一种有效快速提取海洋微藻RNA的方法技术

本发明专利技术涉及一种有效快速提取海洋微藻RNA的方法，其步骤如下：将液氮研磨后的微藻样品加入到温度为60-65℃的十六烷基三甲基溴化铵和β-巯基乙醇的混合提取液中，再在60-65℃加热；加热结束后再加入氯仿、异戊醇混合液，混合后离心；取上清液后再次加入氯仿、异戊醇混合液；混合后离心；取上清液后加入LiCl，混均后放入-80℃条件下沉淀，再离心去除上清液，将沉淀用75%的乙醇洗涤1-2次，待乙醇挥发完全后加入DEPC水溶解完成提取；其中β-巯基乙醇是在使用的时候才与十六烷基三甲基溴化铵混合制成混合提取液。本发明专利技术克服了海洋微藻含盐量高和所含糖类物质较多对提取植物RNA的影响，较市场上的植物RNA提取试剂盒提取效果更好，不出现杂带，操作步骤简便、快速、效果好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微藻开发利用
，特别是涉及一种有效快速的提取海洋微藻RNA的方法。
技术介绍
海洋微藻是水体生态系统中主要的初级生产者，占海洋生物物种的40. 86%，有体积小、数量大、细胞结构简单、生长周期短、生物量大、光合效率高、适应力强、不受气候限制、易培养等优点，因此受到了人们的广泛关注。微藻中所含有的微藻油脂、多糖、色素等在水产养殖饵料、能源、医药、保健品、化工和环保等方面具有重要经济价值，因此开发和利用海洋微藻具有重要的意义。而且，微藻中含有大量与有效活性成分相关的基因，因此提取其RNA,再反转录成cDNA进行PCR扩增目的基因的方法对于研究相关基因提供了有效途径。但由于海洋微藻含盐量高和糖类物质较多等特点，采用提取动物RNA和陆生植物RNA的试剂 盒效果不够理想。因此，开发出一种快速高效提取海洋微藻RNA的新方法是十分必要的。目前市场上还没有专门针对海洋微藻的RNA提取试剂盒，而采用已有的植物RNA提取试剂盒的提取效果并不好。原因可能是由于海洋微藻含盐量高和所含糖类物质较多，从而影响其RNA的提取效果。且现有的方法大都操作步骤繁琐、需要时间较长、价格较高，而且电泳本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种有效快速提取海洋微藻RNA的方法，其步骤如下：将液氮研磨后的微藻样品加入到温度为60？65℃的十六烷基三甲基溴化铵和β？巯基乙醇的混合提取液中，再在60？65℃加热；加热结束后再加入氯仿、异戊醇混合液，混合后离心；取上清液后再次加入氯仿、异戊醇混合液；混合后离心；取上清液后加入LiCl，混均后放入？80℃条件下沉淀，再离心去除上清液，将沉淀用75%的乙醇洗涤1？2次，待乙醇挥发完全后加入DEPC水溶解完成提取；其中β？巯基乙醇是在使用的时候才与十六烷基三甲基溴化铵混合制成混合提取液。

【技术特征摘要】
1.一种有效快速提取海洋微藻RNA的方法，其步骤如下将液氮研磨后的微藻样品加入到温度为60-65°C的十六烷基三甲基溴化铵和巯基乙醇的混合提取液中，再在60-65°C加热；加热结束后再加入氯仿、异戊醇混合液,混合后离心；取上清液后再次加入氯仿、异戊醇混合液；混合后离心；取上清液后加入LiCl，混均后放入-80°C条件下沉淀，再离心去除上清液，将沉淀用7...

【专利技术属性】
技术研发人员：王帅，郑立，李林，
申请(专利权)人：国家海洋局第一海洋研究所，
类型：发明
国别省市：