本发明专利技术公开了一株耐冷菌玫红假裸囊菌及其在制备冷水纤维素酶中的应用。本发明专利技术提供了一株玫红假裸囊菌（Pseudogymnoascus?roseus）HD1031，其保藏号为CGMCC?No.6148。本发明专利技术还提供了玫红假裸囊菌（Pseudogymnoascus?roseus）HD1031?CGMCC?No.6148在制备纤维素酶中的应用。本发明专利技术从中国四川黄龙高山腐殖土筛选出玫红假裸囊菌HD1031，将该菌株进行发酵培养，发酵产物即为纤维素酶，且为冷水纤维素酶，在室温下有较高酶活。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物
,尤其涉及一株耐冷玫红假裸囊菌(Pseudogymnoascusroseus HD1031)及其在制备冷水纤维素酶中的应用。
技术介绍
纤维素酶(cellulase)是ー种能够将纤维素降解为葡萄糖的复合酶系，主要有三个组分组成，即内切葡聚糖酶(endo-0 -I, 4-D-glucanase, EG, EC 3. 2. I. 4),也称CMC酶；外切葡聚糖酶(exo- ^ -I, 4-glucanase, EC3. 2. I. 91)或纤维ニ糖水解酶(cello-biohydrolases, CBH);葡萄糖昔酶(3-1，4-D-glucosidase，BG, EC 3.2. I. 21),也叫水杨甙酶，而且，这三种酶每ー类都会有多个同エ酶。其中，内切酶将长链纤维素从内部切断，外切酶自纤维素链的还原端或非还原端切下ニ糖或寡糖，葡萄糖苷酶将纤维ニ糖或·寡糖水解为葡萄糖。随着纤维素酶在エ业上的广泛应用，如食品、饲料、酿造、造纸，特别是在纺织エ业和生物能源上的应用，纤维素酶已经成为最近十几年酶工程研究的一个热点(中国专利 CN97199686. 5，CN201110362928. O)。到目前为止，已发现了多种能够产生纤维素酶的微生物，涵盖了厌氧与好氧、原核与真核微生物。在产生纤维素酶的微生物中，不同菌株所产纤维素酶具有不同的作用方式与底物特异性。纤维素酶根据其酶学性质与应用环境，又被分为酸性、中性与碱性纤维素酶。其中酸性纤维素酶主要用于生物能源、纺织水洗等；中性纤维素酶主要用于纺织水洗エ业；碱性纤维素酶则可用于洗涤剂中。エ业生产上常用的产纤维素酶微生物是常温、中温丝状真菌，它们能够产生完整的纤维素酶系，可以将结晶纤维素完全降解为葡萄糖，如木霉(Trichoderma sp.)、青霉(Penicillium sp.)、腐质霉(Humicola sp.)等等。上述菌株产生的纤维素酶大多需要在较高的温度条件下才能发挥较好的效能，在室温甚至较低的温度下，它们的酶活力都非常低。冷水纤维素酶(或低温纤维素酶)则在室温或低温下具有较高的酶活，在实际应用上，较低的温度意味着较低的能耗；特别是用冷水酶对牛仔布进行水洗处理，会产生较常温酶处理更好的质感与弾性；同时，低温酶的失活处理也较容易。因此，开发研究冷水纤维素酶在エ业上具有重要的意义。低温酶往往是由低温菌产生的。根据Moyer与Morita的定义将适冷菌分为耐冷菌(Psychrotrophs)与嗜冷菌(Psychrophiles) (Moyer&Morita, Psychrophiles andPsycherotrophs, Encyclopedia of Life Sciences, John Wiley & Sons, p 1-6，2007),以最适生长温度与耐温上限区分耐冷菌在0-5°C可以生长，最适生长温度>15°C，耐温上限在20-25°C之间；嗜冷菌在0-20°C可以生长，最适生长温度<15°C，耐温上限<20°C。目前发表过的低温纤维素酶产酶菌株有十几株，大多来自极地、海洋或高山等自然低温生境中的微生物，产酶菌种有交替假单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)、青霉(Penicillium sp.)、木霉(Trichoderma sp.)、链霉菌(Streptomyces sp.)、缺陷短波单胞菌(Brevundimonassp.)、地丝霉(Geomyces sp.)等(中国专利 CN200710190406. 0，CN200610002014. 2，CN201010174183. O)。
