一种黄花倒水莲的组织培养繁殖方法技术

本发明专利技术涉及植物组织培养技术领域，提供一种黄花倒水莲的组织培养繁殖方法，利用该方法能在短期内获得大量的黄花倒水莲组培苗，有效的解决黄花倒水莲产量低、采收困难、野生资源有限导致资源严重短缺等问题，同时为其优质苗木的规模化生产乃至资源培育与利用奠定基础，本发明专利技术主要包括以下步骤：（1）外植体采集及消毒；（2）不定芽的诱导；（3）不定芽增殖培养；（4）不定芽生根培养；（5）炼苗及移栽。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及植物组织培养
，具体涉及ー种黄花倒水莲的组织培养繁殖方法。
技术介绍
黄花倒水莲(Polygala fallax Hemsl.)属远志科(Polygalaceae)远志属(Po Iygala)植物，别名黄花參、鸡仔树、吊吊黄、黄花吊水莲、观音串、黄花大远志等,分布于湖南、福建、广西、江西、广东和云南等地，生于山坡疏林下或沟谷丛林中。黄花倒水莲属珍贵中药材，药用其全草；具有补益、強壮、祛湿、散瘀功效，主治虚弱虚肿、急慢性肝炎、腰腿酸痛、跌打损伤；其提取物具活血、抗炎、抗血脂作用，同时在小鼠上实验其具增强免疫及耐缺氧等作用。 黄花倒水莲药用价值早被民间所认知，加之近年来对其药用的日益重视，市场需求量大，而目前栽培仍以种子繁殖为主，种子产量低，采收困难，野生资源亦有限，导致资源严重短缺。目前国内外关于黄花倒水莲研究主要集中于其药用成分及药用机理等方面，而组织培养方面，仅同属植物远志有相关报道；张杭颖等近年来有开展黄花倒水莲扦插、组织培养等试验研究，但未见具体报道，亦未见有规模化种植等相关报道。
技术实现思路
因此，针对上述问题，本专利技术提供ー种黄花倒水莲的组织培养繁殖方法，利用该方法能在短期内获得大量的黄花倒水莲组培苗，有效的解决黄花倒水莲产量低、采收困难、野生资源有限导致资源严重短缺等问题，同时为其优质苗木的规模化生产乃至资源培育与利用奠定基础。ー种黄花倒水莲的组织培养繁殖方法，包括以下步骤 (1)外植体采集及消毒取黄花倒水莲当年生带腋芽幼嫩茎段作为外植体，用洗洁精浸泡处理10 min，用软毛刷轻轻刷洗茎段表面，流水冲洗30 min，置于超净工作台上，剪成带1-2个节间的茎段，用质量浓度为0. 1%的KMn04浸泡处理5min，无菌水冲洗2遍，体积浓度为75%的こ醇浸泡处理20 S，再用质量浓度为0. 1%的升汞浸泡处理10 min，无菌水冲洗6遍，获得无菌材料； (2)不定芽的诱导将上述无菌材料接种于不定芽诱导培养基上，在温度25±1で，光照时间11 h/d，光照強度3000 LX的条件下诱导黄花倒水莲不定芽，诱导培养30天； (3)不定芽増殖培养将诱导出的黄花倒水莲不定芽转接至不定芽増殖培养基中进行不定芽的增殖培养，培养条件为温度25± Iで，光照时间11 h/d，光照强度3000 LX，增殖培养25天； (4)不定芽生根培养将增殖培养的不定芽转入不定芽生根培养基中进行生根培养，培养条件为温度25±1で，光照时间11 h/d，光照強度3000 LX，生根培养25天即可获得组培苗； (5)炼苗及移栽待组培苗80%长出根原基时将其移至大棚进行炼苗，7天后将瓶苗轻轻夹出，洗浄根部培养基，用质量浓度为0. 1%的代森猛锌浸泡处理2 3 min，阴干，待植株枝干上的水分阴干好后，移栽入事先已用质量浓度为0. 1%的高锰酸钾消毒的移栽基质中，保持环境温度25±1で，喷雾保湿，使空气 湿度保持在85-95%，覆盖遮阴率70%的遮阳网，每7天喷洒一次广谱杀菌剂，30天后长出新根时浇一次两倍MS大量元素溶液。进ー步的改进是所述步骤(2)中的不定芽诱导培养基为1/2MS+BA1. 0-3. 0 mg/L+NAA0. 1-0. 3 mg/L，其中，不定芽诱导培养基中添加白砂糖30 g/L，卡拉胶6. 5 g/L，调节不定芽诱导培养基的PH使pH=5. 8-6. O。进ー步的改进是所述步骤(3)中的不定芽增殖培养基为WPM+BA1. 0-3. Omg/L+NAA 0. 1-0. 3 mg/L L，不定芽增殖培养基中添加白砂糖30 g/L，卡拉胶6. 5 g/L，调节不定芽增殖培养基的PH使pH=5. 8-6. O。进ー步的改进是所述步骤(4)中的不定芽生根培养基为1/2WPM+IBA 0. 1-0. 3mg/L+ABT 0.2-0.4 mg/L,不定芽生根培养基中添加白砂糖15 g/L,卡拉胶6. 5 g/L,调节pH值 5. 8-6. O。进ー步的改进是所述步骤(5)中的移栽基质及其重量比为泥炭土 黄泥土 珍珠岩=2 1 :1。通过采用前述技术方案，本专利技术的有益效果是本专利技术通过取以当年生幼嫩带腋芽(未萌发)茎段作为外植体，经消毒获得无菌材料后，通过诱导不定芽，再经不定芽的增殖、生根从而获得组培苗，组培苗经过驯化获得栽培苗，从外植体的诱导到获得存活的黄花倒水莲栽培苗只需110天，大大加快黄花倒水莲的繁殖速度。