一种测定食品中无机硒及有机硒的方法技术

本发明专利技术公开了一种测定食品中无机硒及有机硒的方法，它由如下步骤组成：（1）食品中总硒的测定，（2）食品中无机硒的提取，（3）食品中四价硒的直接测定，（4）食品中六价硒的还原测定，（5）结果计算。本发明专利技术操作简便，环境友好型，精确度高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及ー种测定食品中无机硒及有机硒的方法，尤其是通过分别測定总硒、四价硒、六价硒含量，差减得到有机硒含量的方法，属于分析化学领域。
技术介绍
硒是人体必需的微量元素之一，是谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的组成成分，具有抗氧化、抗癌、防衰老、提高人体免疫力、保护心脑血管等作用(Rotruck J T，Pope ALj ^anther H E, et al Selenium: biochemical roie as a component of glutathioneperoxidase. Science, 1973，179，588-590.)，砸的生物学功能的发挥主要依赖于其有机形态。无机硒毒性较大，中毒量与需要量的界限非常接近，而且吸收和利用率差，生物有效性低，因而被严格限制其使用量。有机硒更利于人体吸收利用，生物活性强，毒性低(卢岚，鲁兵，王春娥.保健食品中有机硒和无机硒的分析探讨.中国卫生检验杂志. 2010，20(4) :767-769.),是更高效、安全的人体补硒形式。因此，测定食品中的无机硒、有机硒含量具有重大的意义，不仅能指导消费者科学补硒，还能为食品监瞀部门提供食品安全的监管的技术支持。目前，我国測定有机硒含量的方法主要也是差减法(秦防.植物中有机硒含量的測定.无锡轻エ业大学学报.1998，17(4) :74-77.)，差减法的原理是先利用不同的试剂将待测样品中的有机硒和无机硒分离，因无机硒主要以硒酸根(SeO42-)和亚硒酸根(SeO32-)阴离子形式存在，易溶于水。有机硒主要是与蛋白质、纤维素和碳水化合物中的C、N等结合，以大分子的有机物形态存在，所以可利用环己烷或甲苯等有机溶剂萃取出有机硒，再通过測定酸消解食品和水相提取液測定食品中总硒和无机硒的含量，差减得到有机硒的含量。此方法操作步骤繁琐，精密度差，需要两次消解，所需要的酸用量大，环境影响大，且氨基酸形态的硒依然存在水相中，不能被有机相萃取，当作无机硒的含量測定，实际差减得到的有机硒含量偏低，且此方法所用的环己烷、甲苯等有机溶剂存在一定的毒性。本专利技术直接測定食品中四价硒含量，六价无机硒在温和条件下还原成四价硒后測定，而氨基酸形态的硒本身就是低价态，不受反应影响。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术存在的不足，提供ー种操作简便，环境友好型，精确度高的测定食品中无机硒及有机硒的方法。为达上述目的，本专利技术借助氢化物发生原子荧光光谱或原子吸收光谱对食品中的硒进行定量分析，并通过食品中总硒測定后差减获得有机硒的含量。本专利技术的技术方案是ー种测定食品中无机硒及有机硒含量的方法，其特征在于它由如下步骤组成I.食品中总硒的測定，2.食品中无机硒的提取，3.食品中四价硒的直接測定，4.食品中六价硒的还原測定，5.结果计算。以下对上述技术方案进行进一歩的描述。所述的食品中总硒的测定是參照GB5009. 93-2010的方法。所述的食品中无机硒的提取，是直接用去离子水提取食品中的无机硒。所述的食品中无机硒的提取，是将干燥研磨过的食品样品加入去离子水中超声提取，然后离心取其上清液。所述的食品中无机硒的提取，食品样品干燥研磨粒度为过100目筛，样品与去离子水质量比为1: 1，超声时间为10-50min，离心转速为5000-15000转/分钟，离心时间5_30min。所述的食品中四价硒的直接測定，是取上述上清液过0. 22um的滤膜，利用四价硒不同浓度梯度标准系列做定量标准曲线，利用原子荧光或氢化物发生原子吸收直接测定获得四价硒含量。