提高产1，3-丙二醇融合菌筛选效率的方法技术

本发明专利技术公开了一种提高产1，3-丙二醇融合菌筛选效率的方法，主要过程包括：选择亲本菌株；亲本菌株进行酶解脱壁得到原生质体；原生质体进行灭活处理；灭活的原生质体进行原生质体融合；筛选融合子，选择性能优良的目的融合菌；优良融合菌株作为亲本进入下一轮基因组重排过程，至获得综合性能优良的菌株；其中亲本菌株酶解脱壁得到的原生质体或灭活原生质体进行膜过滤处理后进行后续处理操作。与现有基因工程融合菌筛选方法相比，本发明专利技术方法可以有效提高目标菌株的筛选效率，同时具有操作方便，不需昂贵的实验仪器，适合于工业菌株育种等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种应用基因组重排技术制备产1，3-丙二醇基因工程融合菌的筛选方法，特别是提高基因工程融合菌筛选效率的方法，属于工业生物

技术介绍
1，3_丙二醇(PDO)是一种重要的化工和医药中间体原料，可作为有机溶剂应用于油墨、印染、乳化剂、抗冻剂等。PDO最主要的用途，是合成新型聚酯高分子材料聚对苯二甲酸丙二酯(PTT)的单体。PTT是目前国际上公认的六大石化新产品之一。与聚对苯二甲酸乙二酯(PET)、聚对苯二甲酸丁二酯(PBT)和尼龙等比较，PTT具有良好的印染特性、富有弹性、抗紫外线、静电性能好、可生物降解并再生利用等多种优良特性，因此PTT在纺织服装业、地毯装饰业、工程塑料等众多领域有着十分广阔的应用前景。据估计，目前仅我国每年就需求PDO上百万吨，而且在未来十年我国对PDO的需求量还将继续增大。PTT生产的关键在于单体原料PDO的来源，其生产成本直接影响着PTT的工业化生产和应用规模。1，3_丙二醇的生产方法主要有化学合成法和微生物发酵法。化学合成法目前仅有国外DuPont和Siell公司以及国内的少数几家单位在进行小规模工业化生产。技术路线分别是德国Degu本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种提高产１，３－丙二醇融合菌筛选效率的方法，包括如下过程：（１）选择亲本菌株，或菌种经适宜培养得到亲本菌株；（２）亲本菌株进行酶解脱壁得到原生质体；（３）原生质体进行灭活处理得到灭活原生质体；（４）灭活的原生质体进行原生质体融合；（５）用含有目的发酵产物的培养基筛选融合子，选择性能优良的目的融合菌；（６）步骤（５）获得的优良融合菌株作为亲本进入下一轮基因组重排过程，至获得综合性能优良的菌株；其特征在于：步骤（２）的亲本菌株酶解脱壁得到的原生质体或步骤（３）的灭活原生质体进行膜过滤处理，膜过滤处理采用０．１５～０．８５μｍ滤膜过滤除去对原生质体融合有影响的菌体，然后进行后续处理操作。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：金平，王领民，师文静，李晓姝，王崇辉，
申请(专利权)人：中国石油化工股份有限公司，中国石油化工股份有限公司抚顺石油化工研究院，
类型：发明
国别省市：11