一种甜角快速繁殖方法技术

一种甜角快速繁殖方法。将选洗干净的甜角种子冷藏灭菌处理后接种于无菌苗培养基诱导产生无菌苗，无菌苗的子叶接入愈伤诱导分化培养基培养，得到分化芽再转入增殖培养基，增殖培养形成不定芽后接入生根培养基进行生根培养，得到生根苗经过炼苗得到甜角再生植株，本发明专利技术可高效诱导不定芽，具有再生植株变异小和遗传稳定性高的优点，再生植株成活率达90%以上，达到快速繁殖的目的。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物离体组织培养方法
，特别涉及植物甜角的快速繁殖方法。
技术介绍
酸角又名罗望子、罗晃子、酸角(Tamarindus indica Lirm.)、酸豆等(中国植物志，北京 1988. 39)，属苏木科(Caesalpiniaceae)酸豆属(Tamarindus Linn.)的一种常绿大乔木，是单属种植物。酸角原产于非洲东部和亚洲的热带地区，在热带地区和南亚热带地区分布很广，我国南方各省如台湾、海南、福建、广东、广西、四川、云南、贵州等地均有分布，尤以海南为多，国内的酸角绝大部分处于零星的野生或半野生状态，面积估算不到830 公顷，大量老酸角树遭到砍伐，资源毁坏严重。甜角是酸角的一种，果实味道酸甜，香味浓， 营养价值甚高，果肉中总糖含量45. 90% 50.沈％，还原糖含量33. 66% 46. 94%，远高于含糖量较高的柑桔；粗蛋白和Vc含量接近梨和苹果等，果实中还含有17种氨基酸，其中7种人体必需氨基酸占氨基酸总量的45. 85% (赵一鹤等，《泰国甜角不同品种果实营养成分分析》植物资源与环境学报，2005，14 (3))，还富含多种矿质元素，其钙、磷等微量元素的含量明显高于一般水果，且比例平衡(Ca:P=l:l)。有研究表明甜角果肉具有抑制细菌、降血糖、 抗突变和抗致癌物、保护细胞损伤等作用(赵一鹤等，《世界酸角研究现状及进展》云南农业大学学报，2005 (1));甜角种子中的罗望子胶含量达58. 5% 65. 0%，为一种类似果胶但性能又优于果胶的良好食品增稠剂和稳定剂，用于改善调味汁的口感及稳定性、增强制品的稠厚感和甜味、使颗粒不易沉降等具有良好的效果，世界上很多发达国家的食品、医药、 纺织、乳胶、建筑、木材、粘合剂、炸药、造纸、油脂及日化等行业都越来越广泛地应用罗望子胶(王元兰等，《罗望子胶及其在食品工业中的应用》食品研究与开发，2006 (9));甜角的种皮可以提取抗氧化剂和食品添加色素；种子中蛋白质含量达16. 85% 19. 50%，可用于加工豆蛋白饲料；甜角叶可作饮水漂白剂，也可作蔬菜食用；甜角木材质地坚硬致密，边材黄白色，心材黑紫带棕色，被誉为“马德拉红木”；甜角树树型优美，枝叶常绿，花量大，花期长，4 8月均不断开花，是一种理想的庭院观赏乔木，若对幼树施以园艺盆景技术，是一种上好的盆景制作材料和观赏树，栽植在公园、庭院、城市街道、农村道路旁，起到观赏和遮荫的作用(赵一鹤等，《泰国甜角引种栽培试验》浙江林业科技，2005(1))。甜角做为集果用、 叶用、材用和观赏于一体的多用途的资源植物，已经越来越受到人们的关注。目前甜角的繁殖多采用实生繁殖或嫁接繁殖，实生繁殖方法存在两方面的问题， 一是酸角种子在自然条件下不能长期贮存，易遭受虫害，坚硬的外种皮使其发芽率很低且发芽时间长，二是实生繁殖的方法受季节限制的影响，繁殖速度也较慢，像泰国甜角实生育苗需10 12年才能挂果，并且存在结实晚、产量不稳定、果荚品质退化，且树枝高大、采摘不易等问题，另外，实生苗的后代分离也是一个大问题。甜角的嫁接繁殖技术研究始于20 世纪90年代，专家对甜角的嫁接方法、嫁接时间和苗龄效应等方面有所研究，是目前甜角繁殖的主要途径，其特点是可以保持母本优良性状和速生等，嫁接繁殖造林与实生繁殖相比，可提前几年挂果，但不同地区由于品种、气候等原因，嫁接技术也存在差异，不同嫁接时期和嫁接方法，嫁接成活率存在较大差异。