从牛肺中提取肝素钠的方法技术

技术编号:7679240 阅读:985 留言:0更新日期:2012-08-16 01:58
本发明专利技术涉及一种从牛肺中提取肝素钠的方法,包括如下步骤:(1)制浆,(2)酶解,(3)灭酶,(4)提纯,(5)冻干燥。本发明专利技术解决了牛肺生产肝素钠时酶解液过滤困难,避免了长时间树脂吸附、洗涤洗脱和树脂再生等繁琐工序,同时克服了酸碱废液污染环境等问题,简化生产工艺,降低生产成本,提高产品的收率与质量,产品收率平均为4.2万u/kg肺,效价达70-120u/mg,减少环境污染,为规模化生产牛肺肝素钠提供有效生产保障。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物制品加工领域,特别涉及一种
技术介绍
肝素钠是哺乳动物体内含的一种粘多糖,肝素钠与蛋白质结合一起存在于肠粘膜、肺、肝等器官内,肝素钠与蛋白质分离提取后,具有抗凝血、抗血栓、降血脂、抗炎等多种生理恬性,是防治动脉粥样硬化、心脑血管疾病的显效药物。目前国内没有形成规模化的生产,主要是过滤困难,产品收率低,都是在沿用猪小肠生产肝素钠的传统方法,即树脂吸附、洗涤、洗脱和树脂再生处理,造成环境污染,而且生产成本高,产品产率低、效价低,这种方法很难规模化。
技术实现思路
本专利技术的目的在于避免现有技术的缺陷提供一种。为实现上述目的,本技术采取的技术方案为一种,其特征在于包括如下步骤(I)制浆将牛肺中大的气管和外部皮质脂肪剔除,将其绞碎,匀化成浆液,牛肺水=I 2-3,将pH调至9 ;(2)酶解将上述浆液加热至39_41°C,按浆液质量的I. 5-3. 5%加入蛋白酶,进行酶解3-4小时,监测PH的变化,控制pH为7. 5-8. 5,过滤酶解液,然后按浆液质量的0. 5-1. 5 %加入肝素钠专用复合酶,将温度升到49-51度,控制pH为7. 5-8. 5,保温酶解3-3. 5小时,监测酶解液效价不再变化酶解结束;(3)灭酶将步骤(2)得到的酶解液加入蛋白沉淀剂及NaCL,蛋白沉淀剂加入量为浆液质量的4-4. 5%, NaCL加入量为浆液质量的1_2%,升温70_80°C,保温0. 5-1小时,按浆液质量的0. 5-1%加入氯化钙沉淀剂,沉淀1-2小时,将温度降至50°C ;(4)提纯先经过自动过滤分离器进行一级提纯、其次经过粗滤器进行二级提纯、再经过细滤器进行三级提纯,最后经过精滤器进行四级提纯,得分离液;(5)冻干燥将上述分离液进一步浓缩,再冻干燥得肝素钠。所述一级提纯是采用自动过滤分离器,将大于0. 01毫米的机械杂质及颗粒蛋白除去,得到一级纯化分离液,并回收蛋白。所述二级提纯是将一级纯化分离液加入到粗滤器中,清除大于0. 09微米的杂蛋白,得到二级纯化分离液,定期从浓缩液中回收蛋白。所述三级提纯是将二级纯化分离液加入到细滤器进行分离,清除其中大于0. 03微米的杂蛋白,得到三级纯化分离液,定期从浓缩液中回收蛋白。所述四级提纯是将三级纯化分离液加入到精滤器进行分离,清除微小分子蛋白、氨基酸、无机盐等,得到四级纯化分离液,定期从浓缩液中回收蛋白。本专利技术的有益效果是解决牛肺生产肝素钠时酶解液过滤困难,避免了长时间树脂吸附、洗涤洗脱和树脂再生等繁琐工序,同时克服了酸碱废液污染环境等问题,简化生产工艺,降低生产成本,提高产品的收率与质量,产品收率平均为4. 2万u/kg肺,效价达70-120u/mg,减少环境污染,为规模化生产牛肺肝素钠提供有效生产保障。附图说明 图I为本专利技术四级提纯流程图;图中1-酶解液高位储罐,2-自动过滤分离器,3a_ 二级循环桶,3b_三级循环桶,3c-四级循环桶,4a-二级增压泵,4b-三级增压泵,4c-四级增压泵,5-粗滤器,6-细滤器,7a- 一号精滤器,7b- 二号精滤器,7c-三号精滤器。注本专利技术涉及的四级提纯装置与本申请同日申请了技术专利。具体实施例方式以下结合附图对本专利技术的原理和特征进行描述,所举实例只用于解释本专利技术,并非用于限定本专利技术的范围。实施例I :见图1,一种,其特征在于包括如下步骤(I)制浆将牛肺中大的气管和外部皮质脂肪剔除,将其绞碎,匀化成浆液,牛肺水=I 2-3,将pH调至9 ;(2)酶解将上述浆液加热至39_41°C,按浆液质量的1.5-3. 