柱，用7倍柱体积的氯仿-丙酮(I: I)混合溶液洗脱，薄层检测，收集全能花碱流分，浓缩得浓缩液。将浓缩液加入甲醇至刚好溶解，溶解后的溶液经O. 45 μ m微滤膜过滤，得到样品溶液取滤液进样，以乙腈-O. 2%乙二胺水溶液为流动相，体积比为45 55,色谱柱以C8键合相为填料，粒径为10 μ m,柱长为15cm、直径为4cm,六通阀进样,进样体积为25ml,控制流速为50ml/min,紫外在线检测，检测波长为278nm，收集目标成分，减压回收试剂得全能花碱42mg，经HPLC检测，纯度76. 5%。实施例2: 取滨生全能花干燥鳞茎500g，用1%氨水浸泡5h，晾干，加入闪式提取器中，以90%乙醇溶液为提取溶剂，提取电压为150V，提取时间为100s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液减压回收试剂得浸膏，向浸膏中加氧化铝(100目)拌匀、干燥后装柱，用8倍柱体积 的氯仿-丙酮(I: I)混合溶液洗脱，薄层检测，收集全能花碱流分，浓缩得浓缩液。将浓缩液加入甲醇至刚好溶解，溶解后的溶液经O. 45 μ m微滤膜过滤，得到样品溶液取滤液进样，以乙腈-O. 2%乙二胺水溶液为流动相，体积比为45 :55，色谱柱以C8键合相为填料，粒径为10 μ m,柱长为15cm、直径为4cm,六通阀进样,进样体积为25ml,控制流速为50ml/min,紫外在线检测，检测波长为278nm，收集目标成分，减压回收试剂得全能花碱97mg，经HPLC检测，纯度79. 4%。实施例3: 取滨生全能花干燥鳞茎500g，用1%氨水浸泡2h，晾干，加入闪式提取器中，以85%乙醇溶液为提取溶剂，提取电压为140V，提取时间为120s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液减压回收试剂得浸膏，向浸膏中加氧化铝(80目)拌匀、干燥后装柱，用6倍柱体积的氯仿-丙酮(I: I)混合溶液洗脱，薄层检测，收集全能花碱流分，浓缩得浓缩液。将浓缩液加入甲醇至刚好溶解，溶解后的溶液经O. 45 μ m微滤膜过滤，得到样品溶液取滤液进样，以乙腈-O. 2%乙二胺水溶液为流动相，体积比为45 :55，色谱柱以C8键合相为填料，粒径为10 μ m,柱长为25cm、直径为4cm,六通阀进样,进样体积为20ml,控制流速为20ml/min,紫外在线检测，检测波长为278nm，收集目标成分，减压回收试剂得全能花碱88mg，经HPLC检测，纯度78. 7%。实施例4: 取滨生全能花干燥鳞茎500g，用1%氨水浸泡6h，晾干，加入闪式提取器中，以95%乙醇溶液为提取溶剂，提取电压为160V，提取时间为90s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液减压回收试剂得浸膏，向浸膏中加氧化铝(100目)拌匀、干燥后装柱，用4倍柱体积的氯仿-丙酮(I: I)混合溶液洗脱，薄层检测，收集全能花碱流分，浓缩得浓缩液。将浓缩液加入甲醇至刚好溶解，溶解后的溶液经O. 45 μ m微滤膜过滤，得到样品溶液取滤液进样，以乙腈-O. 2%乙二胺水溶液为流动相，体积比为45 :55，色谱柱以C8键合相为填料，粒径为10 μ m,柱长为50cm、直径为5cm,六通阀进样,进样体积为50ml,控制流速为150ml/min,紫外在线检测，检测波长为278nm，收集目标成分，减压回收试剂得全能花碱96mg，经HPLC检测，纯度83. 2%。权利要求1.，其特征在于包含以下步骤 (1)取滨生全能花干燥鳞茎，用1%氨水浸泡2-6h，晾干，加入闪式提取器中，以85-95%乙醇溶液为提取溶剂，进行闪式提取，过滤得到提取液； (2)上述提取液浓缩至浸膏，加氧化铝拌匀、干燥后装柱，用氯仿-丙酮混合溶液洗脱，薄层检测，收集全能花碱流分，浓缩； (3)将上述浓缩液采用制备型液相色谱分离，紫外检测器在线监测，收集全能花碱组分，将洗脱液旋转蒸发浓缩，干燥即得产品。2.如权利要求I所述，其特征在于所述步骤(I)中闪式提取电压为140-160V，提取时间为90s-120s。3.如权利要求I所述，其特征在于所述步骤(2)中氧化铝为 80-100目，氯仿-丙酮体积比为I: I，用量为柱体积的4-8倍。4.如权利要求I所述，其特征在于所述步骤(3)中制备型液相色谱的流动相为乙腈-O. 2%乙二胺水溶液，体积比为45 :55，紫外检测波长为278nm。全文摘要本专利技术涉及了，方法步骤是(1)取滨生全能花干燥鳞茎，用饱和1%氨水浸泡2-6h，晾干，加入闪式提取器中，以85-95%乙醇溶液为提取溶剂，进行闪式提取，过滤得到提取液；(2)将提取液浓缩，经氧化铝柱层析；(3)制备型液相色谱分离得到全能花碱。该方法具有快速安全高效节能、不破坏有效成分等特点，适合工业化生产。文档编号C07D491/056GK102850362SQ本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种全能花碱的制备方法，其特征在于包含以下步骤：（1）取滨生全能花干燥鳞茎，用1%氨水浸泡2？6h，晾干，加入闪式提取器中，以85？95%乙醇溶液为提取溶剂，进行闪式提取，过滤得到提取液；（2）上述提取液浓缩至浸膏，加氧化铝拌匀、干燥后装柱，用氯仿？丙酮混合溶液洗脱，薄层检测，收集全能花碱流分，浓缩；（3）将上述浓缩液采用制备型液相色谱分离，紫外检测器在线监测，收集全能花碱组分，将洗脱液旋转蒸发浓缩，干燥即得产品。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：苏刘花，
申请(专利权)人：南京泽朗农业发展有限公司，
类型：发明
国别省市：
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