在华南地区的气候条件下，以春季切接法较好， 嫁接成活率约为80%，夏秋高温干旱季节成活率较低；而单芽腹接由于罗望子生物碱含量较高，皮层薄、芽体小，削芽及剥皮均不易，因此，嫁接成活率较低，肖艳、赵一鹤等对泰国甜角的嫁接实验显示，效果最好的切接法嫁接繁殖的平均成活率也仅达到75. 0% 76. 4%。利用离体组织培养的方法对甜角进行快速繁殖，可以不受自然条件的影响进行工厂化生产，可以打破季节的限制，快速获得变异小、遗传稳定性高的再生植株，世界上有45 万种植物，其中高等植物约有20余万种，我国有高等植物3万余种。目前组培试验成功的只有几百种，不同种类，不同品种以及基因型稍微不同，组培各个阶段所用的基本培养基、 植物激素的种类以及配比亦不相同，如何使甜角的组织培养既高效又实用是甜角进行组织培养快速繁殖的技术关键。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种甜角离体组织培养及快速繁殖的方法，使甜角实现大规模工厂化生产。本专利技术采用的技术方案是先将选洗干净的甜角种子冷藏灭菌处理，然后将种子接种于无菌苗培养基，培养基组分为MS基本培养基+6-BA 0. 8 1. 2mg/L+NAA0. 1 0. 5mg/L,培养无菌苗，无菌苗的子叶切块儿接种到诱导愈伤-分化培养基，培养基组分为 MS基本培养基+6-BA7 10mg/L+椰汁18 22ml/L，诱导产生愈伤组织并分化出分化芽，得到的分化芽转入增殖培养基，培养基组分为MS基本培养基+6-BA0. 8 1. 2mg/L+IBA0. 3 0. 8mg/L+活性炭0. 3 0. 5g/L，培养出不定芽，较小的不定芽切成1_2节的小段儿，再次接种于增殖培养基，继续培养分化不定芽，较大的不定芽接入生根培养基，培养基组分为 1/2MS+ ΝΑΑ0. 3 0. 5mg/L+活性炭0. 3 0. 5g/L，生根培养得到生根苗，生根苗通过炼苗、 移栽形成再生植株。甜角种子的冷藏处理为在3 6°C冷藏室内冷藏15天。甜角种子灭菌方法为将选洗、冷藏后的种子用自来水冲洗3 4h，用75%体积分数的酒精溶液浸泡2 3min，取出后用无菌水冲洗3 5次，再用0. 1%质量分数的升汞溶液浸泡10 15min，取出后用无菌水冲洗5次。无菌苗培养、分化芽培养、不定芽培养和生根培养的培养条件相同培养温度 23 26°C，光照时间11 13h/d，光照强度2500Lux。炼苗时保持湿度80 90%、温度22 士 2°C。无菌苗培养时间为20-23d，分化芽培养时间为20-25d，不定芽培养时间为 35-45d，生根培养时间为^-32d，炼苗时间2-3d。本专利技术技术方案通过以下步骤实现步骤一，种子处理将选出的甜角种子除去果肉，用水冲洗干净，放置在3 6°C冷藏室内冷藏15天后取出。步骤二，种子灭菌将选洗、冷藏后的种子用自来水冲洗3 4h，用75%体积分数的酒精溶液浸泡2 3min，取出后用无菌水冲洗3 5次，再用0. 1%质量分数的升汞溶液浸泡10 15min，取出后用无菌水冲洗5次。步骤三，无菌苗培养将灭菌后的种子接种于无菌苗培养基，培养基组分为MS基本培养基+ 6-BA 0. 8 1. 2mg/L+NAA0. 1 0. 5mg/L,培养条件为温度23 ，光照时间11 13h/d，光照强度2500LUX，培养出无菌苗，培养时间20 23d。步骤四，分化芽培养无菌苗生长3-5天后，取子叶切成0. 3 0. 5cm的小块，接种在诱导愈伤-分化培养基上，培养基组分为MS基本培养基+6-BA 7 10mg/L+椰汁18 22ml/L，培养条件同步骤三，诱导产生愈伤组织并分化出分化芽，培养时间20-25d，每块愈伤可得到2-4个分化芽。步骤五，不定芽培养将分化芽转入增殖培养基，培养基组分为M本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张先云，李长看，胡述龙，
申请(专利权)人：郑州师范学院，
类型：发明
国别省市：