分泌抗水稻黑条矮缩病毒单抗杂交瘤细胞株及其单抗应用制造技术

本发明专利技术公开了一种分泌抗水稻黑条矮缩病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株及其单抗的应用。用原核表达的方法表达水稻黑条矮缩病毒（RBSDV）的外壳蛋白CP为抗原免疫BALB/c小鼠，经细胞融合、筛选、克隆，获得1株能稳定传代并分泌抗RBSDV单克隆抗体（MAb）的杂交瘤细胞株5G1，其保藏号为CGMCCNo.5537。5G1单克隆抗体腹水间接ELISA效价达10-6以上，抗体类型及亚类为IgG1，kappa链。该株细胞分泌的单抗与RBSDV的外壳蛋白有特异免疫结合反应。利用5G1单抗为核心建立的检测稻飞虱和水稻中RBSDV的dot-ELISA检测方法，当单头灰飞虱稀释到1600?L时，病叶1:160倍稀释(w/v,g/mL)时仍能检测到病毒。抗RBSDV单抗的制备及其检测方法的建立为该水稻病毒病的诊断、预报及科学防控提供技术和物质支撑。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种分泌抗水稻黑条矮缩病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株及其单抗的应用。
技术介绍
水稻黑条矮缩病曾于1960年代中期在浙江及华东诸省市不少地区的稻、麦和玉米等禾谷类粮食作物上严重为害，其中浙江发病较重致使当时以东阳为中心的浙中玉米种植区被迫改变栽培制度，此后20年发病面积迅速下降直至70年代销声匿迹。近年来由于受耕作栽培制度改变、气候变暖、灰飞虱暴发等多种因素影响导致黑条矮缩病在浙江、上海、江苏、安徽、江西等地发生、流行。水稻黑条矮缩病由水稻黑条矮缩病毒(Rice black streaked dwarf virus, RBSDV)引起，该病毒属于呼肠孤病毒科(Reoviridae)斐济病毒属(Fijivirus)。该病毒可侵染水稻、大麦、小麦、玉米、高粱、马唐、白草和稗草等多种禾本科作物和杂草，引起水稻的黑条矮缩病和玉米的矮缩病。病毒粒体球状，直径70 75 nm。病毒基因组为双链 RNA(dsRNA)，共10个片段，由大到小分别命名为SI S10，其中SlO编码病毒的外壳蛋白。 细胞质中病毒粒子以三种形式存在一种是分散或不规则聚集，另一种是有规则的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：吴建祥，周雪平，倪跃群，刘欢，饶黎霞，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：