本专利技术中黄花倒水莲不定芽的诱导率可达95. 1%，同时不定芽每月的增殖系数为6. 12，生根率为95. 67%，移栽成活率可达92. 6%，因此可以在短期内提供大量的黄花倒水莲栽培苗，决解目前黄花倒水莲产量低、采收困难、野生资源亦有限、导致资源严重短缺等问题，同时为其优质苗木的规模化生产乃至资源培育与利用奠定基础。具体实施例方式以下将结合具体实施例来详细说明本专利技术的实施方式，借此对本专利技术如何应用技术手段来解决技术问题，并达成技术效果的实现过程能充分理解并据以实施。本专利技术的实施例为 ー种黄花倒水莲的组织培养繁殖方法，包括以下步骤 (1)外植体采集及消毒于4月睛天取黄花倒水莲当年生带腋芽幼嫩茎段作为外植体，用洗洁精浸泡处理10 min，用软毛刷轻轻刷洗茎段表面，流水冲洗30 min，置于超净工作台上，剪成带1-2个节间的茎段，用质量浓度为0. 1%的KMn04浸泡处理5 min，无菌水冲洗2遍，体积浓度为75%的こ醇浸泡处理20 S，再用质量浓度为0. 1%的升汞浸泡处理10 min,无菌水冲洗6適，获得无菌材料； (2)不定芽的诱导将上述无菌材料接种于不定芽诱导培养基上，在温度25±1で，光照时间11 h/d，光照強度3000 LX的条件下诱导黄花倒水莲不定芽，诱导培养30天；所述不定芽诱导培养基为1/2MS+BA2.0 mg/L+NAAO. 2 mg/L，不定芽诱导培养基中添加白砂糖30g/L,卡拉胶6. 5 g/L,调节不定芽诱导培养基的pH使pH=5. 8-6. O ； (3)不定芽増殖培养将诱导出的黄花倒水莲不定芽转接至不定芽増殖培养基中进行不定芽的增殖培养，培养条件为温度25± Iで，光照时间11 h/d，光照强度3000 LX，增殖培养25天；不定芽增殖培养基为WPM+BA2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L L，不定芽增殖培养基中添加白砂糖30 g/L,卡拉胶6. 5 g/L,调节不定芽増殖培养基的pH使pH=5. 8-6. 0 ； (4)不定芽生根培养将增殖培养的不定芽转入不定芽生根培养基中进行生根培养，培养条件为温度25±1で，光照时间11 h/d，光照強度3000 LX，生根培养25天即可获得组培苗；不定芽生根培养基为1/2WPM+IBA 0.2 mg/L+ABT 0. 3mg/L，不定芽生根培养基中添加白砂糖15 g/L,卡拉胶6. 5 g/L,调节pH值5. 8-6. 0 ； (5)炼苗及移栽待组培苗80%长出根原基时将其移至大棚进行炼苗，7天后将瓶苗轻轻夹出，洗浄根部培养基，用质量浓度为0. 1%的代森猛锌浸泡处理2 3 min，阴干，待植株枝干上的水分阴干好后，移栽入事先已用质量浓度为0. 1%的高锰酸钾消毒的移栽基质中，所述移栽基质及其重本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.ー种黄花倒水莲的组织培养繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤 (1)外植体采集及消毒取黄花倒水莲当年生带腋芽幼嫩茎段作为外植体，用洗洁精浸泡处理10 min，用软毛刷轻轻刷洗茎段表面，流水冲洗30 min，置于超净工作台上，剪成带1-2个节间的茎段，用质量浓度为0. 1%的KMn04浸泡处理5min，无菌水冲洗2遍，体积浓度为75%的こ醇浸泡处理20 S，再用质量浓度为0. 1%的升汞浸泡处理10 min，无菌水冲洗6遍，获得无菌材料； (2)不定芽的诱导将上述无菌材料接种于不定芽诱导培养基上，在温度25±1で，光照时间11 h/d，光照強度3000 LX的条件下诱导黄花倒水莲不定芽，诱导培养30天； (3)不定芽増殖培养将诱导出的黄花倒水莲不定芽转接至不定芽増殖培养基中进行不定芽的增殖培养，培养条件为温度25± Iで，光照时间11 h/d，光照强度3000 LX，增殖培养25天； (4)不定芽生根培养将增殖培养的不定芽转入不定芽生根培养基中进行生根培养，培养条件为温度25±1で，光照时间11 h/d，光照強度3000 LX，生根培养25天即可获得组培苗； (5)炼苗及移栽待组培苗80%长出根原基时将其移至大棚进行炼苗，7天后将瓶苗轻轻夹出，洗浄根部培养基，用质量浓度为0. 1%的代森猛锌浸泡处理2 3 min，阴干，待植株枝干上的水分阴干好后，移栽入事先已用质量浓度为0. 1%...

【专利技术属性】
技术研发人员：林文革，吴美华，张东海，陈细萍，曹冬萍，温亚锋，
申请(专利权)人：地缘厦门生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：