5%加入蛋白酶,进行酶解3-4小时,监测PH的变化,控制pH为7. 5-8. 5,过滤酶解液,然后按浆液质量的0. 5-1. 5 %加入肝素钠专用复合酶,将温度升到49-51度,控制pH为7. 5-8. 5,保温酶解3-3. 5小时,监测酶解液效价不再变化酶解结束;(3)灭酶将步骤⑵得到的酶解液加入蛋白沉淀剂及NaCL,蛋白沉淀剂加入量为浆液质量的4-4. 5%, NaCL加入量为浆液质量的1_2%,升温70_80°C,保温0. 5-1小时,按浆液质量的0. 5-1%加入氯化钙沉淀剂,沉淀1-2小时,将温度降至50°C ;(4)提纯先经过自动过滤分离器进行一级提纯、其次经过粗滤器进行二级提纯、再经过细滤器进行三级提纯,最后经过精滤器进行四级提纯,得分离液;(5)冻干燥将上述分离液进一步浓缩,再冻干燥得肝素钠。所述一级提纯是采用自动过滤分离器,将大于0. 01毫米的机械杂质及颗粒蛋白除去,得到一级纯化分离液,并回收蛋白。所述二级提纯是将一级纯化分离液加入到粗滤器中,清除大于0. 09微米的杂蛋白,得到二级纯化分离液,定期从浓缩液中回收蛋白。在于所述三级提纯是将二级纯化分离液加入到细滤器进行分离,清除其中大于0. 03微米的杂蛋白,得到三级纯化分离液,定期从浓缩液中回收蛋白。所述四级提纯是将三级纯化分离液加入到精滤器进行分离,清除微小分子蛋白、氨基酸、无机盐等,得到四级纯化分离液,定期从浓缩液中回收蛋白。以上所述仅为本专利技术的较佳实施例,并不用以限制本专利技术,凡在本专利技术的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本专利技术的保护范围之内。权利要求1.一种,其特征在于包括如下步骤 (1)制浆将牛肺中大的气管和外部皮质脂肪剔除,将其绞碎,匀化成浆液,牛肺水=I 2-3,将 pH 调至 9 ; (2)酶解将上述浆液加热至39-41°C,按浆液质量的I. 5-3. 5%加入蛋白酶,进行酶解3-4小时,监测PH的变化,控制pH为7. 5-8. 5,过滤酶解液,然后按浆液质量的O. 5-1. 5%加入肝素钠专用复合酶,将温度升到49-51度,控制pH为7. 5-8. 5,保温酶解3-3. 5小时,监测酶解液效价不再变化酶解结束; (3)灭酶将步骤(2)得到的酶解液加入蛋白沉淀剂及NaCL,蛋白沉淀剂加入量为浆液质量的4-4. 5%, NaCL加入量为浆液质量的1_2%,升温70_80°C,保温O. 5-1小时,按浆液质量的O. 5-1%加入氯化钙沉淀剂,沉淀1-2小时,将温度降至50°C ; (4)提纯先经过自动过滤分离器进行一级提纯、其次经过粗滤器进行二级提纯、再经过细滤器进行三级提纯,最后经过精滤器进行四级提纯,得分离液; (5)冻干燥将上述分离液进一步浓缩,再冻干燥得肝素钠。2.如权利要求I所述的,其特征在于所述一级提纯是采用自动过滤分离器,将大于O. Ol毫米的机械杂质及颗粒蛋白除去,得到一级纯化分离液,并回收蛋白。3.如权利要求I所述的,其特征在于所述二级提纯是将一级纯化分离液加入到粗滤器中,清除大于O. 09微米的杂蛋白,得到二级纯化分离液,定期从浓缩液中回收蛋白。4.如权利要求I所述的,其特征在于所述三级提纯是将二级纯化分离液加入到细滤器进行分离,清除其中大于O. 03微米的杂蛋白,得到三级纯化分离液,定期从浓缩液中回收蛋白。5.如权利要求I所述的,其特征在于所述四级提纯是将三级纯化分离液加入到精滤器进行分离,清除微小分子蛋白、氨基酸、无机盐等,得到四级纯化分离液,定期从浓缩液中回收蛋白。全文摘要本专利技术涉及一种,包括如下步骤(1)制浆,(2)酶解,(3)灭酶,(4)提纯本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:徐殿英李作红陈勇司建奎
申请(专利权)人:白银富瑞康生物制品有限公司
类型:发明
国别省市:

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