一种尿液样品的等电聚焦方法技术

本发明专利技术的目的是提供一种在对尿液样品使用等电聚焦电泳进行蛋白质的检测和分析时，除盐效果明显，并且较容易达到除盐时所需要的聚焦伏小时数的方法。本发明专利技术较常规等电聚焦电泳的参数和实验条件作了如下三点改进：1、将除盐的低电压程序由通常的10-12小时，延长为10-14小时；2、在1000V左右增加为8小时，除盐效果明显增强，滤纸条搭盐桥处黄色变浅；3、在1000V至8000之间设置3000V、6000V各1-3小时过渡，较常规聚焦更容易达到60000VHr。采用本发明专利技术的方法进行等电聚焦电泳，除盐效果明显，样品变得更有利于达到理想电压。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术专利申请涉及一种在对尿液样品进行等电聚焦电泳的方法，属于生物检测

技术介绍
凝胶电泳技术(gel electrophoresis)基于电场中带电蛋白质的迁移，是生物医 学领域常用的用来分离、鉴定和纯化蛋白质的方法。其优点在于将蛋白质分离的同时将其 纯化，使研究者可以快速鉴定混合物中不同蛋白质的数量或者特定蛋白制备品的纯度。而 且，可以确定一个蛋白质的关键性质，如等电点和大概的分子质量。其中聚丙烯酰胺凝胶电 泳(简称PAGE)具有较高的分离能力，广泛的用于蛋白质的分离和鉴定。聚丙烯酰胺作为 分子蹄，大致按蛋白质的荷质比成比例的减慢其迁移速度，迁移也受蛋白质形状的影响。一 种通常用来确定蛋白质纯度和分子质量的电泳方法用到了十二烷基硫酸钠SDS，SDS与大 部分蛋白质结合的数量大致和蛋白质分子质量成比例，并且贡献了大量净负电荷，使蛋白 质的本身电荷不再显著并使每个蛋白质都有相似的荷质比。另外，SDS的结合改变了蛋白 质的原始构型，大部分蛋白质都呈现相似的形状，因此SDS-PAGE电泳几乎仅根据质量来分 离蛋白质，小分子多肽迁移的更快，因此该方法可以很好的根据未鉴定蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种对尿液样品等电聚焦电泳的方法，包括将水化好的胶条与电泳设备接触，以及设置等电聚焦电泳的运行条件，其特征在于电泳时的电压和时间采用如下的设置：（１）在３０伏的电压下电泳１０－１４个小时；（２）在２００伏或３００伏的电压下电泳１－３小时；（３）在１０００伏的电压下电泳５－８小时；（４）在３０００伏的电压下电泳１－３小时；（５）在６０００伏的电压下电泳１－３小时；（６）在８０００伏的电压下电泳３－５小时；（７）保持８０００伏的电压电泳４－８小时至伏小时数达到６００００伏小时；（８）在５００伏的电压下保持０．５－２小时。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李顺民，祁爱蓉，
申请(专利权)人：李顺民，祁爱蓉，
类型：发明
国别省市：94