【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种微生物的定量方法，尤其是涉及一种基于时间序列观察、自动成像和数字化分析的落式荧光显微镜法的海洋环境中独特的含细菌叶绿素(Bchl.a)的微生物群的准确定量方法，
技术介绍
含细菌叶绿素的微生物(BCM，Bacteriochlorophyll a Containing Microbes) 是海洋环境微生物群落中一类具有特殊功能的组分，由于缺少有效的丰度计数用于构建其动力学数据，其生态功能还不是很清楚。好氧不产氧光合异养细菌(AAPB，Aerobic Anoxygenic Phototrophic Bacteria)是一类新近认识的BCM主要类群，已经有报道表明， 这类菌群对海洋碳循环有着极其重要的作用。全面理解AAPB的广泛分布和独特功能将对目前建立在产氧光合作用基础上的海洋能量和氧平衡的理解产生深远的影响。然而一直以来，由于单细胞细菌叶绿素含量很低，且受叶绿素的红外干扰，BCM的准确定量比较困难。目前为止，用于海洋中BCM的计数方法主要有以下几种红外快速脉冲速率 (IRFRI )诱导荧光瞬时动力学技术(Kolber et al.，2000)、红...
【技术保护点】
１．海洋中含细菌叶绿素的微生物的定量方法，其特征在于包括以下步骤：１）将样品预过滤、固定、ＤＡＰＩ染色、过滤并制片；２）用配有红外敏感的电子耦合组件照相机和汞灯的全自动落式荧光显微镜进行观察，以不同的荧光激发块分别对同一视野的红外荧光、蓝细菌红色荧光和ＤＡＰＩ蓝色荧光图像进行观察和拍照，所有的图像均通过自动曝光获得，显微聚焦后，进行ＩＲ、Ｃｙａｎｏ和ＤＡＰＩ图像时间序列上的获取；３）用Ｉｍａｇｅ－Ｐｒｏ Ｐｌｕｓ软件对图像中的细胞进行识别和分析，并获得新的二元数字化图像；４）计算：在一个相同的视野下，分别获得时间序列下初始时间的ＩＲ图像、平台期的Ｃｙａｎｏ图像和初始时间的Ｄ...
【技术特征摘要】
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