技术实现思路
本专利技术的ー个目的是提供一株玫红假裸囊菌(Pseudogymnoascus roseus)HD1031。本专利技术提供的玫红假裸囊菌(Pseudogymnoascus roseus) HD1031,其保藏号为CGMCC No. 6148。上述的玫红假裸囊菌(Pseudogymnoascusroseus)HD1031 CGMCC No. 6148在制备纤维素酶中的应用也是本专利技术保护的范围。上述应用为发酵上述的玫红假裸囊菌(Pseudogymnoascus roseus)HD1031 CGMCC No. 6148，收集发酵产物，即得到纤维素酶。上述纤维素酶为冷水纤维素酶(或者低温纤维素酶),上述冷水纤维素酶具体为在4°C -50°C具有较高酶活力，优选20-30°C，其最高表观酶活力在50°C。上述纤维素酶在PH3. 0-8. 0具有较高酶活力，优选pH4. 0-6. 0，其最高表观酶活力在pH6. O。上述应用中，所述发酵的条件如下10-25°C、100-300r/min震荡培养3-15天；所述发酵采用的培养基为以纤维素为唯一或主要碳源的培养基；所述以纤维素为唯一或主要碳源的培养基具体按照如下方法制备将微晶纤维素、硫酸铵、蛋白胨、磷酸ニ氢钾、氯化钙、硫酸镁和水混合，得到培养基；所述微晶纤维素在所述培养基中的浓度为10-40g/L ;所述硫酸铵在所述培养基中的浓度为l-10g/L ;所述蛋白胨在所述培养基中的浓度为l_20g/L ;所述磷酸ニ氢钾在所述培养基中的浓度为0. 5-10g/L ;所述氯化钙在所述培养基中的浓度为0. 1-lg/L ;所述硫酸镁在所述培养基中的浓度为0. l_2g/L。上述应用中，所述发酵的条件如下16-17°C、160r/min震荡培养10-12天；所述微晶纤维素在所述培养基中的浓度为20g/L ;所述硫酸铵在所述培养基中的浓度为5g/L ;所述蛋白胨在所述培养基中的浓度为10g/L ;所述磷酸ニ氢钾在所述培养基中的浓度为I. 5g/L ;所述氯化钙在所述培养基中的浓度为0. 3g/L ;所述硫酸镁在所述培养基中的浓度为0. 3g/L。本专利技术的另ー个目的是提供ー种制备纤维素酶的方法。本专利技术提供的方法,包括如下步骤发酵上述的玫红假裸囊菌(Pseudogymnoascusroseus) HD1031 CGMCC No. 6148，收集发酵产物，即得到纤维素酶。上述方法中，所述发酵的条件如下10-25°C、100-300r/min震荡培养3_15天；所述发酵的条件具体如下16-17°C、160r/min震荡培养10-12天；所述发酵采用的培养基为以纤维素为唯一或主要碳源的培养基；所述以纤维素为唯一或主要碳源的培养基具体按照如下方法制备将微晶纤维素、硫酸铵、蛋白胨、磷酸ニ氢钾、氯化钙、硫酸镁和水混合，得到培养基；所述微晶纤维素在所述培养基中的浓度为10-40g/L，具体为20g/L ;所述硫酸铵在所述培养基中的浓度为l-10g/L，具体为5g/L ;所述蛋白胨在所述培养基中的浓度为l_20g/L，具体为10g/L ;所述磷酸ニ氢钾在所述培养基中的浓度为0. 5-10g/L，具体为I. 5g/L ;所述氯化钙在所述培养基中的浓度为0. 1-lg/L，具体为0. 3g/L ;所述硫酸镁在所述培养基中的浓度为0. l-2g/L，具体为0. 3g/L。上述方法中，在所述收集发酵产物后还包括如下步骤离心所述发酵产物，收集上清液得到所述纤维素酶。由上述方法制备的纤维素酶也是本专利技术本文档来自技高网...
【技术保护点】
玫红假裸囊菌（Pseudogymnoascus？roseus）HD1031，其保藏号为CGMCC？No.6148。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：石家骥，韩龙，杨敬，钞亚鹏，张国青，钱世钧，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。