【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及利用实时荧光PCR技术检测水体和食品样品中01群霍乱弧菌、0139群霍乱弧菌和非01/非0139群霍乱弧菌的试剂盒及方法。尤其涉及检测所使用的特异性引物和探针序列。
技术介绍
对霍乱疫区的外环境水体和食品样品进行霍乱弧菌监测是霍乱防治工作的重要组成部分，监测结果可对评价外环境水体中霍乱弧菌污染状况、制订霍乱防控策略提供科学依据，另外，对环境水体和食品样品中的霍乱弧菌的监测可作为霍乱流行的预警指标。水体和食品样品中的霍乱弧菌检测通常是采用传统的碱性蛋白胨增菌法，国家卫生部编制的 《霍乱防治手册》及GB15984-1995《霍乱诊断标准及处理原则》首选方法也是此法。但在霍乱的非流行期，霍乱弧菌在外环境水体中自然生存状态下菌量较少，同时由于外环境水体中存在大量其它杂菌，会对霍乱弧菌的分离鉴定产生干扰；并且水体中含有大量的有机物， 常规法在增菌过程中有机物在微生物的作用下PH值迅速降低，严重抑制着霍乱弧菌的生长，致使霍乱弧菌不易检出而容易出现假阴性，造成在疫情监测和调查中产生误差，不适应烈性传染病的监测需要。因此，有必要研究一种方法，可同时针对不同血清型霍...
【技术保护点】
１．不同血清型霍乱弧菌的ｍ－ＰＣＲ检测试剂盒，其特征在于包括如下引物和探针：①霍乱弧菌的Ｏ１群ｒｆｂ基因的检测引物和探针序列：正向引物（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ．１）：５′－ＧＣＣＣＧＴＴＴＴＧＣＡＴＴＡＴＧＧＡＴ－３′，反向引物（ＳＥＱ ＩＤＮＯ．２）：５′－ＣＣＴＴＴＴＡＣＣＧＣＣＧＣＡＡＴＡＣＧＡ－３′，探针（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ．３）：５′ＦＡＭ－ＴＧＡＴＣＣＧＡＣＡＡＧＣＣＣＡＡＡＴＧＣＣＡＣＴＡ（ＭＧＢ）－３′；②霍乱弧菌的ｈｌｙＡ基因的检测引物和探针序列：正向引物（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ．４）：５′－ＧＡＧＡＡＡＴＴＴＧＡＧＣＧＣＡＡＡＧＡＧＧＴＴＴ－３′，反向引物（ＳＥ...
【技术特征摘要】
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