所述的食品中六价硒的还原測定，是取上述上清液，加入还原剂充分混匀后，静止还原I小时以上，所选还原剂为不破坏上清液中氨基酸形态硒转变为无机硒的温和型还原 齐IJ(如抗坏血酸或碘化钾)，还原剂与上清液质量体积比大于1:10。且利用原子荧光或氢化物发生原子吸收时，六价硒不同浓度梯度的标准溶液系列做同样还原处理。还原后用此标准系列做定量标准曲线对上清液中六价硒做定量。以下是更详细描述的技术方案。(I)食品中总硒的测定參照GB5009. 93-2010的方法。(2)食品中无机硒的提取，因无机硒主要以硒酸根(SeO广)和亚硒酸根(SeO广)阴离子形式存在，易溶于水。因此直接用去离子水提取食品中的无机硒，为使食品中的无机硒全部提取，采用超声提取30 min。秤取经干燥研磨过100目筛的食品样品I g加入10 ml去离子水超声提取30 min,再10000转/分钟,离心20 min,保留上清液。(3)取上清液过0. 22um的滤膜，利用四价硒不同浓度梯度标准系列做定量标准曲线，直接利用原子荧光或氢化物发生原子吸收直接测定获得四价硒含量。(4)取上清液，加入还原剂充分混匀后，静止还原I小时以上，所选还原剂为温和型还原剂如抗坏血酸或碘化钾等，不破坏上清液中氨基酸形态硒转变为无机硒。还原剂与上清液质量体积比大于1:10。且利用原子荧光或氢化物发生原子吸收时，6价硒不同浓度梯度的标准溶液系列做同样还原处理。还原后用此标准系列做定量标准曲线对上清液中六价硒做定量。(5)结果计算 四价硒含量(U g/kg)=上清液测定四价硒浓度(y g/L) *上清液定容体积(ml) /样品质量(g) 六价硒含量(U g/kg)=上清液测定六价硒浓度(U g/L) *上清液定容体积(ml) /样品质量(g) 有机硒含量(U g/kg) =总硒含量(u g/kg) -四价硒含量(u g/kg) -六价硒含量(u g/kg)。本专利技术的优点是ー种操作简便，环境友好型，精确度高。具体实施例方式下面结合实施例进ー步说明本专利技术和效果，但不影响专利技术的保护范围。实施例一 分别用同一浓度同一体积的50 u g/L的四价硒Se(IV)、六价硒Se (VI)、硒代蛋氨酸(SeMet)、硒代半胱氨酸(SeCys)、硒甲基硒半胱氨酸(SeMeCys)标准溶液,加入不同还原齐U，还原I h后上原子荧光測定其含量。结果如下表权利要求1.ー种测定食品中无机硒及有机硒的方法，其特征在于它由如下步骤组成(I)食品中总硒的測定，(2)食品中无机硒的提取，(3)食品中四价硒的直接測定，(4)食品中六价硒的还原測定，(5)结果计算。2.根据权利要求I所述的ー种测定食品中无机硒及有机硒的方法，其特征在于所述的食品中总硒的测定是參照GB5009. 93-2010的方法。3.根据权利要求I所述的ー种测定食品中无机硒及有机硒的方法，其特征在于所述的食品中无机硒的提取，是直接用去离子水提取食品中的无机硒。4.根据权利要求I所述的ー种测定食品中无机硒及有机硒的方法，其特征在于所述的食品中无机硒的提取，是将干燥研磨过的食品样品加入去离子水中超声提取，然后离心取其上清液。5.根据权利要求I所述的ー种测定食品中无机硒及有机硒的方法，其特征在于所述 的食品中无机硒的提取，食品样品干燥研磨粒度为过100目筛，样品与去离子水质量比为1:1，超声时间为10-50min，离心转速为5000-15000转/分钟，离心时间5-30 min。6.根据权利要求I所述的ー种测定食品中无机硒及有机硒的方法，其特征在于所述的食品中四价硒的直接測定，是取上述上清液过0. 22um的滤膜，利用四价硒不同浓度梯度标准系列做本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定食品中无机硒及有机硒的方法，其特征在于：它由如下步骤组成：（1）食品中总硒的测定，（2）食品中无机硒的提取，（3）食品中四价硒的直接测定，（4）食品中六价硒的还原测定，（5）结果计算。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：朱元元，
申请(专利权)人：苏州硒谷科技有限公司，
类型：发明
国别省市：