当前位置: 首页 > 专利查询>樊学军专利>正文

快速检测粪便中沙门菌、志贺菌和大肠杆菌的方法技术

技术编号:7304030 阅读:314 留言:0更新日期:2012-04-28 07:34
本发明专利技术要解决的技术问题是本领域目前难于快速检测解决粪便样品中沙门菌、志贺菌或大肠杆菌O157:H7。本发明专利技术解决上述技术问题的技术方案是提供一种用于检测离体细菌中的上述细菌的多重PCR引物组及快速检测方法。本发明专利技术提供的检测离体粪便中沙门菌和志贺菌的多重PCR引物组,包含针对沙门菌invA基因的引物对以及针对志贺菌ipaH基因的引物对,另外还提供了使用上述引物组进行多重PCR扩增的方法。与传统方法相比,本发明专利技术方法具有快速、准确、廉价等特点,能在12小时内完成对粪便中沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157:H7的检测,具有很好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生化检测领域,具体涉及一种。
技术介绍
沙门菌(Salmonella)是在公共卫生学上具有重要意义的常见人畜共患肠道病原菌,可引起食物中毒、胃肠炎、菌血症、肠热症等疾病,因此世界卫生组织(WHO)将沙门菌列入具有严重危害和中等危害的食物传播性病原菌;志贺菌(Shigella)是引起人类细菌性痢疾的病原菌,分别为痢疾志贺菌、福氏志贺菌、鲍氏志贺菌和宋内志贺菌,可引起食源性暴发,临床表现通常为带血腹泻,主要流行于发展中国家,全世界每年发病数超过2亿;大肠杆菌0157:H7 Escherichia coli 0157:H7)是能引起人出血性腹泻和肠炎的大肠杆菌, 易继发溶血性尿毒综合症和血栓性血小板减少性紫癜并发症,人群普遍易感,自美国1982 年首次爆发流行以来,全球各地均有发生,1997年世界卫生组织将大肠杆菌0157 :H7病列为新的食源性疾病。这三种肠道病原菌在感染者的粪便中大量存在,也可能出现于健康携带者粪便中,易污染食品和水源,引起该类疾病的流行,因此,快速检测粪便及其它样品中这三种肠道病原菌,对预防和控制疾病发生和流行至关重要。但常规检测这些致病菌需分离培养、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测离体粪便中沙门菌和志贺菌的多重PCR引物组,其特征在于包含以下引物对针对沙门菌invA基因的引物对上游引物 5 ‘ -TATCGCCACGTTCGGGCAA-3 ‘下游引物 5 ‘ -TCATCGCACCGTCAAAGGAACC-3 ‘;以及针对志贺菌ipaH基因的引物对上游引物 5 ‘ -GTTCCTTGACCGCCTTTCCGATACCGTC-3 ‘下游引物5 ‘ -GCCGGTCAGCCACCCTCTGAGAGTAC-3 ‘。2.根据权利要求1所述的多重PCR引物组,其特征在于还包括针对大肠杆菌0157:H7 的rfbE基因的的引物对上游引物 5 ‘ -CACGAAAACGTGAAATTGCTGATATT-3 ‘;下游引物5 ‘ -TCGATGAGTTTATCTGCAAGGTGATTC-3 ‘。3.快速检测离体粪便中沙门菌及志贺菌的方法,其特征在于包括以下步骤a、粪便样本接种SS肉汤,37°C下进行增菌培养8 M小时,分离获取其中的细菌并提取其DNA模板;b、将步骤a中获得的DNA模板使用权利要求1中所述的多重PCR扩增引物组进行多重 PCR扩增得到扩增产物;c、检测扩增产物,判断样品中是否含有沙门菌或志贺菌。4.快速检测离体粪便中沙门菌、志贺菌及大肠杆菌0157:H7的方法,其特征在于包括以下步骤a、粪便样本分别接种SS肉汤和mEC肉汤,37°C下进行增菌培养8 M小时,分离获取其中的细菌并提取其DNA模板;b、将步骤a中获得的DNA模板使用权利要求2中所述的多重PC...

【专利技术属性】
技术研发人员:樊学军田绿波杨雨陈肖潇石莹
申请(专利权)人:樊学军田绿波杨雨陈肖潇石莹
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1
相关领域技术